供应TdB品牌DSS –小鼠结肠炎造模
硫酸葡聚糖钠盐(DSS)结肠炎造模经常遇到,但确切机制不是很清楚,一般认为肠上皮单层细胞受DSS损伤后,免疫系统受到肠道微生物其代谢物不断刺激,产生炎症。在此简单介绍一下造模步骤(小鼠)。
1. 选择8-10周龄的实验小鼠,称重(理想重量 在20g左右),打孔标记。将DSS充分溶解在高温灭菌水中,浓度按实验需求配制。
2. 如果是损伤/治疗恢复造模,可将 DSS 配制为2%,如果是急性结肠炎造模,可以选择3%。喂饲量为 100ml/笼(4-5只小鼠),无论有无剩余,每隔2天必须换新配的DSS。
3. 损伤/恢复造模一般是连续喂饲2%DSS 7天,然后再换为清水饲养7天。实验人员也可以根据自己的实验内容进行调整(如不涉及到恢复,可以7天后就处理小鼠,如需要观察长期炎症可以多喂养几天)急性结肠炎造模,小鼠可能坚持不到7
天。无论哪种造模,实验人员应从第一天起,记录小鼠的体重、粪便出血情况、外观、行为等。
4. 小鼠的体重一般是从饲养DSS第6天开始下降,恢复喂养清水3天左右体重开始增加。当然这不是绝对的,小鼠的基因型,饲养条件也会影响。在处理小鼠前,千万不要违背实验动物伦理规定,如体重过低,便血非常严重等,要不然文章中不好交待。
小鼠处理后,测量记录结肠尺寸(会变短,膨胀),一部分储存到液氮中用于后续的基因分析,一部份保存在福尔马林中用于组织学分析。
DSS 可以选瑞典TDBcons的产品,Mw: 35-55KDa
◆硫酸葡聚糖>DSS>诱导肠炎模式动物的优点
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溃疡性结肠炎(UC)是一种病因和发病机制尚不十分清楚的慢性肠道炎症性疾病,建立适当的结肠炎动物模型对于研究UC的病因、发病机制以及新的治疗方法具有重要意义。人们制作了多种动物模型对其进行研究,日本学者于1985年首次应用硫酸葡聚糖制备了鼠UC模型,此后,该方法广泛用于筛选治疗炎症性肠病(IBD)的新方法和临床前新药物的开发,也用于研究IBD的发病机制。其具备以下优点:
◆参考方法
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方法一:
小鼠给予含50g/L硫酸葡聚糖(葡聚糖硫酸钠)5000或40000的蒸馏水自由饮用7d,出现体重减轻、腹泻、血便等急性肠炎的表现.病理学切片HE染色发现小鼠病变结肠腺体结构紊乱,黏膜和黏膜下单核细胞和多核细胞浸润.DSS组病变肠段组织GSH表达较对照组明显减少(2±0.6 vs 3.14±1.0,t = 3.95, P = 0.01<0.05),病变结肠分泌的IL-4明显升高(38.7±4.7 vs 28.7±6.7,t = 3.16, P = 0.009<0.01),IFN-g轻度降低(P>0.05).
资料来源:《GSH在DSS诱导的小鼠实验性肠炎中的作用》
小鼠给予含50g/L硫酸葡聚糖(葡聚糖硫酸钠)5000或40000的蒸馏水自由饮用7d,出现体重减轻、腹泻、血便等急性肠炎的表现.病理学切片HE染色发现小鼠病变结肠腺体结构紊乱,黏膜和黏膜下单核细胞和多核细胞浸润.DSS组病变肠段组织GSH表达较对照组明显减少(2±0.6 vs 3.14±1.0,t = 3.95, P = 0.01<0.05),病变结肠分泌的IL-4明显升高(38.7±4.7 vs 28.7±6.7,t = 3.16, P = 0.009<0.01),IFN-g轻度降低(P>0.05).
资料来源:《GSH在DSS诱导的小鼠实验性肠炎中的作用》
方法二:
将分子量为50 00或40000的DSS溶于饮用水,配成3% DSS溶液,让BALB/C小鼠自由饮用7d,建立小鼠急性结肠炎模型;②让BALB/C小鼠自由饮用3% DSS溶液7d,然后饮用不含DSS蒸馏水14d,建立小鼠慢性结肠炎模型;模型建立成功的标志为饮用3% DSS 7 d后出现半稀便、腹泻、大便隐血(+)和肉眼血便中的任一症状。
资料来源:《葡聚糖硫酸钠致小鼠结肠炎模型的建立与评价》。
将分子量为50 00或40000的DSS溶于饮用水,配成3% DSS溶液,让BALB/C小鼠自由饮用7d,建立小鼠急性结肠炎模型;②让BALB/C小鼠自由饮用3% DSS溶液7d,然后饮用不含DSS蒸馏水14d,建立小鼠慢性结肠炎模型;模型建立成功的标志为饮用3% DSS 7 d后出现半稀便、腹泻、大便隐血(+)和肉眼血便中的任一症状。
资料来源:《葡聚糖硫酸钠致小鼠结肠炎模型的建立与评价》。
已有研究表明,不同分子量的DSS所诱导的病变特征不同,如用5000, 40,000和500,000的DSS喂养小鼠,结果典型病变只出现于5,000组和40,000组,50,000组的病变主要见于盲肠和上段结肠,此外,DSS结肠炎的严重度并不依赖于DSS摄入量,而是由DSS浓度决定,小鼠饮用的DSS量差别较小时不影响诱导出的结肠炎严重度。再次,不同种属对于不同分子量的DSS的敏感度不一。