HiMedia 真菌培养基 Fungal

HiMedia 真菌培养基 Fungal

Himedia公司是微生物产品,寄生虫产品,免疫类产品,血清类和病毒学类产品的领先制造商。应用领域包括:临床,工业,科研和 高校实验室。

上海金畔生物代理HiMedia品牌培养基产品,欢迎访问HiMedia官网或者咨询我们获取更多相关HiMedia培养基产品信息。

Microbiology > Dehydrated Culture Media > Diagnostic > Animal based Media > Fungal

HiMedia 真菌培养基 Fungal

M563 Caffeic Acid Ferric Citrate Test Agar (CAFC Medium)
M1602 Candida Agar
M355 Candida BCG Agar Base
M113 Chlamydospore Agar
M1814 Cryptococcus Differential Agar
M1504 M-BCG Yeast and Mould Agar
M596 MP-5 Medium
M597 MP-7 Medium
M520 Pikovskaya’s Agar
M1331 SCHWARZ Differential Medium
M1055 TOC Agar
M1061 Yeast Phosphate Agar

Himedia 食品加工业培养基 Osmophilic Microorganisms

Himedia 食品加工业培养基 Osmophilic Microorganisms

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Food Microbiology is the detection and analysis of food borne spoilage microorganisms. This field covers, the study of micro-organisms involved in the food; how they can be identified and cultured, how they live, how some of them infect and cause disease and how their activities can be brought in use. It is a very broad section, encompassing the study of microorganisms which have both beneficial and deleterious effects on the quality and safety of raw and processed foods. The primary tool of microbiologists is the ability to identify and quantify the food-borne microorganisms; however the inherent inaccuracies in enumeration processes and the natural variation found in all bacterial populations complicate the microbiologist’s job. HiMedia serve the needs of food processing Industries, by offering a broad range of Culture Medias for the detection of microbes and their activity.

食品微生物学是对食源性腐败微生物的检测和分析。这个领域包括食品中的微生物的研究,如何识别和培养它们,它们是如何生存的,它们中的一些是如何感染和引起疾病的,以及它们的活动是如何发挥作用的。这是一个非常广泛的部分,包括微生物的研究,这些微生物对生食品和加工食品的质量和安全都有利和有害的影响。微生物学家的主要工具是识别和量化食物传播的微生物的能力;然而,计数过程中固有的不准确和在所有细菌种群中发现的自然变异使微生物学家的工作复杂化。HiMedia通过提供广泛的培养媒介来检测微生物及其活动,从而满足食品加工业的需要。

1.Indicator Microbes & Pathogen

2.Microbes in Processing & Spoilage

3.Preparatory Media

1.Indicator Microbes & Pathogen

2.Microbes in Processing & Spoilage

Food > Microbes in Processing & Spoilage > Osmophilic Microorganisms

EC096CCL HiEncap™ Potato Dextrose Agar
EC096D HiEncap™ Potato Dextrose Agar
GM013 Fluid Sabouraud Medium  (Sabouraud Medium, Fluid)
GM096 Potato Dextrose Agar
M013 Fluid Sabouraud Medium (Sabouraud Medium,Fluid)
M096 Potato Dextrose Agar
M096B Potato Dextrose Agar
M1168 MY 40G Agar (Osmophilic Glucose Agar)
M594 MY 40 Agar (Osmophilic Agar)
M937 Potato Dextrose Agar  w/ 3% Agar (Complies as per ISO 17025:2005)
MCD013 Sabouraud HiCynth™ Medium, Fluid (Fluid Sabouraud HiCynth™ Medium)
MCD096 Potato Dextrose HiCynth™ Agar
ME096 Potato Dextrose Agar
MP096 Potato Dextrose Agar Plate
MPH096 Potato Dextrose Agar Plate
MU096 Potato Dextrose Agar
MV013 Fluid Sabouraud HiVeg™ Medium
SM096D Potato Dextrose Agar

3.Preparatory Media

LQ158 Soyabean Casein Digest Medium
w/ Tween 80 and Lecithin
LQ165 Phosphate Buffer pH 7.2
LQ199C Sterile Saline, 0.9%
LQ510C Diluting Fluid D
LQ510L Diluting Fluid D

HIMEDIA M1811-500G OFPBL agar Basee

HIMEDIA M1811-500G OFPBL agar Basee

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OFPBL agar Basee (Oxidation Fermentation Polymyxin Bacitracin Lactose Agar Base)

