Wako 011-20171 Azoxymethane 氧化偶氮甲烷–肠癌模型动物诱导剂

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Wako 011-20171 Azoxymethane 氧化偶氮甲烷–肠癌模型动物诱导剂

背景描述：

对于生命医学研究中，为了研究疾病的发病机理、环境刺激下疾病的发展过程，药物治疗追踪，或术后复发可能性示踪。或为了从庞大的化合物或单克隆抗体库中筛选到有潜力的治疗药物；或者对新疗法的疗效和风险评估。都离不开相应疾病动物模型的建立，所有研究都必须有动物模拟病症下大量可行数据的支撑，才能往下进行临床实验。

让我们开启动物造模的篇章，寻找适合你的”点“。

结肠癌造模诱导剂（Wako/Sigma）

偶氮甲烷（Azoxymethane，AOM）

基本描述：

偶氮甲烷（氧化偶氮甲烷），英文Azoxymethane，缩写AOM，可有效诱导大小鼠结肠癌，广泛用作一种基质引起实验动物发生结肠肿瘤，从而研究癌症预防物和癌症形成机制。另外，越来越多结肠癌病例的发生，使得癌症预防物的研究也越来越流行。按照每周一次皮下注射AOM（15mg/kg体重）进入大鼠体内，连续3周给药。数周后能观察到癌前期病变。

作用机制：偶氮甲烷（AOM）能诱导DNA产生O6-甲基鸟嘌加合物，导致G→A转化。

主要应用：偶氮甲烷（AOM）常联合DSS（Mw：36000-50000 Da）注射动物，建立结肠癌模型，用来研究癌症发展机制和化学预防。

基本特征：

1）  CAS NO. 25843-45-2

2）  线性分子式：CH3N=N(→O)CH3【C2H6N2O】

3）  分子量：74.08

4）  纯度：≥98%

5）  结构式：

诱发性肿瘤动物模型制作方法简便，重复性好，可以在较短时间内大量复制，而且基本模拟了癌变的过程，因此在实验中应用较广。诱发性大肠癌模型有较长的历史，目前建立大肠癌诱发模型用的最多的试剂是二甲基肼(DMH)和氧化偶氮甲烷(AOM)，甲基硝基亚硝基胍(MNNG)也是得到广泛应用的一种致癌物。
氧化偶氮甲烷（Azoxymethane）是一种对大鼠和小鼠具有强力诱发大肠癌作用的物质，用于氧化偶氮甲烷诱导致畸预防性治疗的有效性评估研究。氧化偶氮甲烷也用于确认某些啮齿动物模型所使用的特殊食物，例如难消化糖，红肉和绿茶的化学预防性能。这些啮齿动物模型可以帮助鉴别可预防人类大肠癌可能的手段。
性能
氧化偶氮甲烷（Azoxymethane）
细胞生物学用 100mg
C2H6N2O=74.08
[CAS No.] 25843-45-2
含量（cGC）：98.2%
1,2-二甲基肼二盐酸盐
C2H10Cl2N2 = 133.02
[CAS No.] 306-37-6
CAS： 306-37-6
1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍
C2H5N5O3 = 147.09
[CAS No.] 70-25-7

相关产品

厂商货号 品牌 品名(中文) CAS 纯度及级别
包装
011-20171 WAKO 氧化偶氮甲烷 AZOXYMETHANE 25843-45-2 细胞生物学用
100mg
0520606401 MP 二甲基肼二盐酸盐 N,N’-DIMETHYLHYDRAZINE di HCl (SYM) 306-37-6
1g
D161802-10g Sigma 1,2-二甲基肼二盐酸盐 N,N’-Dimethylhydrazine dihydrochloride 306-37-6 98%
10g
138-14901 WAKO 1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍 1-METHYL-3-NITRO-1-NITROSUGUANIDINE 70-25-7
5g

