标签归档：显色

TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸)

发表于由

产品编号

JJP205-100ml
TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸)
100ml

141

JJP205-500ml
TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸)
500ml

516

??????TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸)，即Stop Solution for TMB Substrate (450nm, Sulfuric acid free )，是一种主要用于ELISA等实验中TMB显色反应终止的比较安全的不含硫酸的即用型酸性溶液。加入本产品后，TMB显色反应会被终止，并且原来的蓝色溶液会并转变成在450nm处有较强光吸收的黄色溶液，最终在450nm测定吸光度并且可以使检测灵敏度比检测蓝色吸光度提高1倍左右。
??????本产品相对比较安全。2M硫酸是最常用的TMB显示终止液，但由于其腐蚀性极强而有较大的安全隐患。本产品不含硫酸，使用了相对更加安全的适当中强酸，可以有效避免硫酸的强腐蚀性可能对人体造成的伤害。需要注意的是本产品作为中强酸，虽然腐蚀性比硫酸弱很多，但还是有一定的腐蚀性，需要注意适当防护。
??????TMB，即3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine，是辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)的最常用底物之一。在辣根过氧化物酶或其它适当过氧化物酶的催化下，TMB会产生可溶性蓝色产物，该蓝色产物通常可以在370nm或620-650nm测定吸光度。
??????由于辣根过氧化物酶与TMB的反应在一定时间内能持续进行，若不及时终止反应，可能会由于反应达到平台期等而影响实验结果。TMB显色终止液根据吸光度的检测分为两种，一种是在450nm进行检测，一种是在620-650nm进行检测。本TMB显色终止液加入后溶液颜色从蓝色变为黄色，并在450nm测定吸光度，本产品终止反应后在1小时内吸光度保持稳定。加入TMB显色液及加入TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸)后的吸光度检测和实拍显色效果图参考图1。

??????图1. 本产品的检测效果图。左图为不同浓度的HRP标记的二抗(A0208 辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG (H+L))，加入TMB显色液(JJP209)室温反应5分钟后A370的吸光值，及加入TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸) A450的吸光值的线性图。右图为两者的实拍显色效果图。图中数据仅供参考，实际的检测效果可能会略有不同。

??????TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸)与TMB显色终止液(650nm, 无腐蚀性)的主要区别如下：

产品编号

JJP205

JJP207

产品名称

TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸)

TMB显色终止液(650nm, 无腐蚀性)

最终溶液颜色

黄色

蓝色

检测波长

450nm

620-650nm

吸光度信号

提高约一倍

无明显变化

安全性

有一定腐蚀性

无腐蚀性

??????96孔板每孔使用100μl，本试剂盒小包装JJP205-100ml可以进行1000个终止反应，稍大的包装JJP205-500ml可以进行5000个终止反应。
包装清单：

产品编号

产品名称

包装

JJP205-100ml

TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸)

100ml

JJP205-500ml

TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸)

500ml

—

说明书

1份

保存条件：
??????4℃保存，一年有效。
注意事项：
??????本产品适用于ELISA等实验时溶液中TMB显色反应的终止，不适用于膜或组化组化反应TMB显色的终止。
??????加入TMB显色液或者TMB显色终止液后，如果有沉淀生成，说明样品中目的蛋白的含量过高，建议适当稀释后再进行测试。
??????本产品有腐蚀性，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或腐蚀其它物品。
??????本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
??????为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

JJP200-500ml 增强型TMB显色液(ELISA HRP显色用)

