产品编号
JP0060
Human BMP-9 ELISA Kit
96次
3198
的Human BMP-9 ELISA Kit (Human Bone Morphogenetic Protein 9 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人骨形成蛋白9酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的BMP-9的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为16pg/ml，与人BMP-3、BMP-4、BMP-5、BMP-6、BMP-7、BMP-10、TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
骨形成蛋白9 (Bone Morphogenetic Protein 9, BMP-9)，又称生长转化因子(Growth and Differentiation Factor, GDF-2)，属于TGF-β家族。人BMP-9的cDNA编码产生429个氨基酸的前体蛋白，经剪切除去22个氨基酸的信号肽后得到成熟的人BMP-9。BMP-9能够诱导并维持胚胎神经元分化、调节葡萄糖和脂肪酸代谢，调节体内铁离子平衡，还能参与许多重要的生物学过程。目前有部分研究表明BMP-9对肿瘤发生也有影响，但在不同类型的肿瘤中所起的具体作用还有待进一步确认。
BMPs家族主要有两种类型受体：丝氨酸/苏氨酸I型受体和骨形成蛋白受体(BMPRs)。BMP-9与两种受体均能结合，且具有相同的亲和力。当BMP-9与II型受体结合后，会反向诱导I型受体ALK1和ALK2的磷酸化，进而激活下游的R-Smad-1、-5、-8蛋白分子。随后在Smads的作用下将信号传递至细胞核内，对靶基因的转录进行调控。BMP-9还能激活JNK，调节间叶细胞祖细胞的成骨分化，通过诱导p38和ERK的活化对Smad通路进行调节，p38能够加强BMP-9对Smad的磷酸化作用，反之ERK则具有一定的抑制效果。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich?ELISA)检测样品中人BMP-9的浓度，其原理见图1。人BMP-9特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的人BMP-9会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人BMP-9抗体后，生物素化抗人BMP-9抗体与人BMP-9结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin?(HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人BMP-9浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中人BMP-9浓度。
图1. 双抗体夹心ELISA原理图。
一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：
产品编号
产品名称
包装
JP0060-1
人BMP-9抗体预包被板
8孔×12条
JP0060-2
样品分析缓冲液
5ml
JP0060-3
标准品稀释液
10ml
JP0060-4
人BMP-9标准品
2-4瓶
JP0060-5
人BMP-9生物素化抗体
10ml
JP0060-6
辣根过氧化物酶标记Streptavidin
10ml
JP0060-7
洗涤液(20X)
30ml
JP0060-8
TMB溶液
10ml
JP0060-9
终止液
5ml
JP0060-10
封板膜(透明)
2张
JP0060-11
封板膜(白色)
2张
–
说明书
1份
保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。