参考文献

  • Escribano, M., et al., Aspirin inhibits endothelial nitric oxide synthase (eNOS) and Flk-1 (vascular endothelial growth factor receptor-2) prior to rat colon tumour development. Clin. Sci. (Lond)., 106: 83-91 (2004).
  • Marotta, F., et al., Chemopreventive effect of a probiotic preparation on the development of preneoplastic and neoplastic colonic lesions: an experimental study. Hepatogastroenterology, 50: 1914-8 (2003).
  • Orii, S., et al., Chemoprevention for colorectal tumorigenesis associated with chronic colitis in mice via apoptosis. J. Exp. Clin. Cancer Res., 22: 41-6 (2003).
  • Pool-Zobel, B., et al., Experimental evidences on the potential of prebiotic fructans to reduce the risk of colon cancer. Br. J. Nutr., Suppl 2: S273-81 (2002).
  • Nakanishi, S., et al., Effects of high amylose maize starch and Clostridium butyricum on metabolism in colonic microbiota and formation of azoxymethane-induced aberrant crypt foci in the rat colon. Microbiol Immunol., 47: 951-8 (2003).
  • Pierre, F., et al., Meat and cancer: haemoglobin and haemin in a low-calcium diet promote colorectal carcinogenesis at the aberrant crypt stage in rats. Carcinogenesis, 24: 1683-90 (2003).
  • Metz, N., et al., Suppression of azoxymethane-induced preneoplastic lesions and inhibition of cyclooxygenase-2 activity in the colonic mucosa of rats drinking a crude green tea extract. Nutr Cancer., 38: 60-4 (2000).
  • Corpet, D.E. and Pierre, F., Point: From animal models to prevention of colon cancer. Systematic review of chemoprevention in min mice and choice of the model system. Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev., 12: 391-400 (2003).
  • Guda, K., et al., Defective processing of the transforming growth factor-beta1 in azoxymethane-induced mouse colon tumors. Mol. Carcinog., 37: 51-9 (2003).
  • Guda, K., et al., Aberrant transforming growth factor-beta signaling in azoxymethane-induced mouse colon tumors. Mol Carcinog., 31: 204-13 (2001).
  • Relan, N.K., Identification and evaluation of the role of endogenous tyrosine kinases in azoxymethane induction of proliferative processes in the colonic mucosa of rats. Biochim Biophys Acta., 1244(2-3): 368-76 (1995 Jun 9)
  • Kishimoto, Y., et al., Effects of cyclooxygenase-2 inhibitor NS-398 on APC and c-myc expression in rat colon carcinogenesis induced by azoxymethane. J. Gastroenterol., 37: 186-93 (2002).

结肠癌（Colon cancer）模型建立案例：

1、  文献来源：Wirtz S, et al. Chemically induced mouse models of intestinal inflammation. Nat Protoc. 2007; 2(3):541-6.

1.1    DSS溶液制备（2% DSS溶液）：溶解10gDSS于500ml无菌的饮用水中，使用前溶液保存在4℃，好现配现用。

1.2    AOM溶液制备：用无菌水溶解AOM配制10 mg/ml的储存液，分装后放到-20℃保存，避免反复冻融。使用之前，融化分装母液并用无菌生理盐水1:10倍稀释。

1.3    小鼠结肠炎相关的依赖性结直肠癌造模方法【详见懋康官网：www.maokangbio.com】

2、文献来源：Neufert C, et al. An inducible mouse model of colon carcinogenesis for the analysis of sporadic and inflammation-driven tumor progression. Nat Protoc. 2007; 2(8):1998-2004.

2.1 DSS溶液制备（2.5% DSS溶液）：称取2.5g DSS溶于100ml无菌水，本溶液置于4℃可稳定保存1周。好现配现用。

2.2 AOM溶液制备：用无菌水溶解AOM配制10 mg/ml的储存液，分装后放到-20℃保存，避免反复冻融。AOM在水或生理盐水中的稳定性高于PBS缓冲液，且在玻璃管内稳定性好于塑料管。使用之前，融化分装母液并用无菌生理盐水1:10倍稀释。

