Wako结肠癌造模诱导结肠癌造模诱导剂-偶氮甲烷（Azoxymethane，AOM）

结肠癌造模诱导剂（Wako/Sigma）

偶氮甲烷（Azoxymethane，AOM）

基本描述：

偶氮甲烷（氧化偶氮甲烷），英文Azoxymethane，缩写AOM，可有效诱导大小鼠结肠癌，广泛用作一种基质引起实验动物发生结肠肿瘤，从而研究癌症预防物和癌症形成机制。另外，越来越多结肠癌病例的发生，使得癌症预防物的研究也越来越流行。按照每周一次皮下注射AOM（15mg/kg体重）进入大鼠体内，连续3周给药。数周后能观察到癌前期病变。

作用机制：偶氮甲烷（AOM）能诱导DNA产生O6-甲基鸟嘌加合物，导致G→A转化。

主要应用：偶氮甲烷（AOM）常联合DSS（Mw：36000-50000 Da）注射动物，建立结肠癌模型，用来研究癌症发展机制和化学预防。

基本特征：

1）  CAS NO. 25843-45-2

2）  线性分子式：CH3N=N(→O)CH3【C2H6N2O】

3）  分子量：74.08

4）  纯度：≥98%

5）  结构式：

结肠癌（Colon cancer）模型建立案例：

1、  文献来源：Wirtz S, et al. Chemically induced mouse models of intestinal inflammation. Nat Protoc. 2007; 2(3):541-6.

1.1    DSS溶液制备（2% DSS溶液）：溶解10gDSS于500ml无菌的饮用水中，使用前溶液保存在4℃，好现配现用。

1.2    AOM溶液制备：用无菌水溶解AOM配制10 mg/ml的储存液，分装后放到-20℃保存，避免反复冻融。使用之前，融化分装母液并用无菌生理盐水1:10倍稀释。

1.3    小鼠结肠炎相关的依赖性结直肠癌造模方法

1）  第1天称重和标记小鼠；

2）  按10 mg/kg体重的剂量腹腔注射AOM溶液；

3）  加DSS溶液灌满小鼠笼内的饮水槽，以5ml DSS溶液/小鼠/天加量，对照小鼠加等体积不含DSS的饮用水；

4）  第3天清空笼子内剩余的DSS饮用水，过两天重新装满DSS溶液；

5）  第5天清空笼子内剩余的DSS饮用水，重新装满DSS溶液；

6）  第8天清空笼子内剩余的DSS溶液，换上不含DSS的无菌水持续14天；

7）  第22-26天重复第3）-5）步；

8）  第29天清空笼子内剩余的DSS溶液，换上不含DSS的无菌水持续14天；

9）  第43-47天重复第3）-5）步；

10）第50天清空笼子内剩余的DSS溶液，换上不含DSS的无菌水；

2、文献来源：Neufert C, et al. An inducible mouse model of colon carcinogenesis for the analysis of sporadic and inflammation-driven tumor progression. Nat Protoc. 2007; 2(8):1998-2004.

2.1 DSS溶液制备（2.5% DSS溶液）：称取2.5g DSS溶于100ml无菌水，本溶液置于4℃可稳定保存1周。好现配现用。

2.2 AOM溶液制备：用无菌水溶解AOM配制10 mg/ml的储存液，分装后放到-20℃保存，避免反复冻融。AOM在水或生理盐水中的稳定性高于PBS缓冲液，且在玻璃管内稳定性好于塑料管。使用之前，融化分装母液并用无菌生理盐水1:10倍稀释。