货号:M1811-500G

品牌:HIMEDIA

产品系列:干粉培养基

包装:500克

其他相关产品

叶酸酪蛋白培养基

货号:M543

品牌:Himedia

产品系列:干粉培养基

包装:1瓶

保存条件:2-8℃

产地:印度

产品详情

叶酸酪蛋白培养基

用途:

叶酸酪蛋白培养基用于血清中叶酸的微生物测定,测试微生物为干酪乳杆菌Lactobacillus casei ATCC 7469

成分列表:

成分                                                       g/L

不含维生素的酪蛋白酸水解物           10.000

葡萄糖                                                   40.000

醋酸钠                                                   40.000

磷酸氢二钾                                           1.000

磷酸一钾                                               1.000

DL-色氨酸                                             0.200

L-天冬酰胺                                            0.600

L-胱氨酸盐酸盐                                    0.500

腺嘌呤硫酸盐                                       0.010

盐酸鸟嘌呤                                           0.010

尿嘧啶                                                   0.010

黄嘌呤                                                   0.020

脱水山梨糖醇单油酸酯络合物           0.100

还原型谷胱甘肽                                   0.005

硫酸镁                                                   0.400

氯化钠                                                   0.020

硫酸亚铁                                               0.020

硫酸锰                                                   0.015

核黄素(维生素B2                          0.001

对氨基苯甲酸(PABA                    0.002

盐酸吡哆醇                                           0.004

盐酸硫胺素                                           0.0004

泛酸钙                                                   0.0008

烟酸                                                       0.0008

生物素                                                   0.00002

最终pH25℃)                                  6.7±0.1

HiMedia M638-500G V8 Juice Agar V8果汁琼脂

HiMedia M638-500G V8 Juice Agar V8果汁琼脂

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Himedia公司成立于1973年,最初作为小的地区的培养基准备产品的制造商。28年来,HImedia 已经发展成为拥有多条产品线和为实验室提供全方面服务的供应商。 Himedia的产品目录包括微生物鉴别系统,质量控制生物,染色剂,试剂,干燥培养基,培养基准备,诊断测试试剂盒(EIA测试试剂盒,载物凝集试剂盒)等。Himedia 还可以提供定制服务和多种包装规格。

货号:M638

英文名称:V8 Juice Agar
Packings :M638-500G
Description
for cultivation of yeasts and moulds.

 

Himedia Hiveg 植物源培养基

Himedia Hiveg 植物源培养基

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Himedia 作为全球少数高科技专有技术微生物培养基生产商之一,已经利用专利技术和专有技术开发和引进超过3000多种微生物产品。Himedia的产品遍布全球,与国际有名公司的产品相比具有很好的竞争性。

Himedia Hiveg 植物源培养基

HiMedia is one of the leading manufacturers of Peptones, Animal based Protein Hydrolysates as well as Vegetable Origin in India. HiMedia, leverages its in-house resources and raw material manufacturing plant to deliver high quality peptones and other culture media products.

HiMedia是印度Peptones、动物蛋白水解物以及蔬菜原产的领先制造商之一。HiMedia,利用其内部资源和原材料制造厂提供高质量的辣椒和其他文化媒体产品。

RM635V HiVeg™ Peptone No. 1
RM020V HiVeg™ Peptone No. 2
RM006V HiVeg™ Mycological Peptone
RM001V HiVeg™ Peptone
RM6392V HiVeg™ Peptone B
RM6407V HiVeg™ Peptone C
RM9150 HiVeg™ Peptone F
RM005V HiVeg™ Peptone No. 3
RM021V HiVeg™ Peptone No. 5
RM015V HiVeg™ Special Peptone
RM6394V Proteose Peptone A, HiVeg™

相关产品:

Equivalent Bacteriological ingredients of Plant origin(HiVeg™)
细菌培养基

HiVeg™ Extract RM002V-500G 500gm
HiVeg™ Special Infusion RM188V-500G 500gm
HiVeg™ Acid Hydrolysate RM013V-500G 500gm
HiVeg™ Hydrolysate RM014V-500G 500gm
HiVeg™ Infusion RM191V-500G 500gm
HiVeg™ Pea Hydrolysate RM9149-500G 500gm
HiVeg™ Peptone F RM9150-500G 500gm
HiVeg™ Hydrolysate C RM6408V-500G 500gm
HiVeg™ Peptone C RM6407V-500G 500gm
HiVeg™ Extract RM326V-500G 500gm
HiVeg™ Infusion RM022V-500G 500gm
HiVeg™ Peptone RM635V-500G 500gm
HiVeg™ Peptone Special RM015V-500G 500gm
Proteose Peptone A, HiVegTM RM6394V-500G 500gm
HiVegTM Peptone B RM6392V-500G 500gm
HiVeg™ Special Peptone RM015V-500G 500gm

