德国MN NucleoBond Xtra Midi 超快速转染级质粒中提试剂盒 740410.50

发表于2024年4月12日由上海金畔生物

NucleoBond(R) Xtra Midi / Maxi

德国MN NucleoBond Xtra Midi 超快速转染级质粒中提试剂盒

货号：740410.50

规格：50 preps

品牌：德国MN

从大肠杆菌中提取高拷贝/低拷贝质粒。新一代阴离子交换柱-短时间，高产量，转染用质粒。

特点：

节约60%的时间，增加100%的产量

新一代阴离子交换–超快，高产量的转染级别的质粒DNA
优化设计的柱子：制备时间约为30 分钟(Midi prep)；35 分钟(Maxi prep)
包含柱过滤器：高过虑流速，清除裂解液中不溶物的同时可向柱子加样
改进的硅材料：标准的产量250μg-1000μg
专li的阴离子交换技术得到转染级别的质粒DNA
NucleoBond(R)Xtra Plus kits 包含NucleoBond(R) Finalizers；加速了DNA的沉淀

2nd generation of anion exchanger for fast purification of plasmid DNA

Selling unit	10 Prep(s), 50 Prep(s), 100 Prep(s)
Application	Transfection-grade plasmid DNA isolation
Target	Plasmid DNA
CE certified	No, research use only
Technology	Anion exchange chromatography
Brand	NucleoBond
Format	Midi prep
Handling	Gravity flow
Lysate clarification	Column filter
Automated use	Yes, can be automated on the Andrew+ the pipetting robot
Sample material	Bacteria, E. coli
Sample amount	< 200 mL (high copy), < 400 mL (low copy)
Vector size	< 300 kbp
Typical yield	500 µg
Theoretical binding capacity	800 µg
Typical purity A260/A280	1.8−1.95
Endotoxin level	1−10 EU/µg DNA
Isopropanol precipitation	Centrifugation, NucleoBond Finalizer, NucleoSnap Finisher Midi, NucleoSpin Finisher Midi
Preparation time	70 min/prep
Typical downstream application	Cloning, PCR, Restriction analysis, Sequencing, Transfection of cells
Storage temperature	15−25 °C
Shelf life (from production)	39 Month(s)
Hazardous material	Yes

产品概览

	NucleoBond(R) XtraMidi		NucleoBond(R) Xtra Maxi
技术	阴离子交换色谱法
产品形式	Midi gravity-flow columns		Maxi gravity-flow columns
裂解液澄清	柱过滤器		柱过滤器
样品材料	< 200 mL (高拷贝) < 400 mL (低拷贝)		< 600 mL (高拷贝) < 1 200 mL (低拷贝)
载体大小	< 300 kbp		< 300 kbp
产量	250 μg		1000 μg
A260/A280	1.80 – 1.95		1.80 – 1.95
异丙醇沉淀	Xtra Midi	Xtra Midi Plus	XtraMaxi	XtraMaxi Plus
	Centrifugation	NucleoBond(R) Finalizer	Centrifugation	NucleoBond(R)Finalizer Large
制备时间	70min/4preps	30min/4preps	80min/4preps	35min/4preps

DH5α感受态细胞

发表于2024年4月11日由上海金畔生物

DH5α感受态细胞

产品简介

本公司生产的DH5α感受态细胞是采用大肠杆菌DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测，转化效率可达108个转化子/μg质粒DNA，-70℃保存3个月转化效率可保持在90%以上。每支感受态可以酌情分装使用，降低了实验的成本。质量稳定，使用方便，质优价廉。

基因型：F-，φ80lacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169， recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA1

产品组分

货号	C1041	C1042
感受态细胞	5×100 μl	10×100 μl
对照质粒pUC19（1 ng/μl）	10 μl	10 μl
说明书	1份	1份

产品特点

DH5α菌株一种常用于质粒克隆的菌株。其φ80lacZΔM15基因的产物可与pUC载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补，可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。

保存条件

低温运输，-70℃冻存。

操作方法（以下操作均按无菌条件的标准进行）———————————————————

1 取感受态细胞置于冰浴中，如需分装可将刚融化的细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中，置于冰浴中。

一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl，可以根据实际情况分装使用。应注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。

以下实验以100 μl感受态细胞为例。

2 向感受态细胞悬液中加入目的DNA，轻轻旋转离心管以混匀内容物，在冰浴中静置30分钟。

3 将离心管置于42℃水浴中放置90秒，然后快速将管转移到冰浴中，使细胞冷却2-3分钟，该过程不要摇动离心管。

4 向每个离心管中加入500 μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床振荡培养1小时（160 – 220 转/分钟），目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。

5 将离心管内容物混匀，吸取100 μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上，用无菌的弯头玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。将平板置于室温直至液体被吸收，倒置平板，37℃培养12-16小时。

涂布用量可根据具体实验来调整。如转化的DNA总量较多，可取更少量转化产物涂布平板；反之，如转化的DNA总量较少，可取 200-300 μl 转化产物涂布平板。如果预计的克隆较少，可通过离心（4,000 rpm, 2分钟）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。（涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的培养板。）

注意事项———————————————————————————————————-

1. 感受态细胞应保存在-70℃，不可多次冻融和放置时间过长，以避免降低感受态细胞的转化效率。

2. 进行转化操作时，应根据相应温度及无菌条件的要求进行。

3. 为防止转化实验不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化，将损失降到最低。