产品编号

JP010603
SABC-HRP Kit (IHC, ICC, Blotting & ELISA)
1000次

370

生产的SABC-HRP Kit (IHC, ICC, Blotting & ELISA)是基于Streptavidin-Biotin Complex (SABC)信号放大系统而研制的用于免疫组化(Immunohistochemistry,?IHC)、免疫细胞化学(Immunocytochemistry,?ICC)、Western、Northern、Southern、EMSA等印迹(blotting)检测以及ELISA等基于生物素标记的各种高灵敏度检测。
本试剂盒检测灵敏度高。与常规的检测方法相比，由于本试剂盒采用了SABC信号放大系统，检测灵敏度显著提高，通常检测灵敏度比常规方法可以提高约5-10倍。常规方法检测信号过弱时，强烈推荐尝试本试剂盒。
本试剂盒特异性强、背景低。本试剂盒采用了比Avidin特异性更强、背景更低、灵敏度更高的Streptavidin。Streptavidin (链霉亲和素)是从Streptomyces adidinii?中纯化获得的一种分子量为66kD的四聚体蛋白，可以同时结合4个生物素分子，其对生物素的解离常数(Kd, dissociation constant)可达10-15M，比通常抗原抗体的亲和力高约100万倍，可以确保与生物素高度专一地结合。Streptavidin与鸡蛋清来源的Avidin (亲和素)在空间结构以及与生物素的亲和力方面具有高度的相似性，但Streptavidin等电点几乎为中性(pI=6.0-6.5)，其在中性条件下几乎不带电荷。而Avidin的pI=10.5，在中性条件下带正电荷。因此Streptavidin比Avidin的非特异性结合更低，检测灵敏度更高。
检测原理：参考图1，组织、细胞、转移到膜上的或者结合于多孔细胞培养板上的抗原先与一抗结合，后者再与生物素标记的二抗结合；按照适当比例将Streptavidin和生物素标记的辣根过氧化物酶(Biotin-labeled Horseradish Peroxidase, Biotin-HRP)混合，形成网络状的SABC-HRP (Streptavidin-Biotin Complex containing HRP)复合物；接着二抗上标记的生物素再与SABC-HRP结合，加入HRP底物进行显色或发光反应即可检测到相应的信号。其中Streptavidin和Biotin-HRP混合后形成网络状复合物是信号能被放大的关键，相当于一个待检测的生物素分子通过SABC-HRP复合物的识别最终可以由很多个HRP分子来显示其信号，从而达到了信号放大的效果。

图1. 本试剂盒的检测原理图。

本试剂盒用于IHC、ICC或Blotting时，可以配制成100ml的SABC工作液。按照IHC和ICC每个样品需要使用100μl的SABC工作液计算，本试剂盒可用于1000个样品的检测。按照每张膜需10ml SABC工作液计算，本试剂盒可用于10次的Blotting检测。本试剂盒用于ELISA检测时，可以配制成500ml SABC工作液。按照ELISA检测每个样品需要使用100μl的SABC工作液计算，本试剂盒可用于5000个样品的检测。
包装清单：

产品编号

产品名称

包装

JP010603-1

Reagent A (Streptavidin)

1ml

JP010603-2

Reagent B (Biotin-HRP)

1ml

—

说明书

1份

保存条件：
-20℃保存，一年有效。4℃保存，一个月有效。
注意事项：
本试剂盒使用过程中所需的溶液，不能含有叠氮钠等过氧化物酶(peroxidase)抑制剂，也不能加入可能含有生物素的溶液，如常规血清、脱脂奶粉、细胞培养液等，否则会降低本试剂盒的检测灵敏度。
任何与液体孵育有关的步骤都需要确保液体能很好地覆盖样品。样品没有被液体充分覆盖而最终出现发干的情况，会导致染色不能正常进行。
实验所需缓冲液宜新鲜配制。长期放置的缓冲液可能会因为微生物污染，而导致检测效果的下降。
为提高检测灵敏度，推荐使用双蒸水或三蒸水。低电导率的去离子水也可能含有微量过氧化物酶的抑制剂从而影响检测灵敏度。
本试剂盒中的两种试剂需配套使用，切勿与其它试剂混用。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。