JNC株式会社-Cellufine亲和色谱填料/内毒素去除款填料/配体耦合款填料/病毒和肝素结合蛋白净化款填料

亲和色谱填料 种亲和色谱填料,其中 JNC 开发的独特亲和配体固定在球形纤维素上。

病毒和肝素结合蛋白净化款填料
Cellufine Sulfate
硫酸纤维素是一款亲和层析填料,可纯化病毒和肝素结合蛋白。 诸如流感病毒,狂犬病毒,日本脑炎病毒,西尼罗河病毒,AAV和HIV等病毒具有吸附活性,并被很多国家和地区的疫苗生产商所使用。 在中性pH条件下结合,在高盐浓度下洗脱,因此纯化后仍保持活性。

Cellufine MAX DexS-HbP / Cellufine MAX DexS-VirS
Cellufine MAX DexS是一款固定了硫酸葡聚糖聚合物的新型层析填料。 由于不使用动物原料,因此可以用作固定肝素载体的替代材料。 可用于血液蛋白分级分离和病毒纯化。 DexS-HbP经过优化,可纯化肝素结合蛋白。 DexS-VirS最適合针对病毒颗粒的纯化。

内毒素去除款填料
Cellufine ETclean S / Cellufine ETclean L
Cellufine ET Clean是一款固定了聚赖氨酸(ε-赖氨酸)的亲和色谱填料。 内毒素可以选择性地从蛋白质样品溶液或无菌水中去除。Cellufine ET Clean有两款産品。 ET Clean S的孔径较小,而ET Clean L帯有蛋白质可以進入的較大孔径。

用于核酸相关蛋白
Cellufine Phosphate
Cellufine Phosphate是一种对DNA结合蛋白和RNA结合蛋白等核酸结合蛋白具有亲和活性的载体。磷酸酯基团固定在球形纤维素颗粒上。 可用于纯化用于生产 mRNA 疫苗的 RNA 聚合酶,例如 T7 RNA 聚合酶。

配体耦合款填料
Cellufine Formyl
纤维素基质上的甲酰基允许制备特定的亲和配体。为了确保最大的配体可及性,甲酰基通过亲水性间隔基连接到纤维素基质上。

JNC株式会社 亲和色谱填料系列说明 Cellufine Sulfate/Cellufine Formyl

亲和色谱填料
种亲和色谱填料,其中 JNC 开发的独特亲和配体固定在球形纤维素上。

病毒和肝素结合蛋白净化款填料
Cellufine Sulfate
硫酸纤维素是一款亲和层析填料,可纯化病毒和肝素结合蛋白。 诸如流感病毒,狂犬病毒,日本脑炎病毒,西尼罗河病毒,AAV和HIV等病毒具有吸附活性,并被很多国家和地区的疫苗生产商所使用。 在中性pH条件下结合,在高盐浓度下洗脱,因此纯化后仍保持活性。

Cellufine MAX DexS-HbP / Cellufine MAX DexS-VirS
Cellufine MAX DexS是一款固定了硫酸葡聚糖聚合物的新型层析填料。 由于不使用动物原料,因此可以用作固定肝素载体的替代材料。 可用于血液蛋白分级分离和病毒纯化。 DexS-HbP经过优化,可纯化肝素结合蛋白。 DexS-VirS最適合针对病毒颗粒的纯化。

内毒素去除款填料
Cellufine ETclean S / Cellufine ETclean L
Cellufine ET Clean是一款固定了聚赖氨酸(ε-赖氨酸)的亲和色谱填料。 内毒素可以选择性地从蛋白质样品溶液或无菌水中去除。Cellufine ET Clean有两款産品。 ET Clean S的孔径较小,而ET Clean L帯有蛋白质可以進入的較大孔径。

用于核酸相关蛋白
Cellufine Phosphate
Cellufine Phosphate是一种对DNA结合蛋白和RNA结合蛋白等核酸结合蛋白具有亲和活性的载体。磷酸酯基团固定在球形纤维素颗粒上。 可用于纯化用于生产 mRNA 疫苗的 RNA 聚合酶,例如 T7 RNA 聚合酶。

配体耦合款填料
Cellufine Formyl
纤维素基质上的甲酰基允许制备特定的亲和配体。为了确保最大的配体可及性,甲酰基通过亲水性间隔基连接到纤维素基质上。

JNC株式会社 CellufineTMET clean 亲和色谱填料用于去除内毒素Cellufine™ ET clean S Cellufine™ ET clean L

