EZ poly™in vivo siRNA & DNA 活体转染试剂
产品编号 |
产品名称 |
包装规格 |
NBS0207-0.5ml |
EZ poly™in vivo siRNA & DNA 活体转染试剂 |
0.5ml |
NBS0207-1ml |
EZ poly™in vivo siRNA & DNA 活体转染试剂 |
1ml |
NBS0207-5ml |
EZ poly™in vivo siRNA & DNA 活体转染试剂 |
5x1ml |
产品简介:
EZ poly™in vivo siRNA & DNA 活体转染试剂是一款专用于体内的基因转染试剂,可通过尾静脉注射的方式将基因传送至肿瘤部位。与其它体内转染试剂相比,具有操作简便、体内毒性低、稳定性好、体内循环时间长、靶向性好等优点。
应用范围:
EZ poly™in vivo siRNA & DNA 活体转染试剂可适用于众多动物肿瘤模型。可携带荧光标记基因、治疗基因等到达肿瘤部位,并在肿瘤部位蓄积和表达。特别适用于各种常规肿瘤模型如HeLa、B16F10、MCF-7、 MDA-MB-231和A549等,均可得到较高的转染效率,且重复性好。
保存条件:
2-8℃保存一年
运输:
常温运输
体内转染方法:
以体重为20g的荷瘤鼠为例,请参考表1的转染规模调整,步骤如下:
1 |
试剂准备: 按照表1用量首先取20µL EZ poly™in vivo siRNA & DNA 活体转染试剂放置于样品管中 |
2 |
复合物制备: 取20µL的质粒DNA(DNA浓度为1µg/µL) 或siRNA(1.5nmol)与上述转染试剂进行复合 |
3 |
补加葡萄糖注射液: 取140µL的葡萄糖注射液加入到上述复合物溶液中 |
4 |
通过尾静脉注射的方式,注射于鼠体内,24~48小时后检测基因在肿瘤部位的的蓄积或表达 |
*DNA浓度可自行调整,总量等于20μg即可
体内转染条件的优化:
可通过改变肿瘤体积的大小、基因的用量和浓度以及EZ poly™in vivo siRNA & DNA 活体转染试剂浓度对体内转染进行优化。保证肿瘤体积在50mm3~200mm3最佳,EZ poly™in vivo siRNA & DNA 活体转染试剂(µL): DNA (µg)可以在2:1和0.5:1之间调整;EZ poly™in vivo siRNA & DNA 活体转染试剂(µL): siRNA(nmol)可以在10:1和 20:1 之间调整。瘤内基因蓄积建议在注射后24小时检测,瘤内基因表达建议在注射后48小时检测。
表1. 不同体重鼠的体内用量推荐
鼠体重 |
建议瘤体积 |
补加葡萄糖 注射液后终体积 |
DNA推荐用量 |
siRNA推荐用量 |
||
试剂用量 |
DNA |
试剂用量 |
siRNA |
|||
15g |
100mm3 |
150 µL |
15µL |
15µg |
15µL |
1.2 nmol |
20g |
100mm3 |
200 µL |
20µL |
20µg |
20µL |
1.5 nmol |
25g |
100mm3 |
250 µL |
25µL |
25µg |
25µL |
2.0 nmol |
30g |
100mm3 |
300 µL |
30µL |
30µg |
30µL |
2.4 nmol |