Dehydrated Culture Media and Bases 干燥培养基

A-1 HiVeg™ Broth MV874-500G 500gm
AATCC Bacteriostasis HiVeg™ Agar MV231-500G 500gm
AATCC Bacteriostasis HiVeg™ Broth MV221-500G 500gm
AC HiVeg™ Agar MV337-500G 500gm
AC HiVeg™ Broth MV875-500G 500gm
APT HiVeg™ Agar MV226-500G 500gm
APT HiVeg™ Broth MV227-500G 500gm
Acetate HiVeg™ Agar MV1225-500G 500gm
Acid HiVeg™ Broth MV1208-500G 500gm
Actinomyces HiVeg™ Broth MV233-500G 500gm
Aeromonas Isolation HiVeg™ Medium Base MV884-500G 500gm
Anaerobic HiVeg™ Agar MV228-500G 500gm
Anaerobic HiVeg™ Agar Base MV902-500G 500gm
Andrade HiVeg™ Peptone Water MV885-500G 500gm
Andrade Peptone Water w/ HiVeg™ Extract No. 1 MV909-500G 500gm
Antibiotic HiVeg™ Assay Medium MV003-100G 100gm
MV003-500G 500gm
MV004-500G 500gm
Antifungal Assay HiVeg™ Agar MV164-500G 500gm
Arginine Dihydrolase HiVeg™ Broth MV619-500G 500gm
Asparagine Gelatin Lactate HiVeg™ Media Base MV725-100G 100gm
Assay HiVeg™ Broth MV042-100Gž 100gm
MV042-500Gž 500gm
Azide Blood Agar Base, HiVeg™ MV158-500Gž 500gm
Azide Dextrose HiVeg™ Broth MV345-500Gž 500gm
B.A.G.G. HiVeg™ Broth Base MV220-500G 500gm
B.T.B. Lactose HiVeg™ Agar MV861-500G 500gm
B.T.B. Lactose HiVeg™ Agar, Modified (Lactose Blue HiVeg™ Agar) MV1081-500G 500gm
B.C. Motility Test HiVeg™ Medium MV906-500G 500gm
B.C.G. – Dextrose HiVeg™ Agar (Snyder Test HiVeg™ Agar) MV106-500G 500gm
B.G. Sulpha HiVeg™ Agar MV492-500G 500gm
BLE HiVeg™ Broth Base MV1578-500G 500gm
BPL HiVeg™ Agar MV1020-500G 500gm
B.Q.Vaccine HiVeg™ Medium MV462-500G 500gm
BYE HiVeg™ Agar MV470-500G 500gm
Bacillus Cereus HiVeg™ Agar Base MV833-100G 100gm
MV833-500G 500gm
Bacteroides HiVeg™ Agar Base (BBE) MV805-500G 500gm
Bordet Gengou HiVeg™ Agar Base MV175-500G 500gm
Bordet Gengou HiVeg™ Agar Base w/ 1.6% Agar MV175A-500G 500gm
Brain Heart Infusion Agar, HiVeg™ MV211-500G 500gm
Brain Heart Infusion Broth, HiVeg™ MV210-100G 100gm
MV210-500G 500gm
Brain Heart Infusion w/ PABA, HiVeg™ MV212-500Gž 500gm
Brilliant Green HiVeg™ Agar Base MV971-500Gž 500gm
Bromo Cresol Purple Azide HiVeg™ Broth MV1212-500Gž 500gm
Brucella HiVeg™ Agar Base FD008-5VL 5vl
FD008-5x5VL 5x5vl
Brucella HiVeg™ Broth Base MV348-100Gž 100gm
MV348-500Gž 500gm
Buffered Glucose HiVeg™ Broth (Glucose Phosphate HiVeg™ Broth) MV070-100Gž 100gm
MV070-500Gž 500gm
Buffered HiVeg™ Peptone Water w/ NaCl MV1275-500Gž 500gm
C. botulinum Isolation HiVeg™ Agar Base MV911-500Gž 500gm
CHO HiVeg™ Medium Base MV351-500Gž 500gm
CRAMP HiVeg™ Agar Base MV1243-100Gž 100gm
Campylobacter Enrichment HiVeg™ Broth Base (PrestonEnrichment HiVeg™ Broth Base) MV899-500Gž 500gm
Campylobacter Nitrate HiVeg™ Broth reduction. MV1240-500Gž 500gm
Candida BCG HiVeg™ Agar Base MV355-500Gž 500gm
Candida HiVeg™ Medium MV104-500Gž 500gm
Carbohydrate Consumption HiVeg™ Broth Base MV1264-500Gž 500gm
HiVeg™ Acid Hydrolysate RM013V-500Gž 500gm
HiVeg™, Hydrolysate RM014V-500Gž 500gm
HiVeg™ Hydrolysate No. 6 RM028V-500Gž 500gm
Casein Hydrolysate Yeast Extract HiVeg™ Broth (CAYE) MV910-500Gž 500gm
Casein Hydrolysate Yeast Extract Salts HiVeg™ Broth Base (CAYES) MV1238-500Gž 500gm
Casein Yeast Magnesium HiVeg™ Agar (NZYM HiVeg™ Agar) MV1248-500Gž 500gm
Casein Yeast Magnesium HiVeg™ Broth (NZYM HiVeg™ Broth) MV1247-500Gž 500gm
D.C.L.S. HiVeg™ Agar MV160-100G 100gm
MV160-500Gž 500gm
D.C.L.S. HiVeg™ Agar MV178-100Gž 100gm
MV178-500Gž 500gm
Decarboxylase HiVeg™ Agar Base MV501-500Gž 500gm
Dextrose HiVeg™ Peptone Agar MV649-500Gž 500gm
Dextrose HiVeg™ Peptone Broth MV650-500Gž 500gm
Dey-Engley Neutralizing HiVeg™ Broth MV1062-500Gž 500gm
Dey-Engley Neutralizing HiVeg™ Broth Base MV187-500Gž 500gm
Diagnostic Thioglycollate HiVeg™ Medium MV191-500Gž 500gm
Dichloran HiVeg™ Medium Base with Rose Bengal MV1000-500Gž 500gm
Differential Reinforced Clostridial HiVeg™ Broth Base MV549-100G 100gm
MV549-500Gž 500gm
Dihydrolase HiVeg™ Broth Base MV915-500Gž 500gm
Doyle’s Enrichment HiVeg™ Broth Base MV916-500Gž 500gm
Drigalski Litmus Lactose HiVeg™ Agar MV659-500Gž 500gm
EC HiVeg™ Broth MV127-100G 100gm
MV127-500Gž 500gm
EE HiVeg™ Broth MV287-100Gž 100gm
MV287-500Gž 500gm
EE HiVeg™ Broth MV287A-500Gž 500gm
*M16 HiVeg™ Agar MV600-500Gž 500gm
M17 HiVeg™ Agar Base