2.3 小鼠结肠癌造模方法

1）第1天称重，等数分组并标记小鼠；

2）按照10mg/kg体重的浓度计算所需的AOM量，取适量的AOM储存液（10mg/ml）用无菌生理盐水1:10倍稀释。

3）腹腔注射AOM工作液（剂量10mg/kg体重，则10g体重小鼠注射100ul工作液）到实验组小鼠，同时注射等体积的无菌生理盐水到对照组小鼠。

4）自此步之后，按照两种方法继续实验。若建立自发性肿瘤进展模型，见方案A；若建立慢性炎症驱动的肿瘤进展模型，见方案B。

方案A，自发性肿瘤进展模型

A1，第8天重复步骤1）-3）；

A2，第15天重复步骤1）-3）；

A3，第22天重复步骤1）-3）；

A4，第29天重复步骤1）-3）；

A5，第36天重复步骤1）-3）；【到这步每只小鼠都腹腔注射给药6次】

A6，第一次注射后的3个月评估癌前病变，此时不需处死动物。

A7，第一次注射后的6个月评估肿瘤发展。

方案B，慢性炎症驱动的肿瘤进展（Chronic inflammation-driven tumor progression）

B1，制备2.5%（wt/v）DSS溶液。此浓度的DSS能让FVB/N小鼠和其他品系产生良好的造模效果。

B2，按3天的用量加DSS溶液灌满小鼠笼内的饮水槽，以5ml DSS溶液/小鼠/天用量，对照小鼠加等体积不含DSS的饮用水；

B3，第4天清空饮水槽内残留DSS溶液，并且重新灌满另2天所需量的新鲜DSS溶液。

B4，第6天清空饮水槽内残留DSS溶液，并且重新灌满另2天所需量的新鲜DSS溶液。

B5，第8天清空饮水槽内残留DSS溶液，并且重新灌满灭菌水。

B6，第22-29日重复步骤B1）-B5）。

B7，第40日评估癌前病变，此时不需处死动物。

B8，第53-60日重复步骤B1）-B5）。

B9，第80日评估肿瘤发展。

2.4 AOM诱导肿瘤图示（图1）

图1.内窥镜肿瘤调研。通过迷你腔镜监测AOM诱导的肿瘤形成情况。a）还能用于纵向研究；b）对于肿瘤负荷分析，每只小鼠的肿瘤大小按照预设的时间点记录并做总和。

Azoxymethane（AOM）订购信息：欢迎来电咨询，021-50837765  18301939375

DSS（Mw：36000-50000 Da）

动物疾病模型主要用于实验生理学、实验病理学和实验治疗学(包括新药筛选)研究。人类疾病的发展十分复杂，以人本身作为实验对象来深入探讨疾病发生机制，推动医药学的发展来之缓慢，临床积累的经验不仅在时间和空间上都存在局限性，而且许多实验在道义上和方法上也受到限制。而借助于动物模型的间接研究，可以有意识地改变那些在自然条件下不可能或不易排除的因素，以便更准确地观察模型的实验结果并与人类疾病进行比较研究，有助于更方便，更有效地认识人类疾病的发生发展规律，研究防治措施。

Wako 和光纯药 高气密封储瓶 High-sealed Storage Bottle

英文名称：High-sealed Storage Bottle O-ring
中文名称：高度密封保存瓶O环
品牌：Wako
品牌中文简称：和光纯药
储存条件：室温

This product is for research use only. Do not administer it to human.

This is a High-sealed Storage Bottle (Brown) replacement o-ring for between the mouth and the cap.
Material : Perfluoro

该产品仅供研究使用。 不要将它管理给人类。

这是一个高密封存储瓶（棕色）替换O形圈，用于嘴和帽之间。
材质：全氟

Wako 203-18781 Triundecanoin Standard 11碳酸三甘油酯标准品

英文名称：Triundecanoin Standard
中文名称：11碳酸三甘油酯标准品
品牌：Wako
品牌中文简称：和光纯药
CAS No.：13552-80-2
储存条件：-20℃
纯度：98＋%(HPLC)

Wako 045-30741 核酸清除剂 DNA Cleaner

英文名称：DNA Cleaner
品牌：Wako
品牌中文简称：和光纯药
储存条件：2-10℃

核酸清除剂, 本品使用不需要分离管, 即可去除低分子DNA片断(≤50bp)

DNA Cleaner 本品不需要使用有机溶剂或离心管，35分钟内即可高效清除50bp 以下DNA 片断。另外，本品还可用于dsRNA 的纯化。最适合用于PCR 后的引物、引物对、dNTP、DNA 聚合酶的清除和限制性内切酶处理后的酶消除。

