5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液（DTT）品牌：JinPan | 货号：JP-8129-10ml
SDS-PAGE Protein Loading Buffer,5×(with DTT)
【保存条件】
建议分装冻存，避免反复冻融，-20℃避光保存，有效期 1 年
【概述】
5×SDS-PAGE 单色蛋白上样缓冲液可保护蛋白质在样品制备步骤中免受热降解，并在
SDS-PAGE 运行期间防止 pH 值变化。一些蛋白质对在 Tris 缓冲液中电泳期间温度波动引起
的 pH 变化敏感，优化后的上样缓冲液组分可防止在 SDS-PAGE 电泳之前的样品加热过程中
以及电泳过程中蛋白质降解。SDS 可与蛋白质结合使蛋白质-SDS 复合物上带有大量的负电
荷，这时蛋白质本身的电荷完全被 SDS 掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异；SDS 还
可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT 可以断开半胱
氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质结构，消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构
上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。
溴酚蓝作为指示剂，用于追踪电泳进度。
【使用建议】
1. 室温或 37℃水浴解冻 5×SDS-PAGE 单色蛋白上样缓冲液，并摇晃混匀。
2. 请按每 40μl 蛋白样品加入 10μl 上样缓冲液的比例(五倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度
过高，可用双蒸水稀释。
3. 混匀后，100℃水浴加热 5-10 分钟，使蛋白变性。
4. 冷却至室温后，10000-14000rpm 离心 2-5 分钟，取上清直接上样电泳即可。
【注意事项】
1. DTT 对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
2. 该产品于-20℃保存时会出现 SDS 沉淀，使用前请确保溶液完全复溶混匀，有必要时可
置于 37℃水浴促溶。
3. 蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂，PH 值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液
可能会呈现深棕色，不影响产品使用。
4. 聚丙烯酰胺凝胶浓度为 8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在 30kd 左右， 胶浓度为 12%
时，约在 20kd 左右，胶浓度为 15%时，大概在 10kd。请根据自己目标条带来判断结果
电泳时间。
5. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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