标签归档：chip

BeyoChIP? ChIP Assay Kit (Protein A/G磁珠)

发表于由

产品编号

JP2080S
BeyoChIP? ChIP Assay Kit (Protein A/G磁珠)
22次

1998

BeyoChIP? ChIP Assay Kit (Protein A/G磁珠)即BeyoChIP? Chromatin Immunoprecipitation (ChIP) Assay Kit with Protein A/G Magnetic Beads，也称染色质免疫沉淀检测试剂盒或ChIP检测试剂盒(蛋白A/G磁珠)，用于通过免疫沉淀来沉淀和目标蛋白结合的染色质片段，最后通过PCR或Southern等方法来检测沉淀的染色质片段的试剂盒。通常用于检测特定的转录因子或组蛋白等基因组DNA结合蛋白是否和预期的特定基因组DNA序列在同一复合物中[1-2]。
通过ChIP检测可以获得在体的(In Vivo)目标蛋白和预期基因组DNA片段是否在同一复合物中的结论。EMSA，也称gel shift获得的结果是体外的(In Vitro)目标蛋白和预期基因组DNA片段的结合结果，可以推断细胞内也发生类似的结合，但并不代表该情况在细胞内也真实发生。而ChIP的检测结果则可明确说明这种结合在细胞内是真实发生的[1-2]。
本ChIP Assay Kit采用了Protein A/G磁珠(Protein A/G Magnetic Beads)，和Protein A磁珠或Protein G磁珠相比适合于免疫沉淀更多种类的抗体，包括mouse IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3, IgA, rat IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG2c, rabbit IgG, rabbit and goat polyclonal Abs，以及human IgG1, IgG2, IgG3和IgG4。磁珠法比琼脂糖法更方便、快捷。常规的琼脂糖法需要长时间离心，而磁珠法无需离心，只需要短时间磁性分离即可，可以有效避免因为离心对免疫复合物造成的机械力影响，充分保证免疫复合物的天然状态。
本试剂盒中经过Salmon Sperm DNA预饱和的Protein A/G Agarose和目的基因组DNA的非特异性结合大大下降。如果ChIP产物用于染色质免疫共沉淀测序(ChIP-Seq)，需要从数据中去除可能的Salmon Sperm DNA数据。
提供了预混合的对照引物(Control Primers)。可用于扩增human GAPDH的部分相应序列，引物序列为：5′-TACTAGCGGTTTTACGGGCG-3’；5′-TCGAACAGGAGGAGCAGAGAGCGA-3’。
本试剂盒如果用于常规的染色质免疫沉淀，共可以免疫沉淀22个样品。
包装清单：

产品编号
产品名称
包装

JP2080S-1
Protein A/G Magnetic Beads/Salmon Sperm DNA
3ml

JP2080S-2
Glycine Solution (10X)
30ml

JP2080S-3
ChIP Dilution Buffer
48ml

JP2080S-4
Low Salt Immune Complex Wash Buffer
24ml

JP2080S-5
High Salt Immune Complex Wash Buffer
24ml

JP2080S-6
LiCl Immune Complex Wash Buffer
24ml

JP2080S-7
TE Buffer
48ml

JP2080S-8
0.5M EDTA
250μl

JP2080S-9
5M NaCl
500μl

JP2080S-10
1M Tris, pH 6.5
500μl

JP2080S-11
SDS Lysis Buffer
10ml

JP2080S-12
Control Primers (5μM each)
0.1ml

—
说明书
1份

保存条件：
4℃保存，一年有效。长期不使用可以-20℃保存，-20℃保存可以保存更长时间。
注意事项：
需自备用于ChIP的一抗，37%甲醛，PBS (JJP0100221A)，蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物样品抽提用, 100X) (JP1010/JP1011)、蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(哺乳动物样品抽提用, 50X) (JP1050/JP1051)或PMSF (JP56/JP57)，Elution Buffer (1% SDS, 0.1M NaHCO3)，蛋白酶K (JJP5032/JJP5033)，Glycogen (DNase, RNase & Protease free) (D0816)或Glycogen (核酸沉淀用) (D0812)，Tris平衡苯酚，氯仿，95%乙醇，70%乙醇，3M NaAc (pH5.2) (JJP3051)以及细胞刮(FSCJJP20/FSCJJP20)或细胞铲(FLFT021)，磁力架(FMS004/FMS008/FMS016/FMS024)。
需自备样品超声处理仪(sonicator)，也称超声粉碎机或超声细胞粉碎机。
使用甲醛时请在通风橱中进行操作。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

