Testosterone ELISA Kit

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产品编号

JJP82
Testosterone ELISA Kit
96次

3198

的睾酮 ELISA Kit (Testosterone Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即睾酮酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测所有哺乳动物血清、血浆或细胞培养上清液中的睾酮的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为0.07ng/ml，与雄烯二酮和雄甾酮具有0.9%的交叉反应性，与5-α-二氢睾酮、17-α-雌二醇和雌激素酮等其他类似固醇类小分子交叉反应性均小于0.05%，与氢化可的松交叉反应性小于0.005%。
睾酮(Testosterone)，又称睾丸素、睾丸酮、睾甾酮等，是一种类固醇雄激素，主要由睾丸间质细胞产生，其代谢产物有两种，分别是二氢睾酮(Dihydrotestosterone,?DHT)和雌二醇(Estradiol)。睾酮主要参与精子形成以及第一、第二性征的发育和维持，除此之外，睾酮同样参与免疫抑制、骨密度调节、血管舒张、突触可塑性以及前列腺癌和糖尿病等生理病理过程。和其它类固醇类激素相同，睾酮的产生也受到垂体激素的调控。当受到促性腺激素释放激素(Gonadotropin?Releasing?Hormone,?GnRH)的刺激后，垂体前叶首先分泌黄体生成素(Luteinizing?Hormone,?LH)，LH作用于睾丸间质细胞膜受体，经由cAMP依赖胆固醇合成途径诱导睾酮合成。促卵泡激素(Follicle?Stimulating Hormone,?FSH)通过作用于精原细胞能够间接影响睾丸间质细胞的功能和类固醇生成。睾酮和GnRH之间存在着负反馈调节现象。成年男性每天大约产生5mg的睾酮，大多数睾酮都与性激素结合球蛋白或白蛋白结合，游离的睾酮和白蛋白结合睾酮都具有一定的生物活性。
游离睾酮能够穿过细胞膜，与胞质内的雄激素受体(Androgen Receptor, AR)作用，形成的复合物能够进入细胞核影响DNA转录。AR的活化还能激活蛋白激酶，引起细胞Ca2+内流。在5-α还原酶作用下，睾酮会变成二氢睾酮，与睾酮相比，二氢睾酮与AR的亲和力更高。在芳香化酶的作用下，睾酮还能转变为雌二醇，与相应的雌激素受体结合，作用于特定组织。
本试剂盒采用竞争法ELISA (Competitive?ELISA)检测样品中睾酮的浓度，其原理见图1。高特异性识别睾酮的抗体已预包被于酶标板上，同时加入样品和辣根过氧化物酶标记睾酮，样品中的孕酮与辣根过氧化物酶标记睾酮竞争性结合酶标板中包被的抗体，随后洗去游离的睾酮与游离的辣根过氧化物酶标记睾酮。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的TMB氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。如果样本中睾酮含量越多，则与抗体结合的辣根过氧化物酶标记睾酮就越少，颜色越浅，即颜色与样品中的浓度成反比。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。睾酮浓度与A450值呈反比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中睾酮浓度。

图1. 竞争法ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：

产品编号

产品名称

包装

JJP82-1

Testosterone抗体预包被板

8孔×12条

JJP82-2

Testosterone标准品

2管

JJP82-3

样品稀释液

16ml

JJP82-4

辣根过氧化物酶标记Testosterone

2-4瓶

JJP82-5

洗涤液(20X)

30ml

JJP82-6

TMB溶液

10ml

JJP82-7

终止液

5ml

JJP82-8

封板膜(透明)

2张

JJP82-9

封板膜(白色)

2张

–

说明书

1份

保存条件：
辣根过氧化物酶标记Testosterone4oC保存，1-2周内有效，-20oC保存6个月内有效；试剂盒其它组分4oC保存6个月内有效。除辣根过氧化物酶标记Testosterone外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于辣根过氧化物酶标记Testosterone一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以具体瓶数请以实际收到的试剂盒为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证辣根过氧化物酶标记Testosterone的精确性，辣根过氧化物酶标记Testosterone复溶后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。