产品编号
PC201
Mouse CXCL12/SDF-1α ELISA Kit
96次
3198
的Mouse?CXCL12/SDF-1α?ELISA?Kit?(Mouse?Stromal?Cell-Derived?Factor?1α?Enzyme-Linked?
ImmunoSorbent?Assay?Kit)，即小鼠趋化因子12/基质细胞衍生因子1α酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的CXCL12/SDF-1α的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为31.6pg/ml，与人和鼠的IP-10/CRG-2等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
基质细胞衍生因子1?(Stromal?Cell-Derived?Factor1,?SDF-1)，又称为C-X-C?motif?chemokine?12?(CXCL12)，属于non-ELR?CXC趋化因子，在发育和造血过程中发挥重要作用。在小鼠体内存在两种SDF-1的选择性剪切变体：SDF-1α和SDF-1β。成熟的SDF-1α是一种氨基酸长度为70的多肽，SDF-1β具有相同的N端70个氨基酸，唯一不同的是在C端还存在4个氨基酸的延伸段，目前C端延伸段的具体作用尚不明确。在脑内，SDF-1β与白细胞活动相关，而SDF-1α则参与调节神经元可塑性。SDF-1是一种强碱性的肝素结合蛋白，不存在糖基化现象。表达SDF-1的细胞主要有神经元细胞、成纤维细胞、甲状腺细胞、CD34+干细胞、血管平滑肌细胞和内皮细胞。小鼠SDF-1β与人SDF-1β具有97%的氨基酸同源性，而小鼠SDF-1α与人SDF-1α则有99%的氨基酸同源性。成熟的小鼠SDF-1α与大鼠SDF-1α具有96%的氨基酸同源性。
SDF-1与CXCR4受体(LESTR/fusin)结合并激活受体。受体的激活过程涉及受体二聚化，与Gai(抑制性G蛋白亚基)相互作用、JAK2/JAK3介导的磷酸化以及STAT?(Signal?Transducers?and?Activators?of?Transcription)因子磷酸化等过程。SDF-1与受体结合后能够发挥多种生物学功能。对于造血祖细胞而言，SDF-1能够提升其在骨髓及体内循环过程中的存活能力，同时对自然杀伤细胞、T细胞、浆细胞和树突状细胞也具有化学趋化能力。在神经系统中，SDF-1能够吸引胚胎小脑外颗粒细胞，并且作为神经元生长锥生长的化学排斥物。另外SDF-1对B淋巴细胞也具有一定调控，其能够影响不同时期B细胞在骨髓中的数量。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich?ELISA)检测样品中小鼠CXCL12/SDF-1α的浓度，其原理见图1。小鼠CXCL12/SDF-1α特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的小鼠CXCL12/SDF-1α会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗小鼠CXCL12/SDF-1α抗体后，生物素化抗小鼠CXCL12/SDF-1α抗体与小鼠CXCL12/SDF-1α结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin?(HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。小鼠CXCL12/SDF-1α浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中小鼠CXCL12/SDF-1α浓度。
图1. 双抗体夹心ELISA原理图。
一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：
产品编号
产品名称
包装
PC201-1
小鼠CXCL12/SDF-1α抗体预包被板
8孔×12条
PC201-2
样品分析缓冲液
5ml
PC201-3
标准品稀释液(5X)
10ml
PC201-4
小鼠CXCL12/SDF-1α标准品
2-4瓶
PC201-5
小鼠CXCL12/SDF-1α生物素化抗体
10ml
PC201-6
辣根过氧化物酶标记Streptavidin
10ml
PC201-7
洗涤液(20X)
30ml
PC201-8
TMB溶液
10ml
PC201-9
终止液
5ml
PC201-10
封板膜(透明)
2张
PC201-11
封板膜(白色)
2张
–
说明书
1份
保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。