MV929-500Gž

500gm
MIO HiVeg™ Medium (Motility Indole Ornithine HiVeg™ Medium)

MV378-500Gž

500gm
MOF HiVeg™ Medium (Marine Oxidation Fermentation HiVeg™ Medium)

MV379-500Gž

500gm
MOX HiVeg™ Agar

MV1167-500Gž

500gm
MR-VP HiVeg™ Medium (Glucose Phosphate HiVeg™ Broth) (Buffered Glucose HiVeg™ Broth) MV070-100G 100gm
MV070-500Gž 500gm
McBride Listeria HiVeg™ Agar Base MV386-500G 500gm

FD070-5VL

5vl

Miller Luria Bertani HiVeg™ Broth MV1245-500Gž 500gm
Modified CPLM HiVeg™ Medium Base (Trichomonas Modified CPLM HiVeg Medium Base) MV460-500Gž 500gm
NZYM HiVeg™ Broth (Casein Yeast Magnesium HiVeg™ Broth) MV1247-500Gž 500gm
NZCYM HiVegTM Growth Medium media GV017-500Gž 500gm
Nickerson HiVeg™ Medium MV217-500Gž 500gm
Nitrate HiVeg™ Agar MV072-500Gž 500gm
Nystatin HiVeg™ Assay Broth (Antibiotic HiVeg™ Assay Medium No.13) MV254-500Gž 500gm
OF Basal HiVeg™ Medium MV395-100Gž 100gm
MV395-500Gž 500gm
Oak Wilt Fungus HiVeg™ Agar MV669-100Gž 100gm
Orange Serum HiVeg™ Agar MV933-500Gž 500gm
Orange Serum HiVeg™ Broth MV934-500Gž 500gm
PA HiVeg™ Broth MV1186-500Gž 500gm
PE-2 HiVeg™ Medium MV611-500Gž 500gm
PL HiVeg™ Agar MV1173-500Gž 500gm
PPLO HiVeg™ Agar Base MV266-100G 100gm
PPLO HiVeg™ Broth Base w/ CV MV268-500Gž 500gm
PPLO HiVeg™ Broth Base w/o CV MV267-500Gž 500gm
PSB HiVeg™ Broth Base MV941-500Gž 500gm
PSTA Enrichment HiVeg™ Broth Base MV940-100G 100gm
MV940-500Gž 500gm
Pantothenate Inoculum HiVeg™ Broth MV542-100Gž 100gm
Park and Sanders Enrichment HiVeg™ Broth Base recommended MV1185-500Gž 500gm
HiVeg™ Special Peptone RM015V-500Gž 500gm
HiVeg™ Peptone Water all purpose MV028-100G 100gm
MV028-500Gž 500gm
Peptone Yeast Extract Iron HiVeg™ Agar (ISP HiVeg™ Medium No. 6 ) MV361-100G 100gm
MV361-500Gž 500gm
Perfringens HiVeg™ Agar Base (O.P.S.P.) MV579-500Gž 500gm
Phenol Red Lactose HiVeg™ Agar MV270-100G 100gm
MV270-500Gž 500gm
MV571-500Gž 500gm
MV274-500Gž 500gm
Phenolphthalein Phosphate HiVeg™ Agar MV652-100G 100gm
MV652-500Gž 500gm
*Phenylethyl Alcohol HiVeg™ Agar Base MV269-100Gž 100gm
Photobacterium HiVeg™ Broth MV783-100Gž 100gm
Pike Streptococcal HiVeg™ Broth Base MV519-100G 100gm
MV519-500Gž 500gm
Plate Count HiVeg™ Agar (Standard Methods HiVeg™ Agar) MV091-100Gž 100gm
