标签归档：裂解

SIGMA S7705 TRAPeze1X CHAPS裂解缓冲液

发表于由

属性
质量水平
100

manufacturer/tradename
Chemicon

运输

wet ice

说明
一般描述
1X CHAPS 裂解缓冲液是基于凝胶和 ELISA 的 TRAPeze 端粒酶检测试剂盒的组件，用于该过程的提取步骤。
用作 TRAPEZE 试剂盒检测法的补充试剂，当较大组织样品需要使用额外的 1X CHAPS 裂解缓冲液才能实现有效的细胞裂解即可使用该试剂。 它通过使该试剂盒能分析较大的组织样本，从而扩展了试剂盒的功能。
应用
TRAPeze1X CHAPS裂解缓冲液已用于：
用端粒酶定量活性测定(Q-TRAP)提取HEK293细胞总蛋白[1]
搅匀小鼠心房组织以进行蛋白质印迹分析[2]
在端粒酶表达分析细胞系中重悬细胞以确定蛋白浓度[3]

储存及稳定性
储存于 4°C。

SIGMA R7757-100ML 红细胞裂解缓冲液Hybri-Max

发表于由

R7757

红细胞裂解缓冲液Hybri-Max

liquid, sterile-filtered, suitable for hybridoma

别名:

RBC裂解缓冲液

NACRES:

NA.75

属性

无菌性

sterile-filtered

质量水平

400

形式

liquid

technique(s)

cell culture | hybridoma: suitable

杂质

endotoxin, tested

说明

应用

建议在细胞颗粒中加入1 mL缓冲液(细胞颗粒=1个脾脏或1-2亿个细胞)。 轻轻混合1分钟。 用15-20mL培养基活盐溶液稀释该缓冲液。 在250-500 × g 离心7分钟并弃去上清。 细胞可被稀释并准备计数或融合。 如果裂解不完全，可重复1-4步。

生化/生理作用

红细胞裂解缓冲液已被开发用于杂交瘤实验中，用于在融合前从小鼠脾细胞悬液中去除红细胞。 在需要从细胞悬液(如全血)中去除红细胞的体系中，它也很有用。

组分

含8.3g/L 氯化铵的0.01M Tris-HCl 缓冲液。

其他说明

注：本品用于去除小鼠红细胞。 本品可能不适用于其他动物红细胞的裂解。 该产品在小鼠脾细胞以外的任何应用场合的适用性必须由研究人员确定。

法律信息

Hybri-Max is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

SIGMA T9284-100ML Triton X-100

发表于由

R7757

红细胞裂解缓冲液Hybri-Max

liquid, sterile-filtered, suitable for hybridoma

别名:

RBC裂解缓冲液

NACRES:

NA.75

属性

无菌性

sterile-filtered

质量水平

400

形式

liquid

technique(s)

cell culture | hybridoma: suitable

杂质

endotoxin, tested

说明

应用

建议在细胞颗粒中加入1 mL缓冲液(细胞颗粒=1个脾脏或1-2亿个细胞)。 轻轻混合1分钟。 用15-20mL培养基活盐溶液稀释该缓冲液。 在250-500 × g 离心7分钟并弃去上清。 细胞可被稀释并准备计数或融合。 如果裂解不完全，可重复1-4步。

生化/生理作用

红细胞裂解缓冲液已被开发用于杂交瘤实验中，用于在融合前从小鼠脾细胞悬液中去除红细胞。 在需要从细胞悬液(如全血)中去除红细胞的体系中，它也很有用。

组分

含8.3g/L 氯化铵的0.01M Tris-HCl 缓冲液。

其他说明

注：本品用于去除小鼠红细胞。 本品可能不适用于其他动物红细胞的裂解。 该产品在小鼠脾细胞以外的任何应用场合的适用性必须由研究人员确定。

法律信息

Hybri-Max is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

Western及IP细胞裂解液（含蛋白酶抑制剂）（NBS5090）

发表于由

Western及IP细胞裂解液（含蛋白酶抑制剂）

货号：NBS5090

规格：100ml

品牌：JinPan

Western及IP细胞裂解液（含蛋白酶抑制剂）

产品简介：

Western及IP细胞裂解液是一种在非变性条件下裂解细胞的裂解液。本细胞裂解液裂解的细胞，可以用于PAGE，Western，免疫沉淀（immunol precipitation，IP）和免疫共沉淀（co-IP）。

