多糖多酚植物基因组DNA提取试剂盒品牌：genefist | 货号：GF360 
储存条件
该试剂盒置于室温（15-25℃）干燥条件下，可保存18个月，更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保 存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预 热10 min，以溶解沉淀。
产品简介及特点
本试剂盒采用特异性结合 DNA 的离心吸附柱和独特的缓冲系统，能从多种植物组织中分离纯化高质量 基因组 DNA，独特的沉淀溶液可以沉淀去除多糖多酚植物样本中的蛋白质、多糖以及酚类等杂质。提取的基 因组 DNA 纯度高，质量稳定可靠。 使用本试剂盒纯化的基因组 DNA 适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern 杂交、芯 片检测、高通量测序等实验。
简便快捷：1 h内即可获得高纯度的基因组DNA。
适用广泛：适用于多种植物组织，尤其是多糖多酚植物。
安全无毒：无需酚/氯仿等有毒有机试剂。
超纯高效：高效获得高纯度的DNA，可直接用于PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。
注意事项
1.样品应避免反复冻融，否则会导致提取的 DNA 片段较小且提取量也下降。 2.若溶液 GS1 或溶液 PBC 中有沉淀，可在 37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。
事前准备：
1.溶液 GS2 制备：加入 2ml 无菌水到 0.46g 溶液 GS2 浓缩液粉末中,旋涡 1 分钟，50℃孵育至完全溶解，得 溶液 GS2。制备好的溶液 GS2 长期保存需要储存在 4℃。
2.向溶液 PBC 中加入 30ml 无水乙醇，混匀，室温保存。
3.向漂洗液 PW 中加入 64ml 无水乙醇，混匀，室温保存。
4.在研磨组织之前解冻溶液 GS2;将水浴或金属浴预热至 65℃。
操作步骤
使用前请先在溶液PBC和漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。
1.取植物新鲜组织约 100 mg 或干重组织约 30 mg，加入液氮充分碾磨。
注意：使用超过推荐量的样品可能堵塞吸附柱，降低回收率和质量。
2.立即将研磨好的粉末迅速转移至 1.5 ml 微量离心管中，并添加 360μ 溶液 GS1、40μl 制备好的溶液 GS2 和 25μl RNaseA 溶液，迅速涡旋混匀。
注意：不要预先混合这些溶液。
注意：为了获得最佳产量，彻底研磨组织，不充分研磨的组织中的 DNA 可能无法被试剂接触到;为了得到 完整的 DNA，新鲜组织应在液氮中迅速冷冻并存储在-80℃中。
3.将离心管放在 65℃水浴 20 min，水浴过程中颠倒离心管以混合样品数次。
4.加入 130 μl 溶液 PGP，涡旋振荡 1 min，混匀后将离心管置于冰上静置 5min，然后 12,000 rpm (~13,400×g ) 离心 5 min。
5.转移上清至过滤柱 CS1 中（过滤柱 CS1 放在收集管中），12,000 rpm (~13,400×g)离心 1 min ，转移滤 液至新的离心管中。
6.向滤液中加入 1.5 倍体积的“溶液 PBC（已添加无水乙醇）”，充分混匀，此时可能会出现絮状沉淀，但不 影响后续 DNA 的纯化。 例如：对于 500ul 滤液，加入 750ul 溶液 PBC（已添加无水乙醇）
7.将上一步所得溶液和絮状沉淀“分次”转移到吸附柱 CG1 中（吸附柱 CG1 放在收集管中），12,000 rpm (~13,400×g ) 离心 1 min，倒掉废液，将吸附柱 CG1 放入收集管中。
8.向吸附柱 CG1 中加入 700μl 漂洗液 PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm (~13,400× g)离心 1 min，丢弃废液，将吸附柱 CG1 放入收集管中。
9.重复操作步骤 8。
10.将吸附柱 CG1 放回收集管中，12,000 rpm (~13,400×g)离心 2 min，弃收集管，然后将吸附柱 CG1 转移 到新的离心管中，室温晾干 5-10 min。
注意：乙醇残留会抑制后续的酶反应，所以晾干时要确保乙醇挥发干净，但也不要干燥太长时间，以免 难以洗脱 DNA。
11.在吸附柱 CG1 中加入 50-200μl 洗脱缓冲液 TB，室温放置 3-5 min，12,000rpm(~13,400×g)离心 2 min， 将溶液收集到离心管中。
注意：洗脱缓冲液体积不应少于 50μl，体积过小影响回收效率。洗脱液的 pH 值对于洗脱效率有很大影 响。若用 ddH2O 做洗脱液应保证其 pH 值在 7.0-8.5 范围内，pH 值低于 7.0 会降低洗脱效率；且 DNA 产物 应保存在-20℃，以防 DNA 降解。
为增加基因组 DNA 的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱 CG1 中， 室温放置 2 min，12,000 rpm (~13,400×g )离心 2 min。
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