2.3 小鼠结肠癌造模方法

1）第1天称重，等数分组并标记小鼠；

2）按照10mg/kg体重的浓度计算所需的AOM量，取适量的AOM储存液（10mg/ml）用无菌生理盐水1:10倍稀释。

3）腹腔注射AOM工作液（剂量10mg/kg体重，则10g体重小鼠注射100ul工作液）到实验组小鼠，同时注射等体积的无菌生理盐水到对照组小鼠。

4）自此步之后，按照两种方法继续实验。若建立自发性肿瘤进展模型，见方案A；若建立慢性炎症驱动的肿瘤进展模型，见方案B。

方案A，自发性肿瘤进展模型

A1，第8天重复步骤1）-3）；

A2，第15天重复步骤1）-3）；

A3，第22天重复步骤1）-3）；

A4，第29天重复步骤1）-3）；

A5，第36天重复步骤1）-3）；【到这步每只小鼠都腹腔注射给药6次】

A6，第一次注射后的3个月评估癌前病变，此时不需处死动物。

A7，第一次注射后的6个月评估肿瘤发展。

方案B，慢性炎症驱动的肿瘤进展（Chronic inflammation-driven tumor progression）

B1，制备2.5%（wt/v）DSS溶液。此浓度的DSS能让FVB/N小鼠和其他品系产生良好的造模效果。

B2，按3天的用量加DSS溶液灌满小鼠笼内的饮水槽，以5ml DSS溶液/小鼠/天用量，对照小鼠加等体积不含DSS的饮用水；

B3，第4天清空饮水槽内残留DSS溶液，并且重新灌满另2天所需量的新鲜DSS溶液。

B4，第6天清空饮水槽内残留DSS溶液，并且重新灌满另2天所需量的新鲜DSS溶液。

B5，第8天清空饮水槽内残留DSS溶液，并且重新灌满灭菌水。

B6，第22-29日重复步骤B1）-B5）。

B7，第40日评估癌前病变，此时不需处死动物。

B8，第53-60日重复步骤B1）-B5）。

B9，第80日评估肿瘤发展。

2.4 AOM诱导肿瘤图示（图1）

图1.内窥镜肿瘤调研。通过迷你腔镜监测AOM诱导的肿瘤形成情况。a）还能用于纵向研究；b）对于肿瘤负荷分析，每只小鼠的肿瘤大小按照预设的时间点记录并做总和。

Azoxymethane（AOM）订购信息：欢迎来电咨询

品牌 货号 名称 CAS NO. 规格
Sigma A5486-25MG Azoxymethane 偶氮甲烷 25843-45-2 25mg
Sigma A5486-100MG Azoxymethane 偶氮甲烷 25843-45-2 100mg
Wako 011-20171 Azoxymethane 偶氮甲烷 25843-45-2 100mg

DSS（Mw：36000-50000 Da）订购信息：

品牌 货号 名称 规格
MPbio

 

 0216011010 DSS（Mw：36000-50000 Da）硫酸葡聚糖钠盐 10g
MPbio 0216011050 DSS（Mw：36000-50000 Da）硫酸葡聚糖钠盐 50g
MPbio 0216011080 DSS（Mw：36000-50000 Da）硫酸葡聚糖钠盐 100g
MPbio 0216011090 DSS（Mw：36000-50000 Da）硫酸葡聚糖钠盐 500g

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

造模疾病名称   产品编号       品名       规格       包装

精神分裂症模型  136-16303 Methylazoxymethanol Acetate  20mg

大肠炎  194-14921 Sodium Dextran Sulfate 36,000 ～ 50,000         –      10g

皮肤肿瘤   147-03421   4-Nitroquinoline 1-Oxide       1g

膀胱炎  160-05191 Protamine Sulfate, from Salmon 1g

Wako   011-20171 Azoxymethane 25843-45-2 AOM大肠癌疾病造模试剂

帕金森病  136-16381 1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine Hydrochloride（MPTP）10mg

大肠肿瘤 011-20171    Azoxymethane   100mg

乳腺肿瘤  042-02801  7,12-Dimethylbenz(α)anthracene  1g

肺肿瘤   147-03421  4-Nitroquinoline 1-Oxide  1g

糖尿病  191-15151 Streptozotocin  100mg

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正文中列出的所有试剂只能用于测试或研究，不能作为”药品”，”食品”，”家庭用品”等使用。
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