Western及IP细胞裂解液的主要成分为20mM Tri（spH7.5），150mM NaCl，1%Triton X-100，以及sodium pyrophosphate，β-glycerophosphate，EDTA，Na3VO4，leupeptin 等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白的降解，并维持原有的蛋白间相互作用。用Western及IP 细胞裂解液得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

保存条件:

-20℃保存，一年有效

外泌体蛋白专用裂解液（NW3203）

发表于由

外泌体蛋白专用裂解液是专门针对外泌体样本研发的裂解试剂，可高效裂解外泌体蛋白，该裂解液已添加蛋白酶抑制剂，可有效抑制蛋白降解。使用时与外泌体样本 1:1 混匀即可，裂解后的蛋白样品可用于 BCA、Western Blot 等实验。本试剂含有较高浓度的去垢剂，不适用于Bradford 法测定蛋白浓度。

本产品的主要成分为 Tris(pH7.4), NaCl, Triton X-100, sodium deoxycholate, SDS, EDTA, PMSF,  Protease Inhibitor Cocktail（AEBSF, Aprotinin, Bestatin, E-64, Leupeptin, Pepstatin A）等。

genefist代理,植物总RNA提取试剂盒

发表于由

植物总RNA提取试剂盒品牌：genefist | 货号：TR02 植物总RNA提取试剂盒

储存条件
“裂解液RS” 和 “DNase I（DNase I 冻干粉溶解于专用保存液）”，储存于-20℃。其他试剂室温（15-25℃）保存。

产品简介
由于植物的细胞结构和代谢活性在物种、组织类型和发育阶段之间可能存在显著差异，因此没有一种通用的裂解溶液或独特的方法可以同样适用于所有植物样品。本试剂盒包含两种可供选择的裂解缓冲液系统：裂解缓冲液 RL（含硫氰酸胍）和裂解缓冲液 RS(含 SDS/抗氧化剂)，适用于各种植物和真菌样品。“裂解液RL”含硫氰酸胍，此提取方案适用于大部分的植物组织，操作简单快速，但它不适用于富含淀粉、多酚类及多糖类的样本，因为裂解液RL加入上述样本后，会使样本变非常粘稠甚至凝固。
“裂解液RS”，采用我司独特的“SDS/抗氧化”的方式，可适用于广泛的植物组织，包含草本植物与本本植物的叶片、具高粘性的多糖多酚类及种子胚乳的植物样本，此提取方案，增加了额外步骤去除多酚和多糖，RNA的提取总量更高。
本试剂盒提取的总 RNA 纯度高，基本没有基因组、蛋白和其它杂质的污染，可用于 PCR、Blot、分子克隆等多种下游实验。
植物总RNA提取试剂盒

预防RNase污染，应注意以下几方面
1.经常更换新手套，因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase污染。
2.使用无RNase的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3.RNA在裂解液RL中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4 h，塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10 min，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。
4.配制溶液应使用无RNase的水（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC至终浓度0.1%(V/V)，高压灭菌）。

使用前注意事项
1.裂解液 RL：使用前请添加 300ul 巯基乙醇，添加过巯基乙醇的裂解液 4℃保存。
2.裂解液 RS：使用前请于 50℃水浴将裂解液完全回溶，并添加 450ul 巯基乙醇；添加过巯基乙醇的裂解液RS 继续保存于-20℃（建议将添加过巯基乙醇的裂解液 RS 于无酶管分装成小量，再保存于-20℃）。
3.溶液 BC：使用前请添加 30ml 无水乙醇。
4.漂洗液 PW：使用前请向添加 64ml 无水乙醇。
5.为确保 RNA 的品质及产量，应尽量收取新鲜的动物组织进行 RNA 提取，或将组织立即以液氮冷冻，储存于-70℃，组织亦可保存在 RANstore 样本保存液（目录号：TR38）中。
6.凤梨和兰花推荐采用“裂解液 RL”。

