产品编号
PC205
Human CXCL12/SDF-1 ELISA Kit
96次
3198
的Human CXCL12/SDF-1 ELISA Kit (Human Stromal Cell-Derived Factor1 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人趋化因子12/基质细胞衍生因子1酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的CXCL12/SDF-1的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为22.7pg/ml，与人和鼠的IP-10/CRG-2等均没有交叉反应，能识别小鼠SDF-1α。板内、板间变异系数均小于10%。
基质细胞衍生因子1 (Stromal Cell-Derived Factor1, SDF-1)，又称为C-X-C motif chemokine 12 (CXCL12)，属于CXC趋化因子家族，与其它CXC趋化因子和CC (β)趋化因子亚族几乎不具有氨基酸同源性。编码其它趋化因子的基因主要集中在人第4和第17号染色体上，而编码SDF-1的基因则主要位于人第10号染色体。在不同物种之间，SDF-1的基因具有高度保守性，在基因序列上人SDF-1和小鼠SDF-1具有99%的相似性。
SDF-1存在有两种剪接变体，分别是SDF-1α和SDF-1β。SDF-1α多肽长度为89个氨基酸，SDF-1β与SDF-1α序列基本相同，仅在C端多了4个氨基酸残基。SDF-1是一种强碱性的肝素结合蛋白，在SDF-1序列中不存在糖基化位点。SDF-1与CXCR4受体(LESRT/fulin)结合并激活受体，受体首先发生二聚化，随后在JAK2/JAK3激酶的作用下受体发生磷酸化，进而招募并使得STATs发生磷酸化，从而发挥生物学作用。
SDF-1主要由骨髓间充质干细胞表达，存在于多种组织中。SDF-1是淋巴细胞和单核细胞的化学引诱物，并且能够增强B细胞增殖，因此人们认为SDF-1更像是一种免疫监督因子而并非炎症反应调节因子。SDF-1在淋巴细胞和造血细胞归巢中也起了重要作用。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人CXCL12/SDF-1的浓度，其原理见图1。人CXCL12/SDF-1特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的人CXCL12/SDF-1会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人CXCL12/SDF-1抗体后，生物素化抗人CXCL12/SDF-1抗体与人CXCL12/SDF-1结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人CXCL12/SDF-1浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中人CXCL12/SDF-1浓度。
图1. 双抗体夹心ELISA原理图。
一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：
产品编号
产品名称
包装
PC205-1
人CXCL12/SDF-1抗体预包被板
8孔×12条
PC205-2
样品分析缓冲液
5ml
PC205-3
标准品稀释液(5X)
10ml
PC205-4
人CXCL12/SDF-1标准品
2-4瓶
PC205-5
人CXCL12/SDF-1生物素化抗体
10ml
PC205-6
辣根过氧化物酶标记Streptavidin
10ml
PC205-7
洗涤液(20X)
30ml
PC205-8
TMB溶液
10ml
PC205-9
终止液
5ml
PC205-10
封板膜(透明)
2张
PC205-11
封板膜(白色)
2张
–
说明书
1份
保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。