SDT裂解液,常用生化试剂

SDT裂解液品牌:JinPan | 货号:JP-8452-500ml

SDT Lysis Buffer

【保存条件】
4℃保存,有效期 6 个月。-20℃保存,有效期 1 年。
【概述】
SDT 裂解缓冲液用于裂解哺乳动物细胞和组织。其含有 SDS、Tris-HCl、DTT,对样本全蛋白有很好的提取效果。 但其中所含的 SDS 会使蛋白质变性失活,因此不适合后续活性相关实验。试剂请于避光保存,以确保其稳定性。
【使用建议】
1. 取 100mg 动物组织或细胞(组织提前剪成小块)加入 500μl PBS 溶液中初步匀浆(60 Hz,45s),再加入 500μl SDT 裂解液。
2. 将上一步加有 SDT 裂解液的动物组织或细胞于 4℃进行匀浆(60 Hz,20s)。
3. 低速短暂离心将管壁液体离下,后置于沸水浴(或 100℃)3min。
4. 再次使用探头超声:40-50W 超声 5s,间隔 5s,一共 6 个循环。
5. 将溶液置于沸水浴(或 100℃)2min,10000g 离心 10min。
6. 收集上清进行后续实验。
【注意事项】
1. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 该试剂仅用于科研领域,不得用于临床诊断或其他用途。
3. SDT 裂解液不适用于后续做与活性相关的实验,如免疫共沉淀。在进行蛋白质浓度测定时由于 SDT 裂解液中含有 SDS 和 DTT,因此 Bradford 法和 BCA 方法不适用,而应选择去垢剂和还原剂均兼容的荧光法测定蛋白质浓度。各种裂解液中含有的去垢剂均会影响胰蛋白酶活性,并且对质谱分析产生很大影响,因此均需要在蛋白质样品酶解前除去。
4. SDT 裂解液中含有较高浓度的 SDS,在低温下可能析出为正常现象,使用前只需将溶液置于 37℃加热
5-10min 或至溶解即可。

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