产品编号
PV951
Mouse VCAM-1/CD106 ELISA Kit
96次
3198
的Mouse?VCAM-1/CD106?ELISA?Kit?(Mouse?Vascular?Cell?Adhesion?Molecule-1?Enzyme-Linked?
ImmunoSorbent?Assay?Kit)，即小鼠血管细胞粘附分子-1酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的VCAM-1/CD106的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为45.8pg/ml，与小鼠E-Selectin、ICAM-1
、L-Selectin、P-Selectin，人VCAM-1等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
血管细胞粘附分子(Vascular Cell Adhesion Molecule-1, VCAM-1)，又称CD106，是一种I型跨膜糖蛋白，属于细胞粘附分子中免疫球蛋白亚族。通过选择性剪切，小鼠VCAM-1至少具有两种剪切变体。长VCAM-1亚型分子量为110kDa，胞外域包含674个氨基酸，能够形成7个C2型免疫球蛋白区域，跨膜区和胞内域的氨基酸长度分别为22和19。短VCAM-1亚型分子量为45kDa，属于糖基磷脂酰肌醇结合膜蛋白。无论是跨膜VCAM-1还是膜绑定VCAM-1都能够被分泌得到游离形式的VCAM-1，并且在血液和细胞培养上清液中均能检测到游离VCAM-1的存在。小鼠VCAM-1具有一定的种间交叉反应性，小鼠长VCAM-1亚型与大鼠和人VCAM-1分别具有86%和74%的氨基酸同源性。三种VCAM-1胞质域氨基酸序列完全相同。
VCAM-1主要表达在血管内皮细胞，炎性物质刺激会诱导其表达。同时在一些非血管细胞中VCAM-1也有表达，例如树突状细胞、巨噬细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞、骨髓来源基质细胞、软骨细胞、间皮细胞、肾小管上皮细胞和胚胎成肌细胞等。VCAM-1能够招募淋巴细胞到达炎症部位，并且能够促进淋巴细胞外渗。表达在骨髓内皮细胞和基质细胞表面的VCAM-1能够调节T细胞和B细胞的发育过程。VCAM-1还能调节黑色素瘤细胞和内皮细胞之间的粘附作用，从而促进肿瘤细胞转移。游离形式的VCAM-1能够调节血管新生，并且对T淋巴细胞和单核细胞具有一定的趋化作用。VCAM-1和整合素的相互作用会促进部分病理状态的发展，例如动脉粥样硬化、风湿、系统性红斑狼疮、炎症性肠病和移植排斥反应等。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich?ELISA)检测样品中小鼠VCAM-1/CD106的浓度，其原理见图1。小鼠VCAM-1/CD106特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的小鼠VCAM-1/CD106会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗小鼠VCAM-1/CD106抗体后，生物素化抗小鼠VCAM-1/CD106抗体与小鼠VCAM-1/CD106结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。小鼠VCAM-1/CD106浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中小鼠VCAM-1/CD106浓度。
图1. 双抗体夹心ELISA原理图。
一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：
产品编号
产品名称
包装
PV951-1
小鼠VCAM-1/CD106抗体预包被板
8孔×12条
PV951-2
标准品稀释液(5X)
20ml
PV951-3
小鼠VCAM-1/CD106标准品
2-4瓶
PV951-4
小鼠VCAM-1/CD106生物素化抗体
10ml
PV951-5
辣根过氧化物酶标记Streptavidin
10ml
PV951-6
洗涤液(20X)
30ml
PV951-7
TMB溶液
10ml
PV951-8
终止液
5ml
PV951-9
封板膜(透明)
2张
PV951-10
封板膜(白色)
2张
–
说明书
1份
?保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
?注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。