标签归档：dtt

TCEP (DTT Substitute)

发表于由

产品编号

JJP010045-1g
TCEP (DTT Substitute)
1g

100

JJP010045-5g
TCEP (DTT Substitute)
5g

362

JJP010045-25g
TCEP (DTT Substitute)
25g

1319

JJP010045-100g
TCEP (DTT Substitute)
100g

3961

??????TCEP即TCEP-HCl，全称Tris(2-carboxyethyl)phosphine?hydrochloride，中文名为三(2-羧乙基)膦盐酸盐。分子式为C9H15O6P·HCl，分子量为286.65，CAS号51805-45-9。本产品在大多数情况下可以作为DTT的替代物使用。

图1. TCEP-HCl的化学结构式。

??????本产品为白色粉末，纯度≥98%，易溶于水，最高可达310mg/ml (1.08M)，在有机溶剂如乙醇、甲醇等中溶解度较小。TCEP直接溶解在水中时的pH约为2.5。
??????TCEP是一种高效、无异味、不含硫醇基的水溶性还原剂，可选择性还原多肽或蛋白质中的二硫键。TCEP具有更佳的稳定性、更广的兼容性、更强的还原性、更好的选择性，而且由于不含巯基，因此在多数应用中不必去除，从而广泛应用于生物化学和分子生物学中，特别是在蛋白质化学、蛋白质组学中，是公认的DTT的良好替代物。
??????TCEP对还原二硫键选择性极强，除半胱氨酸外，几乎不会与其它氨基酸有反应，并且能在更宽的pH值范围包括酸性条件下使用，从而有效减少酰胺键的水解。TCEP的反应活性温和、易溶、毒性小，且更容易操作，在酸性、碱性溶液中的稳定性都很好。
??????TCEP使用范围广泛，无论是普通的SDS-PAGE中蛋白的还原，还是一些特殊的实验如固相金属离子亲和层析(IMAC)、质谱、Ni柱纯化等其它需要还原二硫键的实验，也特别适用于组氨酸标记蛋白纯化、马来酰亚胺偶联半胱氨酸残基反应，它能够预防半胱氨酸残基形成二硫键，但不像DTT或β-巯基乙醇本身易与马来酰亚胺反应。
??????TCEP的特点有：无气味——与DTT和β-巯基乙醇不同，TCEP是无异味的，有助于创造更加健康的实验室环境；高效——5到50mM 的TCEP在数分钟内即可完全还原大多数多肽或蛋白的二硫键(与DTT等效)；特异性——选择性的完全还原甚至最稳定水溶液中的烷基化二硫键；快速——在室温和pH5的条件下，不到五分钟即可还原蛋白的二硫键；稳定——耐空气氧化，无挥发性，与蛋白的其它功能基团不反应；通用性——可在广泛pH范围、盐、去垢剂、温度条件下还原多肽和蛋白；兼容性——不含巯基，因此在多数应用中不必去除还原试剂。
??????TCEP与DTT主要特点的比较表格如下：

主要特点

TCEP

DTT

气味

无

轻微的硫磺气味(臭味)

水溶解性

310g/L

50g/L

还原性

维持2-3周

维持3-7天

稳定性

无挥发性，耐空气氧化，基本不受金属离子影响，与蛋白的其它功能基团不反应

挥发性弱，尽量减少暴露在空气中的时间，在Ni2+存在下，快速氧化

pH工作范围

1.5-8.5

6.5-9.0

工作浓度

5-50mM (大多数体系)

1-100mM

Ni2+柱纯化His标签的蛋白

适用

不适用

马来酰亚胺标记蛋白反应

标记前不需要去除

标记前需要去除

??????在SDS-PAGE电泳中，一般终浓度在25mM左右的TCEP即可足够还原蛋白样品。也可直接使用各类含TCEP的无气味的蛋白上样缓冲液(JJP202、JJP206、JJP207、JJP208、JJP209、JJP202)。
包装清单：

产品编号

产品名称

包装

JJP010045-1g

TCEP (DTT Substitute)

1g

JJP010045-5g

TCEP (DTT Substitute)

5g

JJP010045-25g

TCEP (DTT Substitute)

25g

JJP010045-100g

TCEP (DTT Substitute)

