SDS细胞裂解液-500ml品牌：JinPan | 货号：JP-8151-500ml

SDS lysis buffer

【保存条件】 

4℃保存，有效期 1 年。 

【概述】 

SDS 裂解液是一种较为强烈的细胞组织裂解液，可用于动物、植物的细胞或组织样品， 也可以用于真菌或细菌样品。SDS 裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的 PAGE、 Western、免疫沉淀(immunol precipitation，IP)、免疫共沉淀(co-IP)和 ELISA 等。 

【使用建议】 

1.对于培养细胞样品： 

a.取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入 PMSF，使 PMSF 的最终浓度为 1mM，或者根据实验需要加入适当的蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。 

b.对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋 白没有干扰，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触动物细胞 1-2 秒后，细胞就会被裂解。 植物细胞宜在冰上裂解 2-10min。如果用于 ChIP，初步裂解后需在冰浴上继续裂解 10 分钟。 

对于悬浮细胞：

离心收集细胞，轻轻涡旋或者弹击管底以把细胞尽量分散开。按照 6 孔板每 孔细胞加入 150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。如果细胞量较多，必需分装成 50-100 万细胞/管，然后再裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。 如果用于 ChIP，初步裂解后需在冰浴上继续裂解 10 分钟。 

对于细菌或酵母：

对于 1ml 菌液或酵母液，离心去上清，如果有必要可以使用 PBS 洗涤一 次，充分去除液体后，轻轻涡旋或者弹击管底以把细菌或酵母尽量弹散。加入 100-200μl 裂 解液，轻轻涡旋或者弹击管底以混匀，冰上裂解 2-10min。如果希望获得更好的裂解效果， 细菌和酵母可以分别使用溶菌酶和破壁酶(Lyticase)消化，然后再使用本裂解液进行裂解。 

裂解液用量说明：

通常6孔板每孔细胞或者1ml的菌液或酵母液中的细菌和酵母量加入150μl 裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到 200μl 或 250μl。每 100 万动物细胞用 100μl 本产品裂解后获得的上清，其蛋白浓度约为 2-4mg/ml，不同细胞所不同。 c.充分裂解后，10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的 PAGE、Western 和 ChIP 等操作。

2.对于组织样品： 

a.把组织剪切成细小的碎片。 

b.融解 SDS 裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入 PMSF，使 PMSF 的 最终浓度为 1mM，或者根据实验需要加入适当的蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。 

c.按照每 20mg 组织加入 150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添 加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。) 

d.用玻璃匀浆器匀浆，或使用组织研磨仪研磨，直至充分裂解。也可以把组织样品冷冻后液 氮研磨，研磨充分后加入裂解液进行裂解。如果用于 ChIP，初步裂解后需在冰浴上继续裂 解 10 分钟。 

e.充分裂解后，10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的 PAGE、Western 和 ChIP 等操作。每 20mg 冻存的小鼠肝脏组织用 200μl 本裂解液裂解后获得的上清，其蛋白浓 度约为 15-25mg/ml，不同状态的不同组织有所不同。 

f.如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈涡旋使样品 裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀 浆器或研磨设备，缺点是不如匀浆或研磨那样裂解得比较充分。

【注意事项】 

1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 

2. 本产品长时间低温存放可能会出现沉淀，可在 37ºC 水浴约 10 分钟以充分溶解沉淀。沉 淀完全溶解混匀后即可正常使用。 

3. 裂解样品的所有步骤都需在冰上或 4℃进行。 

4. 该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

本网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗，仅可用于科研等非医疗目的。