同时，利用乙醇沉淀法将ABI 公司BigDye Cycle Sequencing kit 扩增序列的DNA 样品纯化时，使用本品能得到清晰的序列结果。

特点

· 不需要使用分离管柱，也可纯化PCR扩增产物

· 高效浓缩500 ～ 2,500ng 的DNA

· 最快35分钟即可完成PCR后的核酸纯化

DNA Cleaner　使用用途

去除底物	去除底物二聚体	去除dNTP	DNA 纯化	测序用 标记反应后纯化	酶去除	操作时间	处理容量
◎	◎	○	○ 100～10,000 bp	○	○	最短35分钟	与最初样品相同容量

与柱色谱法相比

	DNA Cleaner	Q公司柱色谱法
Step 1	添加与DNA溶液等量的DNA Cleaner。	向PCR样品中添加5倍容量的结合液。此时，若混合物的颜色不为黄色，请添加3M醋酸钠。
Step 2	在室温下静置10分钟。	向离心管中添加Step 1.的样品。
Step 3	在室温下离心分离10分钟。	在室温下离心分离1分钟。
Step 4	除去上清液。添加70%乙醇。	除去滤液。添加洗涤液。
Step 5	在室温下离心分离1分钟。	在室温下离心分离1分钟。
Step 6	上清除去。干燥5分钟。	除去滤液。
Step 7	TE Buffer、灭菌水溶解	在室温下离心分离10分钟。
Step 8	FINISH	添加50μL析出液。静置1分钟。
Step 9	–	直接向分离管膜中添加析出液。
Step 10	–	在室温下离心分离10分钟。
Step 11	–	FINISH
所需时间	约35分钟	约10分钟
离心分离次数	2次	4次

DNA Cleaner 使用例

1)低分子DNA（50bp 以下）的除去

条带1.：DNA Step Ladder （25-500bp）
条带2.：DNA Step Ladder （25-500bp）（DNA Cleaner 处理）
条带3.：DNA Step Ladder （25-500bp）（T 公司Kit）
条带4.：DNA Step Ladder （25-500bp）（Q 公司Kit）

图1　利用DNA Cleaner 去除50bp 以下的DNA 片断
使用本品可去除50bp及25bp的DNA 片断，可回收75bp 以上的DNA片断。与Q 公司Kit一样，可高效去除50bp 以下的DNA片断。

2)高分子DNA（200bp 以上）的回收

条带1.：DNA Ladder
条带2.：DNA Ladder （DNA Cleaner 处理）
条带3.：DNA Ladder （T 公司Kit）
条带4.：DNA Ladder （Q 公司Kit）

图2　利用DNA Cleaner 纯化高分子量DNA 片断
使用本品可高效回收200bp 以上的DNA片断。

3)少量DNA 的回收率比较

［使用DNA］3kb 质粒
［DNA 量检测法］检测OD260/OD280吸光度，估算已回收DNA的量。

（图3）利用DNA Cleaner 进行质粒DNA 添加回收实验
使用本品进行100 ～ 2,500ng 的DNA 回收实验，其结果比Q 公司Kit 更高效去除DNA，对500ng 以上的DNA 回収率达90% 以上。.

产品编号	品　名	包装
045-30741	DNA Cleaner	5mL
044-30711	25bp DNA Step Ladder (25-500bp)	500μL（100色带）