MV091-500Gž 500gm
Plate Count HiVeg™ Agar MV091A-100Gž 100gm
MV091A-500Gž 500gm
Plesiomonas Differential HiVeg™ Agar MV574-500Gž 500gm
Potassium Cyanide HiVeg™ Broth Base MV936-500Gž 500gm
Potato Infusion HiVeg™ Agar MV174-500Gž 500gm
Pre – Enrichment HiVeg™ Broth Base MV1178-500Gž 500gm
Preston HiVeg™ Agar Base recommended MV939-500G 500gm
FD042-5VL 5vl
FD042-5x5VL 5x5vl
PrestonEnrichment HiVeg™ Broth Base MV899-500G 500gm
FD042-5VL 5vl
FD042-5x5VL 5x5vl
Proteose HiVeg™ Agar MV1176-500Gž 500gm
Pseudomonas Isolation HiVeg™ Agar Base MV406-100G 100gm
MV406-500Gž 500gm
Purple HiVeg™ Agar Base MV098-500Gž 500gm
Purple HiVeg™ Broth Base MV284-500Gž 500gm

Phytopathological Media 植物病理学培养基

R-2AHiVeg™ Agar MV962-100Gž 100gm
MV962-500Gž 500gm
RS HiVeg™ Medium Base MV576-500Gž 500gm
Reddy’s Differential HiVeg™ Agar MV926-500Gž 500gm
Reinforced Clostridial HiVeg™ Agar MV154-100G 100gm
MV154-500Gž 500gm
Reinforced Clostridial HiVeg™ Broth MV443-100Gž 100gm
MV443-500Gž 500gm
Rippey-Cabelli HiVeg™ Agar Base MV859-100Gž 100gm
Russell Double Sugar HiVeg™ Agar (Double Sugar HiVeg™ Agar) MV057-500Gž 500gm
SCHWARZ Differential HiVeg™ Medium MV1331-500Gž 500gm
SF HiVeg™ Broth MV297-500Gž 500gm
S.F.P. HiVeg™ Agar Base MV1005-500Gž 500gm
SIM HiVeg™ Medium MV181-500Gž 500gm
*SPS HiVeg™ Agar MV632-500Gž 500gm
*SPS HiVeg™ Agar MV898-500Gž 500gm
*Sabouraud Chloramphenicol HiVeg™ Agar MV1067-500Gž 500gm
*Sabouraud Cycloheximide Chloramphenicol HiVeg™ Agar MV664-100Gž 100gm
Sabouraud Dextrose HiVeg™ Agar Base MV286-100G 100gm
Sabouraud Dextrose HiVeg™ Broth (Sabouraud Liquid HiVeg™ Medium) MV033-100G 100gm
MV033-500Gž 500gm
Sabouraud Dextrose Maltose HiVeg™ Agar MV1313-500Gž 500gm
Sabouraud Liquid HiVeg™ Medium Sabouraud Dextrose HiVeg Broth MV033-100G 100gm
MV033-500Gž 500gm
Sabouraud Maltose HiVeg™ Agar MV062-500Gž 500gm
Sabouraud Maltose HiVeg™ Broth MV064-500Gž 500gm
Salmonella HiVeg™ Agar, ONOZ MV573-500Gž 500gm
Salt Polymyxin HiVeg™ Broth Base MV821-500Gž 500gm
Schaedler HiVeg™ Agar MV291-500Gž 500gm
Schaedler HiVeg™ Broth MV292-500Gž 500gm
Seed HiVegTM Agar MV003-100Gž 100gm
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Himedia维生素B12测定培养基 Vitamin B12 Assay Medium

