IP/Co-IP细胞裂解液-500ml品牌:JinPan | 货号:JP-8142-500ml
IP/Co-IP Cell Lysis Buffer
【保存条件】
4ºC 保存
【操作方法】
裂解贴壁细胞的方法(裂解前可加入相应蛋白酶/磷酸酶抑制剂):
1. 小心地从细胞中去除培养基。 用冰冷的 PBS 清洗一次。
2. 将冰冷 IP 细胞裂解缓冲液添加到细胞板中(6 孔板中每孔加入 200-400μl),并在冰上孵 育 5 分钟,中途不间断混匀。
3. 将裂解液转移至微量离心管中,以约 13,000×g 的速度离心 10 分钟,以在 4°C 下沉淀细 胞碎片。
4. 将上清液转移到新的试管中,以测定蛋白浓度并进行进一步分析。
裂解悬浮细胞的方法(裂解前可加入相应蛋白酶/磷酸酶抑制剂):
1. 将细胞悬液以 1,000×g 离心 5 分钟以沉淀细胞,丢弃上清液。
2. 用冰冷的 PBS 洗涤细胞一次,以 1,000×g 离心 5 分钟以沉淀细胞。
3. 将冰冷的 IP 细胞裂解缓冲液添加到细胞沉淀中。每 50 mg 湿细胞沉淀(10:1 v / w)使 用 500μl 裂解缓冲液。
4. 在冰上孵育裂解物 5 分钟。通过在 4°C 下以〜13,000×g 离心 10 分钟去除细胞碎片。
5. 将上清液转移到新的试管中,以测定蛋白浓度并进行进一步分析。
【注意事项】
1. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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