产品编号
JJP55
Human IL-1α ELISA Kit
96次
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的Human IL-1α ELISA Kit (Human Interleukin-1α Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人白细胞介素1α酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-1α的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为8.4pg/ml，与人IFN-γ、IGF-I、IGF-II、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
白细胞介素-1?(Interleukine-1, IL-1)，包括两种蛋白IL-1α和IL-1β，二者由不同基因编码产生但都能够作用于相同的细胞表面受体。除了皮肤角质细胞、部分表皮细胞和中枢神经系统中的某些特定细胞外，健康人体内的其它细胞均不产生IL-1。绝大多数细胞在受到某些炎性试剂和细菌内毒素刺激或在发生感染时才能合成和分泌IL-1。?
IL-1α和IL-1β在结构上具有一定的相似性，氨基酸水平上也具有25%的同源性。二者都是先合成分子量为31kDa的前体蛋白，随后在酶切作用下得到17.5kDa的成熟蛋白分子。IL-1α和IL-1β都不含有疏水性的信号肽，二者都以非经典途径被分泌出来。大多数IL-1α都以前体蛋白的形式保留在细胞内，其中一部分未被加工的IL-1α会被运送至细胞表面，这些膜绑定的未经加工的IL-1α也具有一定的生物活性，能够以旁分泌的形式作用于邻近细胞表面的IL-1受体。在大多数情况下，IL-1α和IL-1β以同样的亲和力结合于相同的细胞表面受体，发挥相同的生物学作用。IL-1有两种跨膜受体蛋白，一种是分子量约为80kDa的IL-1 RI (IL-1 receptor, type I)，其主要表达在T细胞、成纤维细胞、角质细胞、内皮细胞、滑膜细胞、软骨细胞及肝细胞中；另一种是分子量约为68kDa的IL-1 RII (IL-1 receptor, type II)，其主要表达在B细胞、嗜中性粒细胞及骨髓细胞中。
IL-1具有广泛的生物学作用，在肝脏中，IL-1能够启动急性时相反应，从而增加肝脏蛋白合成，减少白蛋白产生。IL-1还能诱导滑膜细胞产生胶原蛋白酶，促进骨骼中钙吸收。在中枢神经系统中，IL-1参与发烧和慢波睡眠过程，能够诱导促肾上腺皮质激素释放。IL-1还参与调节内分泌系统，小剂量时，IL-1能够促进胰岛素产生，剂量过高则对胰岛B细胞具有细胞毒作用。在免疫系统中，IL-1也具有一定作用，它能作用于巨噬细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞和LAK细胞。在其他细胞因子的协同作用下，IL-1能够通过作用于NK细胞和LAK细胞发挥抗肿瘤的活性。
IL-1主要激活NF-κB信号通路调控炎症因子的表达。IL-1和其受体结合后，激活下游一系列蛋白如JNK、p38、ERK1/2，及NF-κB和c-Jun。IL-1的信号通路见图1。
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图1. IL-1的信号通路示意图。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人IL-1α的浓度，其原理见图2。人IL-1α特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的人IL-1α会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人IL-1α抗体后，生物素化抗人IL-1α抗体与人IL-1α结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人IL-1α浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中人IL-1α浓度。
图2. 双抗体夹心ELISA原理图。
一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：
产品编号
产品名称
包装
JJP55-1
人IL-1α抗体预包被板
8孔×12条
JJP55-2
样品分析缓冲液
5ml
JJP55-3
标准品稀释液
10ml
JJP55-4
人IL-1α标准品
2-4瓶
JJP55-5
人IL-1α生物素化抗体
10ml
JJP55-6
辣根过氧化物酶标记Streptavidin
10ml
JJP55-7
洗涤液(20X)
30ml
JJP55-8
TMB溶液
10ml
JJP55-9
终止液
5ml
JJP55-10
封板膜(透明)
2张
JJP55-11
封板膜(白色)
2张
–
说明书
1份
保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。