Himedia维生素B12测定培养基 Vitamin B12 Assay Medium

货号:M036-100G

品牌:HIMEDIA

产品系列:干粉培养基

包装:100克

保存条件:

有效期:

产地:印度

维生素B12测定用培养基

货号

品名

规格

储存条件

保质期

M036

Vitamin B12 Assay Medium

100G

8°C下密闭保存,理想是放置于干燥器中。

使用新鲜配置的培养基。干粉见标签有效期。

原理

乳酸杆菌生长需要特别的营养,因而在非选择性培养基上很难生长。维生素测定用培养基用于维生素的微生物法测定。该方法需要三种培养基:即维持培养基,用于保持菌种活力;接种培养基,用于测试菌液的制备;测定用培养基,用于待测维生素的定量。

维生素B12测定用培养基,不含维生素B12,但包含所有其他维生素和必要养分,用于莱士曼乳酸杆菌(ATCC 7830)的生长。莱士曼乳酸杆菌(ATCC 7830)作为测定用菌,最早由Capp等人描述(1)并被美国药典和美国分析化学家协会(AOAC)所推荐(2,3)。

用已知稀释度的维生素B12标准品,可以制备标准曲线(2,3)。

测试菌液的制备是将将活化后的菌株接种到乳酸杆菌肉汤培养基中,推荐在37°C 孵育24 小时,再离心、清洗、重悬于10 ml 生理盐水中,再通过浊度分析或酸度分析,确定生长反应。

  用维生素B12的浓度及对应的吸光度制作标准曲线。用标准曲线可确定待测样本中的维生素B12的浓度。

应非常小心地避免培养基和玻璃器具的污染。应使用洁净的无去污剂的玻璃器具。少量的外源物质的污染可能导致错误的结果。

用于接种的测定菌应在专用的培养基中培养。

应用

维生素B12测定用培养基推荐采用莱士曼氏乳酸杆菌(ATCC 7830)作为测定用菌,进行维生素B12的微生物法测定。

培养基组分

成分                                     克/升

无维生素酸水解酪蛋白                 15.000

葡萄糖                               40.000

天门冬酰胺                           0.200

醋酸钠                               20.000

抗坏血酸                             4.000

L-胱氨酸                             0.400

DL-色氨酸                            0.400

硫酸腺嘌呤                           0.020

尿嘧啶                               0.020

黄嘌呤                               0.020

核黄素(维生素B2)                   0.001

盐酸硫胺素                           0.001

生物素                               0.00001

烟酸                                 0.002

对氨基苯甲酸(PABA)                0.002

泛酸钙                               0.001

盐酸吡哆醇                           0.004

盐酸吡哆醛                           0.004

盐酸吡哆胺                           0.0008

叶酸                                 0.0002

磷酸二氢钾                           1.000

磷酸氢二钾                           1.000

硫酸镁                               0.400

氯化钠                               0.020

硫酸亚铁                             0.020

硫酸锰                               0.020

聚山梨酯80                           2.000

盐酸鸟嘌呤                           0.020

最终pH值 (25°C)                     6.1±0.2

质量控制

Ø外观——奶油色至黄色,具均匀性,倾向形成可容易分解成粉末状的软块

Ø制备好的培养基颜色和透明度——淡琥珀色透明溶液,可能有轻微沉淀

Ø配比浓度——在25°C下8.5%w/v(8.5g/100ml水)水溶液,pH值为6.1±0.2

ØpH值——5.90-6.30

配置

称取8.45g干粉培养基溶于100ml蒸馏水,必要时加热使培养基完全溶解。混匀,使轻微的沉淀均匀分布。测定时,分装试管,每管为5ml培养基(包含标准品和待测样品)。加蒸馏水,使总体积达到10ml。高压消毒15磅121°C 5分钟。立即冷却培养基。每个试管(10 ml)的维生素B12水平为0、0.025、0.05、0.075、0.1、0.125、0.15、0.2 ng时,均可获得满意结果。

