Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas
核糖核酸酶A,来源于牛胰腺
Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas 核糖核酸酶A,来源于牛胰腺
NBS0302-100mg
NBS0302-500mg
NBS0302-1g
品牌:JinPan
关键词
Ribonuclease 3’-pyrimidinooligonucleotidohydrolase 核糖核酸3′-嘧啶寡核苷酸水解酶;Ribonuclease I 核糖核酸酶I;Pancreatic ribonuclease 胰核糖核酸酶;Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas;EC No: 3.1.27.5;CAS NO:9001-99-4;
产品描述
核糖核酸酶A,英文名Ribonuclease A,缩写RNase A,CAS NO:9001-99-4,一种核糖核酸内切酶(endoribonuclease),特异性识别嘧啶类核苷酸3’-核糖磷酸基团,如序列pG-pG-pC-pA-pG经切割产生pG-pG-pCp和A-PG,当切割单链RNA时活性最高,推荐工作浓度为1-100μg/ml,兼容于各种反应体系。低盐浓度(0-100mM NaCl),可切割单链RNA,双链RNA,以及RNA-DNA杂交形成的RNA链。高盐浓度(≥0.3M),RNase A仅特异性切割单链RNA。RNase A不会水解DNA,因DNA缺少形成环形中间体必需的2’-OH。
核糖核酸酶A,英文名Ribonuclease A,缩写RNase A,常常用在质粒DNA或基因组DNA制备过程中去除RNA,此制备过程中DNase酶活性的存在与否是需要重视的污染之一,可采用水浴煮沸这种传统方法来灭活DNase活性。也可以用来去除蛋白样品中的RNA污染。另外,RNase A还可用于RNA序列分析,RNA酶保护分析等实验。
产品特性
1)CAS NO:9001-99-4
2)来源:牛胰腺
3)比活力:≥50 Kunitz units/mg
4)最佳工作pH:7.6(pH 6.0-10.0有活性)
5)最佳工作温度:60℃(15-70℃有活性)
6)激活剂:钠盐、钾盐等
7)抑制剂:核酸酶抑制剂(RNase inhibitor)
8)稳定性:RNase在加热和去污剂条件下都很稳定。RNase A溶液可耐受温度高达100℃。于此高温下,pH 2.0-4.5范围内溶液稳定性最高。
9)溶解性:溶于水(10mg/ml)
保存与运输方法
保存:-20℃干燥冻存,3年稳定。
运输:冰袋运输。
使用方法
1. 储存液制备
【注意】:此为RNase A储存液配制的常用方法之一,也可以根据实验室传统的方法,或者参考文献资料使用其他方法制备储存液(如直接溶于10mM Tris-HCl, pH 7.4)。
a)取适量RNase A溶解于10mM醋酸钠(pH 5.2),配制成10mg/ml RNase A储存液;
b)100℃加热15min,之后冷却到室温,然后加入1/10体积的1M Tris-HCl(pH 7.4),调其pH至7.4(例如,5ml 10mg/ml的RNase储存液加入500μl 1M Tris-HCl, pH7.4);
c)分装成单次用量于-20℃冻存,可稳定保存1年。
【注意】:在中性条件下煮沸RNase A溶液,会有RNase沉淀形成;在更低的pH下将其煮沸,如有沉淀可以观察到,可能由于蛋白杂质存在造成。煮沸之后若发现沉淀,可通过高速离心(13,000 rpm)去除杂质,然后分装冻存。
2. 使用浓度
【注意】:本品应用非常广泛,具体的使用方法和工作浓度请根据实验经验或参考文献来调整。
RNase A常用在质粒DNA制备中去除RNA污染,在此应用中,可直接加入DNase-free RNase A储存液,使其终浓度为10μg/ml。