Cellufine™ ET clean是一款把聚(ε-赖氨酸)為配基固定在繊維素基球上的層析填料。 這種填料可選択性的結合様品中混入的内毒素並将其去除。 配基(聚ε-赖氨酸)来源於放線菌(Streptomyces albulus)生産的25-35个赖氨酸聚合物。

Cellufine™ ET clean内毒素去除填料是由熊本大学和Chisso株式会社共同开发的。聚赖氨酸被固定在氯甲基环氧乙烷活化的纤维素基球上, 其在用0.2 M NaOH和2 M NaCl的清洗液洗浄後依然保持非常安定的親和活性。

Cellufine™ ET clean可在生理pH下从细胞产物溶液中去除内毒素,离子强度μ= 0.02-1.0,0°-25C°

通过Cellufine™ ET clean樹脂从蛋白质溶液中特异性去除内毒素

样品溶液 Cellufine™ ET clean S Cellufine™ ET clean L
样品名称(pI) 处理前内毒素浓度(pg/ml) (0.02M PB, pH7.0, μ=0.05) (0.02M PB + 0.36M NaCl, pH7.0, μ=0.40)
处理后内毒素浓度(pg/ml) 蛋白质回收(%) 处理后内毒素浓度(pg/ml) 蛋白质回收(%)
卵清蛋白(4.6) 28,000 81 99 <10 95
牛血清白蛋白(4.9) 32,000 45 99 <10 97
肌红蛋白(6.8) 4,500 18 99 <10 98
丙种球蛋白(7.4) 5,600 20 99 <10 97
细胞色素C(10.6) 1,500 15 99 <10 98

将 2 ml 蛋白质溶液(1 mg/ml,LPS:各种蛋白质试剂中的污染物)添加到 0.3 mL ET clean 中。1 个内毒素单位 (EU) = 250pg LPS 可以换算。

溶菌酶 / ETclean L

柱层析

柱尺寸
10 x 0.9 cm (I.D.) (9.6 ml)
流速
0.5 ml / min (47 cm / h)
缓冲液
1 mM Tris-HCl, pH 7.3
梯度洗脱液
0 → 1.0 mol / l NaCl aq.
測定

– 280nm蛋白测定
– ET LAL法内毒素测定

注射样品 (1ml)
14 mg / ml

JNC株式会社 亲和色谱填料 CellufineTMSulfate 用于病毒、病毒/微生物抗原和肝素结合蛋白的浓缩、纯化以及去除内毒素

疫苗和临床诊断方面的进步已经产生了对大量高纯度和浓缩的病毒以及病毒或微生物抗原的日益增长的需求。 Cellufine Sulfate亲和填料是一种简单、快速、有效的浓缩、纯化和去除這些重要产品的热原。

Cellufine Sulfate不仅可消除传统的超速离心沉降法和密度梯度方法的繁琐、耗时和潜在的不安全性,还能显著提高浓度和纯度。 Cellufine Sulfate可以减少或消除与固定化硫酸葡聚糖、硫酸软骨素或肝素有关的损耗、配体泄漏和重现性问题。

通过离子强度的简单逐步或梯度增加来影响结合产物的洗脱。

特征
Features
对多种活病毒、灭活的或结构分裂的病毒、微生物抗原和肝素结合蛋白具有亲和力。
封闭柱操作确保安全性和产品无菌
内毒素不结合,可快速和无污染的去除热原
刚性,高强度微球
可高压灭菌

优势
Benefit
比超速离心更有效去除培养基和宿主细胞中的污染物
避免过多的产品处理和安全问题,尤其是病毒制剂
同时浓缩和纯化可提高产量,减少加工步骤,时间和成本
温和的结合和洗脱条件提供高容量和产品产量
抗压缩,即使在大型色谱柱中也能为高速处理提供快速流动,使其易于放大
耐碱性化学除热原,可用福尔马林化学灭菌

特点
基质 纤维素
粒径 ca. 40 – 130 µm
颗粒形状 球形
排阻极限 3kD
活化基团 硫酸酯
总硫 >700 µg/g dry
蛋白
溶菌酶 : >3 mg/ml
乙型肝炎表面抗原 : 7 mg/ml
环境耐受性 耐0.1M NaOH,含有0.1%的37%福尔马林
工作压力 <0.3 MPa
高温高压灭菌 在中性pH下悬浮; 121°C 30分钟
存储 14%的乙醇悬浮液