100g

—

说明书

1份

保存条件：
??????-20℃或4℃保存，至少2年有效。室温保存，至少一年有效。
注意事项：
??????本产品用于蛋白变性时，建议95℃水浴或PCR仪加热5分钟，温度过高(如100℃)或时间过长(如超过15分钟)，有可能会导致蛋白降解或上样缓冲液中指示剂的颜色异常。
??????本产品在磷酸盐缓冲液中，尤其在中性或碱性磷酸盐缓冲液中很不稳定。因此若实验过程需将本产品配制在PBS缓冲液中使用，必须现配现用。
??????大多数蛋白无需变性剂即可高效还原，但加入盐酸胍等变性剂有助于将内部二硫键暴露而易于和TCEP发生反应。
??????不建议使用尿素作为变性剂，避免形成氰酸酯并与巯基反应。
??????尽量防止金属接触TCEP溶液，否则会一定程度降低TCEP活性。在还原过程中向样品缓冲液中加入5至20mM EDTA有助于防止巯基被二价金属离子氧化，如Zn2+、Cu2+和Mg2+等。
??????还原后样品应尽快使用，长时间放置后会重新生成二硫化物。
??????本产品在溶液中带电荷，因此不适用于等电聚焦(IEF)实验。
??????TCEP对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
??????本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
??????为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2M DTT溶液-5ml,常用生化试剂

发表于由

2M DTT溶液-5ml品牌：JinPan | 货号：JP-8550-5ml

2M DTT Solution

【保存条件】
-20℃避光保存一年
【概述】
DTT即DL-Dithiothreitol，中文名为二硫苏糖醇。分子式为C4H10O2S2，分子量为154.25，本产品原料为进口原料，不含 DNA 酶、RNA 酶和蛋白酶(DNase, RNase & Protease free)，纯度>99%。干燥失重低于 0.5%，氧化 DTT 含量低于 0.5%。DTT 是常用还原剂，有抗氧化作用。DTT 和巯基乙醇相比，作用相似，但 DTT 的刺激性气味要小很多，毒性也比巯基乙醇低很多。而且 DTT 比巯基乙醇的浓度低 7 倍时，两者效果相近。
本品浓度为 2mol/L。
【注意事项】
1. DTT 对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

本网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗，仅可用于科研等非医疗目的。

2M DTT溶液,常用生化试剂

发表于由

2M DTT溶液品牌：JinPan | 货号：JP-8550-1ml

2M DTT Solution

【保存条件】
-20℃避光保存一年
【概述】
DTT即DL-Dithiothreitol，中文名为二硫苏糖醇。分子式为C4H10O2S2，分子量为154.25，本产品原料为进口原料，不含 DNA 酶、RNA 酶和蛋白酶(DNase, RNase & Protease free)，纯度>99%。干燥失重低于 0.5%，氧化 DTT 含量低于 0.5%。DTT 是常用还原剂，有抗氧化作用。DTT 和巯基乙醇相比，作用相似，但 DTT 的刺激性气味要小很多，毒性也比巯基乙醇低很多。而且 DTT 比巯基乙醇的浓度低 7 倍时，两者效果相近。
本品浓度为 2mol/L。
【注意事项】
1. DTT 对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


本网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗，仅可用于科研等非医疗目的。

1M DTT溶液(DNase, RNase & Protease free),常用生化试剂

发表于由

1M DTT溶液(DNase, RNase & Protease free)品牌：JinPan | 货号：JP-8187-1ml

1M DTT Solution (DNase, RNase & Protease free)

【保存条件】 

-20℃避光保存一年 

【概述】 

DTT即DL-Dithiothreitol，中文名为二硫苏糖醇。分子式为C4H10O2S2，分子量为154.25， 本产品原料为进口原料，不含 DNA 酶、RNA 酶和蛋白酶(DNase, RNase & Protease free)， 纯度>99%。干燥失重低于 0.5%，氧化 DTT 含量低于 0.5%。 

DTT 是常用还原剂，有抗氧化作用。DTT 和巯基乙醇相比，作用相似，但 DTT 的刺激性气味要小很多，毒性也比巯基乙醇低很多。而且 DTT 比巯基乙醇的浓度低 7 倍时，两者效果相近。 