ACE 染色质免疫共沉淀（CHIP）试剂盒（BK0045-01）

发表于由

ACE 染色质免疫共沉淀（CHIP）试剂盒（BK0045-01）

货号：BK0045-01   

规格：24 T

品牌：ACE

产品介绍

ChIP（Chromatin Immunoprecipitation）检测试剂盒，也称染色质免疫共沉淀检测试剂盒，是ChIP相关实验流程中最重要的一环。ChIP是在活细胞状态下，通过甲醛固定使蛋白质与DNA形成复合物，并通过超声的方法将其随机切断成一定长度范围内的染色质小片段，然后再通过抗原抗体特异性结合反应，富集与目的蛋白结合的DNA片段，解交联后分离、纯化DNA，获取的DNA经检测分析，从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。
该试剂盒包含Box A、Box B和Box C，可进行24次独立的染色质免疫沉淀（ChIP）反应，提供的缓冲液可供六个15 cm平板的培养细胞制备染色质，每个平板可提供多达10个染色质制剂（随细胞和测定类型的不同而不同），检测时间大约2-3天。经验证，试剂盒中提供的rProtein A/G MagPoly Beads，能更好的免疫沉淀染色质。在蛋白质-DNA解交联后，DNA 使用离心柱法进行纯化，方便快捷，无需进行苯酚/氯仿提取和乙醇沉淀。目的DNA序列的富集可通过标准PCR、定量实时 PCR或测序等各种方法进行分析。

产品组分

ACE 染色质免疫共沉淀（CHIP）试剂盒（BK0045-01）

订购信息

产品 货号 规格
染色质免疫共沉淀（CHIP）试剂盒 BK0045-01 24 T

ChIP-Seq 核裂解液,常用生化试剂

发表于由

ChIP-Seq 核裂解液品牌：JinPan | 货号：JP-8145-100ml

ChIP-Seq Nuclear Lysis buffer

【保存条件】 

-20 ℃保存，有效期 12 个月 

【概述】 

本品适用于小片段（5-500bp）单链 DNA 的杂交反应，获得更优质的杂交双链 DNA 片段，如 shRNA、gRNA 载体等构建。 

【操作方法】 

1. 收获细胞核后，将细胞核重悬于 3-5 倍体积的冰冷的 ChIP-Seq 核裂解缓冲液中（5 倍体积取决于细胞核 提取过程中细胞裂解液用量，如细胞裂解液用量为 100µl 则加入 500µl ChIP-Seq 核裂解液） 

2. 将试管在冰上孵育 20 分钟。 

3．从每个样品中取 5 µL 等分试样，并用 15 µL TE 稀释以用于分析凝胶确认。（注：将剩余保存在冰上或 冻-20 ℃，直到需要为止。该样品用于确认染色质在分离前是完整的。） 

4. 将试管放入设定为 2°C 的超声浴中, 调节水位，使管子刚好接触杯垫的表面。。 如用 Misonix 431A 对每个试管进行 300 µl 的超声处理非常稳定，因此我们建议将较大的样品分成多个试管进行超声处理。将至少两个和多达 8 个试 管放入超声仪的试管支架中。 

5. 用 10 秒的脉冲和 10 秒的静止时间以 20 的振幅对样品进行超声处理，总超声时间为 30 分钟。 

6. 从超声仪中取出样品，并保存在冰上。 

7. 取 5 µl 样品，并用 15 µl TE 稀释以用于分析凝胶。 

8. 在 37°C 下，用 10 µg RNase A 样品 15 分钟。 

9. 在 65°C 下用 20 µg 蛋白酶 K 样品 30 分钟。 

10. 在 95°C 下反向交联 5 分钟，使样品缓慢冷却至室温。 需要执行这些步骤以确保 DNA 在琼脂糖凝胶上的正确迁移。否则，将发生比预期高得多的分子量的涂污或迁移。 

11. 将加样染料添加到每个样品中，并在 TAE 运行缓冲液中的 1％琼脂糖凝胶上分离样品。 

12. 凝胶成像仪下观察琼脂糖凝胶上的 DNA 样品。 剪切染色质的大小应在 200 至 500 bp 之间。 

13. 若步骤 12 完成后鉴定可行，将步骤 6 中其余样品在 4°C 下以 16,000 g 的速度离心 10 分钟，以去除不 溶物。 

14. 将可溶的剪切染色质转移到新鲜的 1.5ml 离心管中。 染色质可以在液氮中冷冻，并在-80°C 下保存直至需要。 

15．按上述方法用 RNase A，蛋白酶 K 和交联逆转处理等分试样（步骤 8-10）。 

16．使用 QIAquick PCR 纯化试剂盒纯化染色质，并使用 NanoDrop 等测量 DNA 浓度。 

【注意事项】 

1. 如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用，以免污染。 

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

本网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗，仅可用于科研等非医疗目的。