操作步骤
一、裂解液 RL 操作步骤：
1.匀浆处理
50-100 mg 植物叶片在液氮中迅速研磨成粉末，加入 450ul RL（使用前请先检查是否已加入 β-巯基乙醇），涡旋剧烈震荡混匀，并于 56℃孵育 3 分钟。
注意 1：在 56℃孵育 1-3 min 将有助于植物组织裂解，但是对于某些富含淀粉的样品，请不要加热处理，防止因淀粉引起的样品膨胀现象。
注意 2：由于植物多样性非常丰富，而且同种植物的不同生长发育阶段和不同组织的 RNA 含量都不相同，请根据具体实验情况选择合适的植物材料的用量。
2.将所有溶液转移至过滤柱 CS1 上(过滤柱 CS1 放在收集管中)，12,000 rpm(~13,400×g)离心 2-5 min，小心吸取收集管中的上清至 RNase-Free 的离心管中，吸头尽量避免接触收集管中的细胞碎片沉淀。
注意：由于裂解液较粘稠，所以将溶液转移至过滤柱时，可以剪去部分吸头末端。
3.缓慢加入 0.5 倍上清体积的无水乙醇，混匀（此时可能会出现沉淀），转至“RNA 提取”步骤。
4.将所得“裂解液/乙醇混合液”（含沉淀），移取至吸附柱 CR1 中（吸附柱 CR1 放入收集管中），12,000 rpm(~13,400×g )离心 30-60 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。
注意：将溶液和沉淀转移至吸附柱 CR1 时，如果体积大于吸附柱容量，可以分次完成。
5.向吸附柱 CR1 中加入 500ul 溶液 RW，12,000 rpm (~13,400×g )离心离心 1 min，丢弃滤液,将吸附柱CR1 放回收集管中。
6.DNase Ⅰ降解。 
每一纯化反应，请将 80 ul DNase 消化液与 10ul DNaseⅠ预先混合在新的离心管(轻弹或翻转离心管以混合均匀，请勿震荡)，将 90 ul “DNaseⅠ工作液”加入至吸附柱的膜中心，于室温（25~28℃）孵育15 分钟。
注意：如同时操作多组样本，请使用前现配新鲜的 DNaseⅠ工作液,请勿预先配制保存 DNaseⅠ工作液。
7.向吸附柱 CR1 中加入 500μl 溶液 RW，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。
8.向吸附柱 CR1 中加入 600μl 漂洗液 PW（使用前请先检查是否已加入乙醇），12,000 rpm(~13,400×g) 离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。
9.重复操作步骤 8。
10.12,000 rpm(~13,400×g)离心 3 min，将吸附柱 CR1 置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余
的乙醇。
注意：此步骤目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，离心后将吸附柱 CR1 在室温放置片刻，以充分晾干。如果有漂洗液残留，可能会影响后续的 RT 等实验。
11.将吸附柱 CR1 转入一个新的 RNase-Free 离心管中，加入 30-100 μl 无酶双蒸水至吸附柱的膜中心，室温静置 2 min，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，得到 RNA 溶液。
注意：洗脱缓冲液体积不应少于 30 μl，体积过小影响回收效率；RNA 溶液请于-70℃保存。