培养反应

进行微生物法测定维生素B12。采用莱士曼氏乳酸杆菌(ATCC 7830),35-37°C孵育18-24小时。

生长状况

随着测定管标准品水平升高,(美国药典维生素B12标准水平,0,0.025,0.050,0.075,0.1,0.125,0.150,0.2ng),目标菌生长逐渐递增,伴随着620nm处吸光度的增加。

文献

1.  Capps B. E., Hobbs M. H. H. and Fox S. H., 1949, J. Biol. Chem., 178:517.

2. The United States Pharmacopoeia, 2006, USP29/NF24, The United States Pharmacopeial Convention, Rockville, MD.

3.  H. Williams, (Ed.), 2005, Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemists, 19th Ed., AOAC,Washington, D.C

微生物法测定维生素的方法学评估

在我国,微生物法测定食品中的维生素B12、叶酸、泛酸、烟酸、生物素是首选方法,因此在国民生计中起到重要作用。本文拟以维生素B12为例,从方法学的角度就微生物法的特点,作一文献上的综述。

1954年,微生物法测定乳品中的维生素B12首次出现,是由英国国立奶业研究所、维生素B12的研究专家Margaret E. Gregory首先建立,她用该法测定来自不同动物种属的奶中的维生素B12的含量(1)。

微生物法测定乳品和食品中的维生素B12,在上世纪90年代引入我国。关于这一方法,已有多篇报道进行了方法学上的探讨。现总结如下:

(一)对微生物法的评估

上海市食品药品检验所蒋孟虹等人用微生物法测定了肠内营养粉剂中的维生素B12 含量。她们认为,高效液相色谱法仅适用于常量分析,维生素B12对色谱前处理要求高, 因此色谱很难满足痕量测定的要求。但微生物法操作步骤较多, 一些因素可能影响测定结果的准确性。因此,她们对影响因素进行了研究,结果发现:

Ø测试菌液的透光率在60%~80%之间时, 标准曲线的线性拟合较好,过高过低均导致线性拟合差。

Ø当测试菌液的加入量为50μL时, 标准曲线线性拟合良好。过多易导致浊度过高而不成梯度。

Ø标准曲线最高浓度点的透光率在30%左右为佳测定时间, 此时各浓度点的透光率差别较大, 可拉开梯度。

Ø维生素B12 在0.001~0.010 ng/mL 浓度范围内线性关系良好。

她们认为,微生物法检出限低、灵敏度高,测定结果准确可靠, 适用于微量维生素B12的含量测定, 值得经常进行维生素检测的实验室应用推广(2)。

国家乳制品质量监督检验中心的张玉杰等人提出:微生物法的好处是,测定的是维生素的生物活性含量,更具生物学意义。同时,微生物作为一种活试剂,具有自身的特异性和高度的灵敏性,使得测定结果更为准确。微生物分析法测定VB12在国际上已有几十年的历史,只是在我国报导还不是很多。

他们采用微生物法对12个奶基婴幼儿食品的VB12含量进行了多次重复测定,发现相对误差均在10%以内,50%的样品测定的误差小于5%,回收率多在90-110%之间。因而该方法是可行的,结果也是准确可靠的(3)。

广东产品质量监督检验研究院林耀文等人发现,微生物法测定含乳饮料中的维生素B12,重复性良好,线性相关系数大于0.99,平均回收率为91.20%~102.2%,检出限为0.04ng/ml,具有简便、快速、灵敏度高、检出限低等优点。(5)

(二)微生物法的干扰因素和注意事项

国家乳制品质量监督检验中心的张玉杰等人提出了几点注意事项:

第一,有些细菌可以产生Vb12,因此所有玻璃器皿及用具都要严格清洗,严格灭菌。清洗后放入250℃烘箱,加热1-2小时。整个分析过程都要注意防止溶液过多地暴露于光线中。

第二,建议每个梯度标准溶液设三个平行检验管,减少误差。所有检验管灭菌后要迅速水冷却,尽量避免颜色形成。冷却速度要一样。

第三,测定菌体浓度时,要等检验管内发育和繁殖过程完全停止后再进行。(3)

湖北省宜昌市产品质量监督检验所陈绪华等人观察了测定培养基的不同品牌对维生素B12线性的影响。发现青岛海博和北京陆桥的维生素B12测定培养基作出的线性结果不理想,主要是培养基所含的本底较高。而更换为BD的测定培养基后,所得的线性结果较理想。本底存在,会导致目标物质的促生长作用减弱(即吸光度没有等量增加)。当测定培养基中不含本底时,菌悬液以及培养时间的微弱变化只影响标准曲线的生长量,不影响曲线的线性。(4)