发表于由

产品编号

JJP200-100ml
增强型TMB显色液(ELISA HRP显色用)
100ml

268

JJP200-500ml
增强型TMB显色液(ELISA HRP显色用)
500ml

988

增强型TMB显色液(ELISA HRP显色用)，英文名Enhanced TMB Chromogen Solution for ELISA或Enhanced TMB Substrate Solution for ELISA or Enhanced TMB Solution for ELISA)是一种采用了最新单一溶液TMB显色技术，通过辣根过氧化物酶(HRP)催化TMB显色，用于ELISA等的增强型显色液。本显色液也可以用于检测血液或血红蛋白等样品中的过氧化物酶含量。
通常的TMB显色试剂由多个组份组成，必须在使用前进行配制，并且容易产生沉淀，使用相对不太方便，并且也容易导致检测结果不太稳定。本TMB显色液采用了最新的TMB显色技术，把所有的相关试剂全部配制在一个溶液中，仅由单一溶液组成，简化了操作步骤，并且使检测结果更加稳定可靠。
TMB，即3, 3′,5 ,5′-Tetramethylbenzidine，是辣根过氧化物酶的常用底物。在辣根过氧化物酶或其他适当过氧化物酶的催化下，TMB会产生可溶性蓝色产物。蓝色产物通常可以在370nm或620-650nm测定吸光度。不同浓度辣根过氧化物酶(HRP)标记二抗使用本产品的检测效果参见图1A。

图1. JJP200 增强型TMB显色液(ELISA HRP显色用)的检测效果图。A. 本产品和JJP209 TMB显色液(ELISA HRP显色用)的检测效果对比图。辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG (A0208)用PBS稀释至图中所示浓度，各取20微升，加入200微升本产品，在5分钟时检测A370。从检测结果可知，HRP标记二抗浓度至少在0-0.02%范围内呈良好的线性关系，并且JP2010的检测灵敏度比JJP209约高50%。B. 本产品直接检测A370和添加终止液后检测A450的检测效果对比图。图中可见添加终止液后检测A450的检测灵敏度更高一些。实测数据会因试剂、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。
辣根过氧化物酶催化TMB显蓝色后可以使用的TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸) (JJP205)、TMB显色终止液(650nm, 无腐蚀性) (JJP207) 或自行配制的2M H2SO4终止反应。加入TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸)或硫酸后，溶液呈黄色，此时可以在450nm测定吸光度，吸光度会有显著升高(图1B)；加入TMB显色终止液(650nm, 无腐蚀性)后，溶液保持蓝色不变，此时可在620-650nm测定吸光度。
本试剂盒最常用于ELISA检测，也可以用于检测血液或血红蛋白等样品中的过氧化物酶含量。
用于ELISA检测时，每个样品通常使用0.1毫升显色液，每100ml本产品共可以检测约1000个样品。
包装清单：

产品编号
产品名称
包装

JJP200-100ml
增强型TMB显色液(ELISA HRP显色用)
100ml

JJP200-500ml
增强型TMB显色液(ELISA HRP显色用)
500ml

—
说明书
1份

保存条件：
4℃避光保存，一年有效。
注意事项：
TMB对人体有刺激性，操作时请小心，并注意适当防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品为微蓝色透明溶液，如果发现TMB显色液出现混浊或颜色变成较深的蓝色，应该停止使用。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒

发表于由

产品编号

JJP202
DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒
共20ml

83

JJP203
DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒
共100ml

241

DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒(DAB Horseradish Peroxidase Color Development Kit)是一种借助辣根过氧化物酶(HRP)，用于免疫组化显色、原位杂交显色或Western、Southern、Northern、EMSA等膜显色的试剂盒。
DAB，即3,3N-Diaminobenzidine Tertrahydrochloride，是辣根过氧化物酶的常用底物。在辣根过氧化物酶的催化下，DAB会产生棕色沉淀。该棕色沉淀不溶于水和乙醇。因此在DAB显色后，还可以使用溶于乙醇的染料进行后续染色。
本试剂盒可以用于细胞或组织在免疫组化或原位杂交时结合的辣根过氧化物酶显色，也可以用于Western等结合有辣根过氧化物酶的膜的显色检测。同时也可以用于细胞或组织内源性的辣根过氧化物酶显色。
用于免疫组化或原位杂交时，如果每个片子使用0.2毫升显色液，那么本试剂盒共可以检测100个片子。
包装清单：

