Mouse IL-22 ELISA Kit

产品编号

JJP51
Mouse IL-22 ELISA Kit
96次

3198

的Mouse IL-22 ELISA Kit (Mouse Interleukine-22 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即小鼠白细胞介素22酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-22的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。多次重复检测结果表明,最小检出量为22.6pg/ml,与小鼠IL-15、IL-20、IL-22R、IL-29、Leptin、LIF、MIF、TNF-α、TNF-β等均没有交叉反应,板内、板间变异系数均小于10%。
白细胞介素22 (Interleukine-22, IL-22),又称IL-10相关T细胞来源诱导因子(IL-10 related T cell-derived Inducible Factor, IL-TIF),是一种分子量在25-40kDa之间的糖蛋白,属于IFN/IL-10细胞因子家族。小鼠IL-22首先合成179个氨基酸的前体蛋白,其中包含33个氨基酸的信号肽和146个氨基酸的成熟肽段。在部分小鼠种群中还存在有另一种IL-22基因,被命名为IL-22β,其编码所产生的蛋白与常见的成熟小鼠IL-22(α)在序列上存在3个氨基酸差异。在正常情况下,IL-22主要以单体形式存在,但在浓度升高时,IL-22能够通过非二硫键相连形成同源二聚体。成熟的小鼠IL-22与大鼠IL-22和人IL-22分别具有92%和81%的氨基酸同源性,IL-22主要由活化的T细胞和自然杀伤细胞表达并分泌。
IL-22通过与异质二聚体受体复合物结合实现信号传递,该受体复合物由IL-22 R1和IL-10 Rβ组成,二者均属于II型细胞因子受体家族。单体IL-22首先与高亲和受体亚基IL-22 R结合,随后招募IL-10 Rβ形成受体复合物,经由JAK-STATs通路传递信号。IL-10 Rβ几乎在所有细胞都有表达,同时也是IL-10、IL-26、IL-28和IL-29等多种细胞因子的受体复合物组成部分,然而IL-22 R1仅在部分组织器官的上皮细胞和实质细胞表达,IL-22 R1同时也是IL-20和IL-24受体复合物的组成部分。除了与膜表面的IL-22 R1结合,IL-22还能够与游离的IL-22结合蛋白(IL-22 BP)结合,该蛋白又被称为IL-22 Rα2。与IL-22 R1不同,IL-22 BP并不能够与其它IL-10家族成员结合。
IL-22在先天免疫中具有重要作用,同时对表达IL-22?R1的细胞也有一定影响。在皮肤角质细胞中,IL-22能够调节部分基因的表达,这些基因能够促进细胞增殖,对伤口愈合和组织重构具有重要意义。在肝脏和小肠中,IL-22能够诱导急性时相蛋白的产生,保护肝脏免受损伤。在胰腺中,IL-22能够上调胰腺炎相关蛋白1?(Pancreatitis-associated?Protein-1,?PAP1)蛋白表达,该蛋白在抵御组织损伤中具有重要作用。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中小鼠IL-22的浓度,其原理见图1。小鼠IL-22特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标准品或样品时,其中的小鼠IL-22会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗小鼠IL-22抗体后,生物素化抗小鼠IL-22抗体与小鼠IL-22结合,形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin?(HRP-Streptavidin),由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合,因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液,固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。小鼠IL-22浓度与A450值呈正比,通过绘制标准曲线,对照样品吸光度值,即可计算出样品中小鼠IL-22浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒,包括标准品检测,可以进行96次检测。
包装清单:

产品编号

产品名称

包装

JJP51-1

小鼠IL-22抗体预包被板

8孔×12条

JJP51-2

样品分析缓冲液

5ml

JJP51-3

标准品稀释液

10ml

JJP51-4

小鼠IL-22标准品

2-4瓶

JJP51-5

小鼠IL-22生物素化抗体

10ml

JJP51-6

辣根过氧化物酶标记Streptavidin

10ml

JJP51-7

洗涤液(20X)

30ml

JJP51-8

TMB溶液

10ml

JJP51-9

终止液

5ml

JJP51-10

封板膜(透明)

2张

JJP51-11

封板膜(白色)

2张

说明书

1份

保存条件:
标准品4℃保存,1-2周内有效,-20℃保存6个月内有效;试剂盒其它组份4℃保存6个月内有效。除标准品外,试剂盒其它组份严禁冻存。
注意事项:
由于标准品一般是冻干粉,在制备后需要严格校准,所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶,如果发现有结晶,请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性,标准品配制使用后,如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属,否则容易失效。
加样时,请注意每个样品或标准品必须更换枪头,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试,所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分,即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时,请独立使用各个试剂盒中的试剂,请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要,在加液后请轻轻晃动整个96孔板,以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行,要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要,洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔,以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。