二、裂解液 RS 操作步骤
1.匀浆处理：50-100 mg 植物叶片在液氮中迅速研磨成粉末，加入 450 μl 裂解液 RS（使用前请先检查是否已加入 β-巯基乙醇），立即涡旋剧烈震荡混匀，并于 56℃孵育 5-10 分钟，每隔一段时间可翻转混合离心管。
注意：由于植物多样性非常丰富，而且同种植物的不同生长发育阶段和不同组织的 RNA 含量都不相同，请根据具体实验情况选择合适的植物材料的用量。
2.加入 150ul 的溶液 GP 至裂解液中，混合均匀，于冰上孵育 5 分钟，12,000rpm(~13,400×g)离心 5 min。
注意：溶液会呈现雾状，为界面活性剂、蛋白质、多糖及二次代谢物的沉淀物。
3.移取上清液至过滤柱 CS1 上(过滤柱 CS1 放在收集管中)，12,000 rpm(~13,400×g)离心 2 min。
4.小心吸取收集管中的上清至新的 RNase-Free 离心管中，吸头尽量避免接触收集管中的细胞碎片沉淀。
5.向溶液中加入 1.5 倍体积的溶液 BC（已添加无水乙醇）,以震荡或移液器吸吐混合均匀。
注意：加入溶液 BC 后会形成丝状沉淀物，不影响 RNA 提取。
6.移取混合液（连同沉淀物一起）至吸附柱 CR1（吸附柱 CR1 放在收集管中），12,000 rpm(~13,400×g) 离心 1 min，丢弃滤液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。
注意：如果混合液体积大于吸附柱容量，可以分次完成。
7.向吸附柱 CR1 中加入 500ul 溶液 RW，12,000rpm(~13,400×g)离心 1min，丢弃滤液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。
8.DNase Ⅰ降解。
每一纯化反应，请将 80 ul DNase 消化液与 2ul DNaseⅠ预先混合在新的离心管(轻弹或翻转离心管以混合均匀，请勿震荡)，将 82 ul “DNaseⅠ工作液”加入至吸附柱的膜中心，于室温（25~28℃）孵育15 分钟。
注意：如同时操作多组样本，请使用前现配新鲜的 DNaseⅠ工作液,请勿预先配制保存 DNaseⅠ工作液。
9.向吸附柱 CR1 中加入 500μl 溶液 RW，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。 

10.向吸附柱 CR1 中加入 600 μl 漂洗液 PW（使用前请先检查是否已加入乙醇），12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，丢弃滤液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。
11.重复操作步骤 10。
12.12,000rpm(~13,400×g)离心 3 min，将吸附柱 CR1 置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附柱中残余的乙醇。
注意：此步骤目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，离心后将吸附柱 CR1 在室温放置片刻，以充分晾干。
如果有漂洗液残留，可能会影响后续的 RT 等实验。
13.将吸附柱 CR1 转入一个新的 RNase-Free 离心管中，加入 30-100 μl 无酶双蒸水至吸附柱的膜中心，室
温静置 2 min，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，得到 RNA 溶液。
注意：洗脱液体积不应少于 30μl，体积过小影响回收效率。为了增加产量，可将步骤 13 得到的 RNA 溶液再加入吸附柱 CR1，放置 2min，12,000rpm(~13,400×g)离心 1min，得到 RNA 溶液。RNA 溶液-70℃中保存。

附录：从高度黏稠性的富含多酚及多糖成分的样本中提取 RNA
樟科植物样本，在裂解后粘稠度高、移取困难，可直接于过滤柱中进行裂解，以减少移液器吸取的步骤。
1.将过滤柱 CS1 于冰上预冷，秤取不超过 30mg 的样本组织，于液氮中迅速研磨，并将研磨的样本直接转移至预冷的过滤柱 CS1 里（过滤柱 CS1 放在收集管中）。
2.加入 600ul 裂解液 RS(已添加巯基乙醇)至过滤柱，于 60℃金属浴孵育 10 分钟。
3.12,000 rpm(~13,400×g)离心 5 min，将收集管中的滤液移取至新的 1.5ml 离心管，请避免吸取到沉淀物。
注意：有些样本可能会堵塞过滤柱，可再次离心，或将管柱中剩余的裂解液移至新的过滤柱 CS1 再次离
心。
4.加入 1/3 倍体积的溶液 GP 至滤液中，混合均匀，于冰上孵育 5 分钟，12,000 rpm(~13,400×g)离心离心 5 min，将上清液小心转移至新的 1.5ml 离心管，不要触碰或移取固体沉淀。转至上面“操作步骤5”。