产品编号

产品名称

包装

JJP202-1

DAB显色液A

10ml

JJP202-2

DAB显色液B

10ml

－

说明书

1份

保存条件：
-20℃保存，一年有效。DAB显色液A和DAB显色液B均需避光保存。
注意事项：
DAB对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

单组份TMB显色液（Elisa HRP 显色用）（NBS0201）

发表于由

TMB one Solution(HRP-based ELISA)

单组份TMB显色液（Elisa HRP 显色用）

 

产品编号

产品名称

规格

NBS0201 -100ml

TMB one Solution(HRP-based ELISA)


单组份TMB显色液（Elisa HRP 显色用）

100ml

NBS0201 -500ml

500ml

 

产品描述

酶联免疫分析技术（ELISA）广泛用于抗原、半抗原或抗体的定量或定性分析，辣根过氧化物酶（HRP）及其偶联物是ELISA技术常用的一种酶，能催化底物如3,3'5,5'-四甲基联苯胺（TMB）发生显色反应，从而进行定量或定性分析。由于TMB比其他显色底物具更高的灵敏度且无致癌性被广泛使用，TMB主要用于ELISA，免疫斑点杂交或免疫组化等实验，也有报道将其用于氯的检测分析。

通常TMB显色试剂由多个组分构成，必须在使用前进行配制，并且容易产生沉淀，使用相对不便且容易导致检测结果不稳定。本品采用全新的TMB显色技术，将所有相关试剂全部配在一个溶液，即仅由单一溶液组成，不仅简化了操作步骤，而且使检测结果更加稳定可靠。

本品专门为ELISA实验而设计。检测原理在于HRP或其他适当过氧化物酶能催化生成可溶的蓝色产物，此时通常可在370nm测定吸光度。当显色反应被酸性溶液（如0.5-2M H2SO4，0.5M HCL，1M H3PO4）终止后，产物由蓝色转为黄色，此时可在450nm测定吸光度。由于本品显色敏感度高，线性浓度范围较宽，极其适合用于定量ELISA分析。

本品用于ELISA检测，每个样品通常使用0.1ml显色液，则100ml本品约检测1000个样品，500ml本品约检测5000个样品。

 

保存与运输方法

保存：2-8℃避光保存，2年有效。

运输：冰袋运输。

 

注意事项

1) 本品含TMB和H2O2，对人体有刺激性，请注意防护。

2) 如发现本品出现浑浊或颜色变为蓝色，请停止使用。

3) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

使用方法（ELISA）

1) 使用之前，取出适量单组份TMB显色液，使其回到室温再开始使用；

2) 参考ELISA检测试剂盒的实验步骤，当与HRP标记抗体孵育一段时间后，用适当洗涤液洗涤3-5次，每次3-5min。

3) 洗涤完毕后，去除洗涤液，加入100μl单组份TMB显色液。

4) 室温避光孵育5-30min或更长时间（可长达24h），直至显色到预期深浅。【注意】：建议根据实验需求选择最佳试剂用量、显色时间和反应温度。

5) 直接在370nm测定吸光度。或者加入100μl 0.5-2M H2SO4终止反应，随后在450nm测定吸光度。

 

常用问题

1. 背景显色太深

1）如果背景（没有样品的对照）显色太深，一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭，如商业化封闭液或者和一抗相同来源的血清（10%）进行封闭。另一方面，使用经过适当吸附的二抗，以减小二抗的非特异性吸附。

2）可以考虑缩短显色时间，或降低二抗浓度。另外，选择适当强度的洗涤液，或延长洗涤时间也会有所帮助。

 

2. 没有显色或显色太弱

1）适当提高一抗或二抗的浓度。检测二抗效果，滴一滴稀释二抗在离心管内，检测二抗是否被正常显色。

2）可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系，例如生物素检测体系。

3）可以适当延长显色时间。

4）如果上述改进不能获得预期效果，可以考虑更换效果更好的一抗或ELISA试剂盒。