产品编号
PI485
Mouse/Rat IGF-I ELISA Kit
96次
3198
的Mouse/Rat IGF-I ELISA Kit (Mouse/Rat Insulin-like Growth Factor I Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即小鼠/大鼠胰岛素样生长因子I酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测小鼠或大鼠血清、血浆、细胞或组织裂解液、或细胞培养上清液中的IGF-I的ELISA试剂盒。本试剂盒适用于小鼠和大鼠IGF-I的检测。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为23.5pg/ml，与小鼠EGF、FGF-8b 、IGF-II，人IGF-I等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
胰岛素样生长因子I?(Insulin-like?Growth?Factor?I,?IGF-I)，又叫做生长调节素C，属于胰岛素亚族成员，是细胞代谢、分化和存活的重要调节因子。IGF-I以前蛋白原的形式合成，通过酶切作用得到成熟的IGF-I蛋白，成熟的IGF-I蛋白在哺乳动物间具有高度保守性。成熟的小鼠IGF-I是一种非糖基化，氨基酸长度为70的分泌型多肽，与大鼠和人IGF-I分别具有99%和94%的序列相似性。IGF-I主要在肝脏和其它组织中合成，在体液中则主要与IGF结合蛋白(IGFBP)共同存在。IGFBP参与调节IGF功能，调节IGF对特定细胞表面受体的生物利用率大小。
IGF-I的功能主要受到两种酪氨酸激酶受体调节：IGF-I?R和Insulin?R/CD220。两种受体都是由二硫键连接形成的异质四聚体复合物，包含两个α亚基和两个β亚基。IGF-I?R和Insulin?R所组成的异元复合物与IGF-I也具有较高的亲和力，该复合物主要与IGF-I作用，可能会降低细胞对胰岛素的应答。IGF信号同时也受到IGFBP的调控，?IGF、IGFBP和IGF受体之间的相互作用会影响机体正常生长发育、代谢调控、血管新生、肿瘤生成和动脉粥样硬化等多种生理病理过程。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich?ELISA)检测样品中IGF-I的浓度，其原理见图1。IGF-I特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的IGF-I会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗IGF-I抗体后，生物素化抗IGF-I抗体与IGF-I结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin?(HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。IGF-I浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中IGF-I浓度。
图1. 双抗体夹心ELISA原理图。
一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：
产品编号
产品名称
包装
PI485-1
IGF-I抗体预包被板
8孔×12条
PI485-2
标准品稀释液(5X)
20ml
PI485-3
IGF-I标准品
2-4瓶
PI485-4
IGF-I生物素化抗体
10ml
PI485-5
辣根过氧化物酶标记Streptavidin
10ml
PI485-6
洗涤液(20X)
30ml
PI485-7
TMB溶液
10ml
PI485-8
终止液
5ml
PI485-9
封板膜(透明)
2张
PI485-10
封板膜(白色)
2张
–
说明书
1份
保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。