本品浓度为 1mol/L。 

【注意事项】 

1. DTT 对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。 

2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作

本网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗，仅可用于科研等非医疗目的。

4×SDS-PAGE双色蛋白Loading buffer（DTT）,常用生化试剂

发表于由

4×SDS-PAGE双色蛋白Loading buffer（DTT）品牌：JinPan | 货号：JP-8153-1ml

4×SDS-PAGE双色蛋白上样缓冲液（DTT）使用说明书

【包装规格】

产品编号

产品名称

包装

JP-8153

SDS-PAGE Dual Color Protein Loading Buffer,4×(with DTT)

1ml/10ml/100ml

 

使用说明书

1份

【保存条件】

建议分装冻存，避免反复冻融，-20℃，有效期1年

【概述】

4×SDS-PAGE双色蛋白上样缓冲液可保护蛋白质在样品制备步骤中免受热降解，并在SDS-PAGE运行期间防止pH值变化。一些蛋白质对在Tris缓冲液中电泳期间温度波动引起的pH变化敏感，优化后的上样缓冲液组分可防止在SDS-PAGE电泳之前的样品加热过程中以及电泳过程中蛋白质降解。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异；SDS还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质结构，消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。

上样缓冲液包含两种跟踪染料：蓝色（溴酚蓝），用于跟踪电泳的进度；粉红色（pyronin Y），用于在Western印迹过程中监测蛋白质向膜的转移。

【使用建议】

1. 室温解冻4×SDS-PAGE双色蛋白上样缓冲液。

2. 请按每30μl蛋白样品加入10μl上样缓冲液的比例(4倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高，可用双蒸水稀释。

3. 混匀后，100℃水浴加热5-10分钟，使蛋白变性。

4. 冷却至室温后，10000-14000rpm离心2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。

【注意事项】

1.     DTT对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。

2.     为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3.     聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右， 胶浓度为12%时，约在20kd左右，胶浓度为15%时，大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。

4.     蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝、吡罗红指示剂，PH值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液可能会呈现深棕色，不影响产品使用。

5.     一般而言，吡罗红的迁移速度快于溴酚蓝。在较高百分比的SDS聚丙烯酰胺凝胶（例如15%）中，吡罗红染料的迁移速度比溴酚蓝慢。

本网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗，仅可用于科研等非医疗目的。

2×SDS-PAGE双色蛋白Loading buffer（DTT）,常用生化试剂

发表于由

2×SDS-PAGE双色蛋白Loading buffer（DTT）品牌：JinPan | 货号：JP-8152-1ml

2×SDS-PAGE双色蛋白上样缓冲液（DTT）使用说明书

【包装规格】

产品编号

产品名称

包装

JP-8152

SDS-PAGE Dual Color Protein Loading Buffer,2×(with DTT)

1ml/10ml/100ml

 

使用说明书

1份

【保存条件】

建议分装冻存，避免反复冻融，-20℃，有效期1年

【概述】

2×SDS-PAGE双色蛋白上样缓冲液可保护蛋白质在样品制备步骤中免受热降解，并在SDS-PAGE运行期间防止pH值变化。一些蛋白质对在Tris缓冲液中电泳期间温度波动引起的pH变化敏感，优化后的上样缓冲液组分可防止在SDS-PAGE电泳之前的样品加热过程中以及电泳过程中蛋白质降解。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异；SDS还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质结构，消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。

上样缓冲液包含两种跟踪染料：蓝色（溴酚蓝），用于跟踪电泳的进度；粉红色（pyronin Y），用于在Western印迹过程中监测蛋白质向膜的转移。

【使用建议】

1. 室温解冻2×SDS-PAGE双色蛋白上样缓冲液。

2. 请按每10μl蛋白样品加入10μl上样缓冲液的比例(两倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高，可用双蒸水稀释。

3. 混匀后，100℃水浴加热5-10分钟，使蛋白变性。

4. 冷却至室温后，10000-14000rpm离心2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。

【注意事项】

1.     DTT对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。

2.     为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3.     聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右， 胶浓度为12%时，约在20kd左右，胶浓度为15%时，大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。

4.     蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝、吡罗红指示剂，PH值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液可能会呈现深棕色，不影响产品使用。

5.     一般而言，吡罗红的迁移速度快于溴酚蓝。在较高百分比的SDS聚丙烯酰胺凝胶（例如15%）中，吡罗红染料的迁移速度比溴酚蓝慢。

本网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗，仅可用于科研等非医疗目的。