产品编号
JJP72
Human Pentraxin 3/TSG-14 ELISA Kit
96次
3398
的Human Pentraxin 3/TSG-14 ELISA Kit (Human Pentraxin 3 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人正五聚蛋白3/肿瘤坏死因子刺激基因14酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的Pentraxin 3的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。多次重复检测结果表明,最小检出量为84pg/ml,与人Pentraxin?2、CRP,小鼠Pentraxin?2、Pentraxin?3等均没有交叉反应,板内、板间变异系数均小于10%。
正五聚蛋白3?(Pentraxin?3, PTX3)又称肿瘤坏死因子刺激基因14蛋白?(TNF-Stimulated?Gene?14?Protein,?TSG-14)或穿透素3、五聚素3,是一种长正五聚蛋白,属于正五聚蛋白亚族。分泌型人PTX3是一种分子量为45kDa的糖蛋白,具有162个氨基酸的N端延伸域和202个氨基酸的C端正五聚蛋白区域。其中正五聚蛋白区域结构与经典的短正五聚蛋白(CRP或SAP)具有一定的相似性。巨噬细胞、中性粒细胞、骨髓来源的树突状细胞、卵巢粒层细胞、内皮细胞、成纤维细胞、脂肪细胞、肾小球系膜细胞、滑膜细胞、平滑肌细胞等多种细胞均能分泌PTX3。PTX3是一种急性时相蛋白,当出现炎症或感染时,人和小鼠体内PTX3水平会显著升高,动脉粥样硬化损伤和心梗患者体内PTX3浓度也会有所增加。
PTX3与高亲和性受体的结合在多种生理条件中都具有重要作用。通过与细胞外基质透明质酸结合蛋白TSG-6的相互作用,PTX3参与卵丘中富含透明质酸细胞外基质的形成,这一过程对于女性生育过程十分重要。在初始免疫应答过程中,PTX3具有双重的调节作用。固定的PTX3通过C端的正五聚蛋白区域与补体因子C1q结合,诱导经典补体途径激活;相反,游离的PTX3则会抑制该途径活化。PTX3还能够选择性地和一些细菌、真菌和病毒组分相互作用,发挥调理素的作用,预防感染发生。PTX3能够促进C1q与凋亡细胞结合,促进补体介导的细胞清除过程,同时也能直接与凋亡细胞结合,抑制树突状细胞对其的摄取,阻止自身免疫应答的发生。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich?ELISA)检测样品中人Pentraxin?3/TSG-14的浓度,其原理见图1。人Pentraxin?3/TSG-14特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标准品或样品时,其中的人Pentraxin?3/TSG-14会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人Pentraxin?3/TSG-14抗体后,生物素化抗人Pentraxin?3/TSG-14抗体与人Pentraxin?3/TSG-14结合,形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin?(HRP-Streptavidin),由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合,因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液,固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人Pentraxin?3/TSG-14浓度与A450值呈正比,通过绘制标准曲线,对照样品吸光度值,即可计算出样品中人Pentraxin 3/TSG-14浓度。
图1. 双抗体夹心ELISA原理图。
一个包装的本试剂盒,包括标准品检测,可以进行96次检测。
包装清单:
产品编号
产品名称
包装
JJP72-1
人Pentraxin 3/TSG-14抗体预包被板
8孔×12条
JJP72-2
样品分析缓冲液
5ml
JJP72-3
标准品稀释液
10ml
JJP72-4
人Pentraxin 3/TSG-14标准品
2-4瓶
JJP72-5
人Pentraxin 3/TSG-14生物素化抗体
10ml
JJP72-6
辣根过氧化物酶标记Streptavidin
10ml
JJP72-7
洗涤液(20X)
30ml
JJP72-8
TMB溶液
10ml
JJP72-9
终止液
5ml
JJP72-10
封板膜(透明)
2张
JJP72-11
封板膜(白色)
2张
–
说明书
1份
保存条件:
标准品4℃保存,1-2周内有效,-20℃保存6个月内有效;试剂盒其它组份4℃保存6个月内有效。除标准品外,试剂盒其它组份严禁冻存。
注意事项:
由于标准品一般是冻干粉,在制备后需要严格校准,所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶,如果发现有结晶,请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性,标准品配制使用后,如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属,否则容易失效。
加样时,请注意每个样品或标准品必须更换枪头,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试,所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分,即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时,请独立使用各个试剂盒中的试剂,请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要,在加液后请轻轻晃动整个96孔板,以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行,要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要,洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔,以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。