产品编号

JP010606
SABC-AP Kit (IHC, ICC, Blotting&ELISA)
1000次

358

JP010603生产的SABC-AP Kit (IHC, ICC, Blotting & ELISA)是基于Streptavidin-Biotin Complex (SABC)信号放大系统而研制的用于免疫组化(Immunohistochemistry,?IHC)、免疫细胞化学(Immunocytochemistry,?ICC)、Western、Northern、Southern、EMSA等印迹(blotting)检测以及ELISA等基于生物素标记的各种高灵敏度检测。
本试剂盒检测灵敏度高。与常规的检测方法相比，由于本试剂盒采用了SABC信号放大系统，检测灵敏度显著提高，通常检测灵敏度比常规方法可以提高约5-10倍。常规方法检测信号过弱时，强烈推荐尝试本试剂盒。
本试剂盒特异性强、背景低。本试剂盒采用了比Avidin特异性更强、背景更低、灵敏度更高的Streptavidin。Streptavidin (链霉亲和素)是从Streptomyces adidinii?中纯化获得的一种分子量为66kD的四聚体蛋白，可以同时结合4个生物素分子，其对生物素的解离常数(Kd, dissociation constant)可达10-15M，比通常抗原抗体的亲和力高约100万倍，可以确保与生物素高度专一地结合。Streptavidin与鸡蛋清来源的Avidin (亲和素)在空间结构以及与生物素的亲和力方面具有高度的相似性，但Streptavidin等电点几乎为中性(pI=6.0-6.5)，其在中性条件下几乎不带电荷。而Avidin的pI=10.5，在中性条件下带正电荷。因此Streptavidin比Avidin的非特异性结合更低，检测灵敏度更高。
检测原理：参考图1，组织、细胞、转移到膜上的或者结合于多孔细胞培养板上的抗原先与一抗结合，后者再与生物素标记的二抗结合；按照适当比例将Streptavidin和生物素标记的碱性磷酸酶(Biotin-labeled Alkaline Phosphatase, Biotin-AP)混合，形成网络状的SABC-AP (Streptavidin-Biotin Complex containing AP)复合物；接着二抗上标记的生物素再与SABC-AP结合，加入AP底物进行显色即可检测到相应的信号。其中Streptavidin和Biotin-AP混合后形成网络状复合物是信号能被放大的关键，相当于一个待检测的生物素分子通过SABC-AP复合物的识别最终可以由很多个AP分子来显示其信号，从而达到了信号放大的效果。

图1. 本试剂盒的检测原理图。

本试剂盒用于IHC、ICC或Blotting时，可以配制成100ml的SABC工作液。按照IHC和ICC每个样品需要使用100μl的SABC工作液计算，本试剂盒可用于1000个样品的检测。按照每张膜需10ml SABC工作液计算，本试剂盒可用于10次的Blotting检测。本试剂盒用于ELISA检测时，可以配制成500ml SABC工作液。按照ELISA检测每个样品需要使用100μl的SABC工作液计算，本试剂盒可用于5000个样品的检测。
包装清单：

产品编号

产品名称

包装

JP010606-1

Reagent A (Streptavidin)

1ml

JP010606-2

Reagent B (Biotin-AP)

1ml

—

说明书

1份

保存条件：
-20℃保存，一年有效。4℃保存，一个月有效。
注意事项：
本试剂盒使用过程中所需的溶液不能含有碱性磷酸酶抑制剂，也不能加入可能含有生物素的溶液，如常规血清、脱脂奶粉、细胞培养液等，否则会降低本试剂盒的检测灵敏度。
任何与液体孵育有关的步骤都需要确保液体能很好地覆盖样品。样品没有被液体充分覆盖而最终出现发干的情况，会导致染色不能正常进行。
实验所需缓冲液宜新鲜配制。长期放置的缓冲液可能会因为微生物污染，而导致检测效果的下降。
本试剂盒中的两种试剂需配套使用，切勿与其它试剂混用。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。