属性
形式
lyophilized powder
质量水平
200
specific activity
≥500CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)
分子量
68-130kDa
纯化方式
chromatography
溶解性
TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 0.05-0.1mg/mL at37°C
异质活性
Clostripain ≤2.0 U/mg
储存温度
20°C
说明
一般描述
来自溶组织梭状芽胞杆菌的胶原酶由胶原酶 G 和 H 组成。胶原酶具有 N 端活化剂结构域和 C 端肽酶结构域。胶原结合域（CBD）和多囊肾疾病样（PKD 样）域位于肽酶域中。[1]胶原酶模块在与钙结合时发生结构变化。[2]
应用
来自溶组织梭状芽孢杆菌的胶原酶可用于从许多类型的动物组织中分离细胞。它可用于分解人肿瘤、小鼠肾脏、人成年/胎儿脑、肺和许多其他组织。它也可以用于肝脏和肾脏的灌注研究、胰腺的消化，非实质大鼠肝细胞的分离以及肝细胞的制备。
来自溶组织梭状芽孢杆菌的胶原酶可用于：
从胶原蛋白凝胶中回收中性粒细胞[3]
将乳腺肿瘤活检组织分散成单细胞[4]
从子宫内膜活检组织中分离人原代子宫内膜基质细胞（HESC）[5]
生化/生理作用
粗胶原酶是溶组织梭状芽胞杆菌分泌的酶的混合物（主要是蛋白酶）。有效地从组织中释放细胞需要胶原酶和中性蛋白酶的共同作用。每摩尔酶用 4 克原子钙 (Ca2+) 激活胶原酶。一般认为培养滤液至少含有 7 种不同的蛋白酶，分子量范围为 68-130 kDa。
每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双（β-氨基乙基醚）-N，NN′,N′-四乙酸，β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。
包装
按胶原消化单位（CDU）出售的产品。
单位定义
一个胶原蛋白消化单元（CDU）从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸，5小时，pH7.4,37℃，在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白，产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时，pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分钟水解1.0 μmole BAEE。
制备说明
胶原酶可以溶解在 TESCA 缓冲液（50 mM TES，0.36 mM 氯化钙，pH 7.4，37°C）中，浓度为 0.05-0.1 mg/mL。