——除以上产品外，接受特殊规格定制规格，欢迎咨询！

Wako 291-59701 膳食纤维试剂盒,Dietary Fiber Assay Kit

英文名称：Dietary Fiber Assay Kit

中文名称：膳食纤维试剂盒

品牌：wako；

货号：291-59701
包装：100 tests

类别：糖苷

我司所销售的化学试剂、原料等所有产品（包括但不限于抗生素类、蛋白质类、试剂盒类产品等）仅限用于科学研究用途，不得作用于人体。

本产品仅供研究用。不要把它给人类使用。

普洛斯基方法的一个简单的修正版本。与传统的Prosky方法相比，该方法具有较高的测量精度。此外，缩短了酶处理时间。

试剂盒组成：

1. 1. 耐热α-淀粉酶溶液1小瓶x 20 mL

1. 1. 蛋白酶溶液1小瓶x20 mL

1. 1. 酰胺葡萄糖苷酶溶液1小瓶x20 mL
2. 硅藻土1小瓶x100克

测量轮廓

1. 1. 在MES/TRIS缓冲液中溶解的样品

1. 1. 耐热α-淀粉酶消化

1. 1. 蛋白酶和淀粉糖苷酶的消化

1. 在pH6.3和60℃下持续30分钟
2. 1. 乙醇沉淀

1. 休假1小时
2. 1. 过滤

1. 1. 乙醇和丙酮洗涤

1. 1. 一夜干

1. 1. Kjeldahl蛋白测定及灰分测定

1. 总膳食纤维测定

原理

1. 1. 膳食纤维总量的测定

1. 样品中的可消化组分，如淀粉和蛋白质，会被水解。

1. 用α-淀粉酶、蛋白酶和淀粉糖苷酶，通过添加四倍体积的95%乙醇沉淀未分解的残余大分子，然后用含硅藻土的玻璃过滤坩埚捕获。
2. 总膳食纤维含量是通过从玻璃过滤坩埚上捕获的残渣的干重中扣除蛋白质和灰分的含量来确定的。
3. 1. 可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维含量的分数分析

1. 样品中的可消化组分，如淀粉和蛋白质，用α-淀粉酶、蛋白酶和淀粉糖苷酶水解，然后用含硅藻土的玻璃过滤坩埚过滤。
2. 不溶性膳食纤维含量是通过在玻璃过滤坩埚上从不溶性残渣的干重中扣除蛋白质和灰分的含量来确定的。
3. 同时，在滤液中加入四倍体积的95%乙醇，沉淀未分解的可溶性大分子，用含硅藻土的玻璃过滤坩埚捕集。可溶性膳食纤维含量是通过从玻璃过滤坩埚上沉淀残渣的干重中扣除蛋白质和灰分的含量来确定的。
4. 总膳食纤维含量定义为不溶性膳食纤维含量和可溶性膳食纤维含量之和。
5. 1. 低分子可溶性膳食纤维的测定

1. 1. 用高效液相色谱法测定了特定的低分子可溶性膳食纤维，即使加入四倍体积的95%乙醇也不会沉淀。
   2. 用α-淀粉酶、蛋白酶和淀粉葡萄糖苷酶水解样品中的淀粉和蛋白质等可消化组分，再加入四倍体积的95%乙醇沉淀未分解的残余大分子。然后用含硅藻土的玻璃过滤坩埚过滤。
   3. 利用离子交换树脂去除滤液中的蛋白质、有机酸和无机盐，并将其应用于高效液相色谱。低分子可溶性膳食纤维含量是由样品的峰面积与葡萄糖的峰面积(内标)在色谱图上的比值来确定的。
   4. 同时，通过在玻璃过滤坩埚上从沉淀残渣的干重中扣除蛋白质和灰分的含量，确定了不溶性和可溶性大分子膳食纤维的含量。

总膳食纤维含量定义为低分子可溶性膳食纤维含量和不溶性和可溶性大分子膳食纤维含量之和。

This product is for research use only. Do not administer it to human.

A simple and modified version of Prosky’s method. Compared to conventional Prosky’s method, it assures high measurement accuracy. Furthermore, enzyme treatment time is shortened.

Kit Contents

1. 1. Thermostable alpha-Amylase Solution 1 vial x 20 mL

1. 1. Protease Solution 1 vial x 20 mL

1. 1. Amyloglucosidase Solution 1 vial x 20 mL
2. Diatomaceous Earth 1 vial x 100 g

Measurement Outline

1. 1. Sample dissolved in MES/Tris buffer

1. 1. Digestion with thermostable alpha-amylase

1. 1. Digestion with protease and amyloglucosidase
2. for 30 minutes at pH 6.3 and 60 degrees C
3. 1. Ethanol Precipitation
4. Leave 1 hour
5. 1. Filtration