上海金畔生物科技有限公司代理各种进口试剂耗材，欢迎来电咨询18301939375，量多优惠。网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗，仅可用于科研等非医疗目的。

SDT裂解液,常用生化试剂

发表于由

SDT裂解液品牌：JinPan | 货号：JP-8452-500ml

SDT Lysis Buffer

【保存条件】
4℃保存，有效期 6 个月。-20℃保存，有效期 1 年。
【概述】
SDT 裂解缓冲液用于裂解哺乳动物细胞和组织。其含有 SDS、Tris-HCl、DTT，对样本全蛋白有很好的提取效果。 但其中所含的 SDS 会使蛋白质变性失活，因此不适合后续活性相关实验。试剂请于避光保存，以确保其稳定性。
【使用建议】
1. 取 100mg 动物组织或细胞（组织提前剪成小块）加入 500μl PBS 溶液中初步匀浆（60 Hz，45s），再加入 500μl SDT 裂解液。
2. 将上一步加有 SDT 裂解液的动物组织或细胞于 4℃进行匀浆（60 Hz，20s）。
3. 低速短暂离心将管壁液体离下，后置于沸水浴（或 100℃）3min。
4. 再次使用探头超声：40-50W 超声 5s，间隔 5s，一共 6 个循环。
5. 将溶液置于沸水浴（或 100℃）2min，10000g 离心 10min。
6. 收集上清进行后续实验。
【注意事项】
1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 该试剂仅用于科研领域，不得用于临床诊断或其他用途。
3. SDT 裂解液不适用于后续做与活性相关的实验，如免疫共沉淀。在进行蛋白质浓度测定时由于 SDT 裂解液中含有 SDS 和 DTT，因此 Bradford 法和 BCA 方法不适用，而应选择去垢剂和还原剂均兼容的荧光法测定蛋白质浓度。各种裂解液中含有的去垢剂均会影响胰蛋白酶活性，并且对质谱分析产生很大影响，因此均需要在蛋白质样品酶解前除去。
4. SDT 裂解液中含有较高浓度的 SDS，在低温下可能析出为正常现象，使用前只需将溶液置于 37℃加热
5-10min 或至溶解即可。

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精子裂解液II,常用生化试剂

发表于由

精子裂解液II品牌：JinPan | 货号：JP-8242-100ml

Sperm Lysis Buffer II

【保存条件】
-20ºC 保存
【概述】
本产品是主要用于精子核酸提取前处理，可配合磁珠或柱法核酸提取使用。
【操作方法】
1. 收集 1ml 精液样本以 12000g 转速离心 4 分钟。
2. 离心后弃去上清。
3. 加入 400ul Sperm Lysis Buffer II 缓冲液，吸头吹打均匀，56ºC 孵育 10-20 分钟（期间适当上下晃动）
4．将裂解后样本 12000-15000g 离心 1-2 分钟，取上清裂解液-20ºC 保存备用或用于提取使用
5．取 200-400ul 用于下游柱法或磁珠法提取（视提取试剂盒要求）
【注意事项】
1. 如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用，以免反复冻融及污染。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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精子裂解液I,常用生化试剂

发表于由

精子裂解液I品牌：JinPan | 货号：JP-8241-100ml

Sperm Lysis Buffer I

【保存条件】
2-8℃保存，长时间建议-20℃保存
【概述】
本产品是主要用于精子核酸提取前处理，可配合磁珠或柱法核酸提取使用。
【操作方法】
1. 收集 1ml 精液样本以 12000g 转速离心 4 分钟。
2. 离心后弃去上清。
3. 加入 400ul Sperm Lysis Buffer I 缓冲液，吸头吹打均匀，70℃孵育 10 分钟（期间适当上下晃动）
4．将裂解后样本 12000-15000g 离心 1-2 分钟，取上清裂解液-20℃保存备用或用于提取使用
5．取 200-400ul 用于下游柱法或磁珠法提取（视提取试剂盒要求）
【注意事项】
1. 如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用，以免污染。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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