产品编号
JJP70
Human MMP-2 ELISA Kit
96次
3198
的Human MMP-2 ELISA Kit (Human Matrix Metalloproteinase2 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人基质金属蛋白酶2酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的MMP-2的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为0.375ng/ml，与MMP-1、MMP-7、MMP-8、MMP-9、MMP-10、MMP-12、MMP-13、TIMP-1、TIMP-4等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
基质金属蛋白酶(Matrix Metalloproteinase, MMP)，是一种Zn2+和Ca2+依赖的肽链内切酶，参与细胞外基质降解和多种生物学过程。MMPs在胚胎发育、形态发生和组织重构等生理过程中具有重要作用。MMPs同样也参与炎症、肿瘤和心血管疾病等病理过程。MMP-2在机体发育过程中表达广泛，在组织受损、炎症发生时表达会出现上升，另外，在肿瘤细胞转移目标部位的基质细胞中表达含量也会升高。MMP-2在体内能够促进肿瘤新生血管的生成，促进肿瘤转移。
人基质金属蛋白酶2(Matrix?Metalloproteinase?2,?MMP-2)以非糖基化的酶原形式分泌，分子量在72kDa。Pro-MMP-2包含80个氨基酸的前导肽和551个氨基酸的成熟区域。在基膜型MMPs、丝氨酸蛋白酶凝血酶或Protein C的催化作用下，前导肽会被除去。活化的MMP-2含有一个催化区域和C端的hemopexin-like区域。无论是酶原还是成熟的MMP-2都与小鼠pro-MMP-2、大鼠pro-MMP-2、猪pro-MMP-2和犬pro-MMP-2具有96-97%的氨基酸同源性。
MMP-2的内源性抑制剂主要有α2巨球蛋白和金属蛋白酶组织抑制剂(Tissue?Inhibitor?of?Metalloproteinase,?TIMPs)。TIMPs1-4通过与MMP-2的N端催化区域形成紧密的非共价键连接来抑制MMP-2活性。另外，TIMP-2或TIMP-3能与pro-MMP-2和MT-MMPs在细胞表面形成三元复合物，抑制MMP-2活性。
与MMP-9一起，MMP-2能够降解细胞基底膜的主要组成成分：明胶和II型胶原蛋白。此外，MMP-2还能降解基质蛋白如：V、VII、X型胶原蛋白，弹力蛋白和纤连蛋白等。同时，MMP-2还能调控肾上腺髓质素、内皮素、降钙素基因相关肽、CCL7/MCP-3、CXCL12/SDF-1、半乳糖凝集素3、IGFBP-3、IL-1β、S100A8和S100A9等血管活性因子和促炎因子功能。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich?ELISA)检测样品中人MMP-2的浓度，其原理见图1。人MMP-2特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的人MMP-2会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人MMP-2抗体后，生物素化抗人MMP-2抗体与人MMP-2结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin?(HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人MMP-2浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中人MMP-2浓度。
图1. 双抗体夹心ELISA原理图。
一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：
产品编号
产品名称
包装
JJP70-1
人MMP-2抗体预包被板
8孔×12条
JJP70-2
标准品稀释液(5X)
20ml
JJP70-3
人MMP-2标准品
2-4瓶
JJP70-4
人MMP-2生物素化抗体
10ml
JJP70-5
辣根过氧化物酶标记Streptavidin
10ml
JJP70-6
洗涤液(20X)
30ml
JJP70-7
TMB溶液
10ml
JJP70-8
终止液
5ml
JJP70-9
封板膜(透明)
2张
JJP70-10
封板膜(白色)
2张
–
说明书
1份
保存条件：
标准品4oC保存，1-2周内有效，-20oC保存6个月内有效；试剂盒其它组份4oC保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组份严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。