1. 1. Wash with ethanol and acetone

1. 1. Dry overnight

1. 1. Kjeldahl Protein Determination and Ash Determination

1. Total Dietary Fiber Determination

Principle

1. 1. 1. Determination of total Dietary Fiber Contents
   2. Digestible components in samples, such as starch and protein, are hydrolyzed
   3. with alpha-amylase, protease, and amyloglucosidase, precipitate undecomposed residual macromolecule by adding quadruple volume 95% Ethanol, and then trapped with a glass filter crucible containing diatomaceous earth.
   4. Total Dietary Fiber Contents are determined by deducting weight of protein and ash content from the dry weight of trapped residue on a glass filter crucible.
   5. 1. Fractional Analysis of Soluble Dietary Fiber Contents and Insoluble Dietary Fiber Contents
   6. Digestible components in samples, such as starch and protein, are hydrolyzed with alpha-amylase, protease, and amyloglucosidase, then filtrated with a glass filter crucible containing diatomaceous earth.
   7. Insoluble Dietary Fiber Contents are determined by deducting weight of protein and ash content from the dry weight of trapped insoluble residue on a glass filter crucible.
   8. Meanwhile, add a quadruple volume 95% Ethanol into the filtrate, precipitate undecomposed residual soluble macromolecule, and trap with a glass filter crucible containing diatomaceous earth. Soluble Dietary Fiber Contents are determined by deducting weight of protein and ash content from the dry weight of the trapped precipitated residue on a glass filter crucible.
   9. Total Dietary Fiber Contents are defined as the sum of Insoluble Dietary Fiber Contents and Soluble Dietary Fiber Contents.
   10. 1. Determination of Low-molecular Soluble Dietary Fiber
   11. Specific Low-molecular Soluble Dietary Fibers, which are not precipitated even by addition of a quadruple volume of 95% Ethanol, are determined by high-performance liquid chromatography.
   12. After digestible components such as starch and protein in samples are hydrolyzed with alpha-amylase, protease, and amyloglucosidase, the undecomposed residual macromolecule are precipitated by adding a quadruple volume of 95% Ethanol. Then filter it with a glass filter crucible containing diatomaceous earth.
   13. Proteins, organic acids and inorganic salts in the filtrate are removed with ion-exchange resin, and then the solution is applied to high-performance liquid chromatography. Low-molecular Soluble Dietary Fiber Content is determined by the ratio of the peak area of the sample with that of glucose (internal standard) on the chromatogram.
   14. Meanwhile, Insoluble and Soluble Macromolecule Dietary Fiber Content is determined by deducting weight of protein and ash content from the dry weight of the trapped precipitated residue on a glass filter crucible.

Total Dietary Fiber Contents is defined as sum of Low-molecular Soluble Dietary Fiber Contents and Insoluble and Soluble Macromolecular Dietary Fiber Contents.

Wako和光纯药特种化学-新型高纯度清洗剂NCW系列

上海金畔生物代理Wako和光纯药产品，欢迎新老客户访问Wako和光纯药官网或者咨询我们获取更多产品信息。

日本和光Wako特种化学-新型高纯度清洗剂NCW系列
NCW-1001、NCW-1002、NCW-1003和NCW-1004均是高纯度的清洗溶液，主要成分为非离子型表面活性剂，可以10 至100 倍稀释后使用，用于清洗硅晶片和液晶玻璃基板。

日本和光Wako特种化学-新型高纯度清洗剂NCW系列

NCW-1001和NCW-1002均是高纯度的清洗溶液，主要成分为非离子型表面活性剂，可以10 至100 倍稀释后使用，用于清洗硅晶片和液晶玻璃基板。

应用行业：半导体、LCD、LED、太阳能电池等。

日本和光Wako特种化学-新型高纯度清洗剂NCW系列

◆特点

1．金属杂质和颗粒杂质少，是高纯度的表面活性剂；

2．对脂肪和油具有更好的清洗效果；

3．良好的消泡性；

4．NCW-1001临界胶束浓度低，即使在低温条件下，用少量产品即可达到良好的清洗效果；

5．NCW-1002粘度低，操作方便，室温下与碱混合或者加热后使用；

6．对化学试剂具有良好的抗药性，产品稳定，对各种材料不会造成任何影响；

7．NCW-1001和NCW-1002不是有毒、有害或者危险物质；

◆应用法规，操作和保存的注意事项

法规：有毒有害物质控制法：没有限制；

消防法：没有限制

注意事项：如果眼睛或皮肤接触了试剂，请立即用大量清水清洗；若疼痛仍没减轻，请咨询医生；如吸入，请将吸入者移至室外，呼吸新鲜空气。

◆产品列表

产品编号	产品名称	产品规格
846-11311	NCW-1001清洗剂	1L
842-11416	NCW-1002清洗剂	1L

NCW-1001

Description

NCW-1001 is a high performance non-ionic surfactant which is used to manage the impurity of metal and particles. It has a high cleaning effect on fat and oil components which can even be enhanced by mixing it with alkaline.

NCW-1001 is environmentally friendly as natural alcohol is used as raw material, but nevertheless has a high and stable chemical resistance.

Chemical Name

Not relevant (mixture)

CAS No.: n/a
Molecular weight: n/a

Physical characteristics

Features

Low temperature type

Main Applications

• Additive for improvement of wettability in solution
• Cleaning solution for the electronic industry

Regulations

• EINECS No.: n/a
• REACH: n/a

Storage

Store under 25°C only in ADR approved packaging.

Safety information

Hazardous to the Environment

For specific information on the safe handling of the product, please refer to the material safety data sheet (MSDS) which is available on request.

NCW-1002

Description

NCW-1002 is a high performance non-ionic surfactant which is used to manage the impurity of metal and particles. It has a high cleaning effect on fat and oil components which can even be enhanced by mixing it with alkaline.

NCW-1002 is environmentally friendly as natural alcohol is used as raw material, but nevertheless has a high and stable chemical resistance.

Chemical Name

Not relevant (mixture)

CAS No.: n/a
Molecular weight: n/a

Physical characteristics

Features

Low viscosity type

Main Applications

• Additive for improvement of wettability in solution
• Cleaning solution for the electronic industry

Regulations

• EINECS No.: n/a
• REACH: n/a

Storage

Keep only in original container, store under 25°C in a well ventilated area.

For specific information on the safe handling of the product, please refer to the material safety data sheet (MSDS) which is available on request.

Wako和光纯药冻凝剂系列产品：

上海金畔生物代理Wako和光纯药产品，欢迎新老客户访问Wako和光纯药官网或者咨询我们获取更多产品信息。

Wako 037-09692 λ-角叉胶 λ-Carrageenan

λ-角叉胶 λ-Carrageenan

CasNo:9064-57-7

分子式:C24H36O39S6

分子量:1140.9200

品牌：Wako
品牌中文简称：和光纯药
CAS No.：9064-57-7
储存条件：2-10℃（RT）

Wako和光纯药 Wakopak Wakosil-II5C18-100系列柱子

Wako和光纯药  Charcoal 活性炭

上海金畔生物科技有限公司（www.jinpanbio.com）提供生命科学研究领域系列产品，包括生化试剂、色谱标准品和实验仪器耗材。主营Lumiprobe Cy系列活性荧光染料；修饰性PEG（Laysan bio、NANOCS、Avanti等进口品牌PEG以及定制合成修饰性聚乙二醇、单分散小分量PEG）；Sigma、Amresco、TCI、MP bio生化试剂；WAKO日本和光纯药、日本关东化学Kanto试剂、日本三菱、日本柴田科学SIBATA；Megazyme食品分析检测试剂盒、日本共立理化学；Research diets、Harlan饲料、Bio-Serv、日本CLEA Japan品牌的动物饲料；Oxoid、Nissui日水、日本荣研、BD difco、Himedia品牌微生物培养基；免疫试剂包括:Bethyl抗体；Biolegend流式抗体、Abcam、CST、Santa Cruz抗体；Roche、TOYOBO、NEB品牌的酶；中检所、TRC、药典USP、EP、Reagecon标准品；耗材和仪器包括Whatman、日本Advantec滤膜、Millipore品牌的各种滤膜、滤器和柱子填料等、Hampton蛋白结晶试剂耗材、老鼠软管灌胃针、动物毛发记号笔、Labnet、Wheaton瓶子、Bio-Rad伯乐、康宁Corning、Axygen、Falcon 、Eppendorf、Nunc、Nalgene、Nest品牌的培养皿、培养板、离心机、离心管、移液枪及枪头等实验室常用仪器耗材。

上海金畔生物科技有限公司

服务热线:18301939375   QQ：3258089810    3259632176

Email:  info@jinpanbio.com

官网：http://www.jinpanbio.com

Wako 077-03155 Gelatin 明胶

英文名称：Gelatin
中文名称：明胶
品牌：Wako
品牌中文简称：和光纯药
CAS No.：9000-70-8
储存条件：室温
纯度：-

Wako 077-03155 Gelatin 明胶