据我们了解,目前BD的维生素B12测定培养基已停产,因此可选用国际知名的微生物生产商HiMedia的产品。

上海市质量监督检验技术研究院王志伟等人强调,菌种的活力和纯度对实验结果有非常大的影响,应严格按照要求进行菌种纯化(7)。

(三)对标准微生物法的改进

广州市质量监督检测研究院吴环等人提出了几个更简便的操作技巧用于维生素B12的测定:一是试验体系的体积缩小。用1.2mlPP小管替代了传统的试管进行标准曲线溶液及样品溶液的培养和测定;标准曲线溶液和样品溶液的制备也在1.2mlPP小管中进行,由此避免了大量玻璃器皿的使用,同时显著降低了外部干扰;二是将试验菌株预先固定在96排管,利用甘油保护冷冻的菌种。具体操作为:将莱士曼氏乳酸杆菌冻干菌株活化后,接种到乳酸杆菌肉汤培养基,(36.0±1.0)℃培养18~24h,将增菌肉汤培养物3000r/min离心数次,弃去上清液,使用含有甘油的维生素B12测定培养基进行适宜的稀释后,将菌悬液加入1.2mlPP小管中,-80℃冻存备用。该方法极大地缩短了试验周期,而且菌株活力稳定,保证了试验的有效性。(6)

吴环等人进一步将该方法推广到婴幼儿配方乳粉中的其他3种水溶性维生素(叶酸、生物素、肌醇)的测定,结果同样有效。(8)

上海市质量监督检验技术研究院王志伟等人对于天然燕麦的维生素B12的测定,加入了1%的 α-淀粉酶溶液,发现酶解溶液有助于提取维生素B12,降低样品粘度,更方便测量,因此优于现有的标准方法。

以上探讨虽然大部分是针对维生素B12,但对于采用微生物法测定的其他水溶性维生素如叶酸等也同样有效,可以借鉴。

参考文献:

1) Margaret E. Gregory. The Microbiological Assay of ‘Vitamin B12’in the Milk of Different Animal Species.British Journal of Nutrition, 1954,8(04): 340

2)蒋孟虹、许苹等. 微生物法测定肠内营养粉剂中微量维生素B12 的含量.食品安全质量检测学报. 2016,7(3):893-897

3)张玉杰、吕为群.奶基婴幼儿食品中维生素B12活性测定微生物分析法.生物技术,1993(6):39-43

4)陈绪华、刘健、江一飞. 不同测定培养基对维生素B12线性的影响. 生物技术世界. 2013(4):47

5)林耀文、佘之蕴,李姣等.微生物法测定含乳饮料中维生素B12含量. 饮料工业.2013,16(4):39-42

6)吴环、刘冬虹、张慧、聂炎炎、黄宇峰.微生物法快速检测食品中维生素B12含量的应用研究.中国乳业.2014,(4):42-44

7)王志伟、徐琼、陈欣钦、曲勤凤. 天然燕麦中维生素B12的测定中2种微生物法前处理方式的比较.食品安全质量检测学报, 2017,8(1):275-279

8)刘冬虹,吴环,聂炎炎,黄宇锋. 优化微生物法快速测定婴幼儿配方乳粉中4种水溶性维生素.华南预防医学,2014(6):594-597

维生素测定原理及注意事项

维生素是维持机体不可缺少的一类营养,虽然需要量小,但十分重要,一旦缺乏,会引发相应的维生素缺乏疾病。婴幼儿食品和乳品中含有天然的维生素,有的也有人工添加。在食品外包装上,会要求印有该食品含有哪些营养素及其含量多少(1)。我国的国家食品安全标准中,对婴幼儿食品和乳品中的维生素含量也有规定,如每 100 千卡的食品中的叶酸含量最少为 10.5 μg,最多不超过 50.2 μg(2)。之所以限定维生素的最高量,是因为维生素摄入过多,也会引发一些问题。

那么,如何来测定这些维生素的含量呢?根据国家出台的标准,不少维生素含量是采用色谱的方法来测定。有五种维生素是采用微生物法。它们是叶酸、维生素 b12、烟酸、泛酸和生物素。本文重点讲述前两种。以叶酸为例,微生物法的原理是,根据细菌对叶酸的营养需求,在一系列不含叶酸的培养基中从低到高添加已知含量的叶酸以及待测的食品样品,在 37°C 孵育 18 小时。因为有了叶酸,细菌能生长得很好,培养液发生浑浊。细菌越多,培养基就越浑浊,吸光度就越高。通过已知含量的叶酸样品的吸光度,以及待测样品的吸光度,就能确定待测样品中的叶酸含量。

测定所用的菌株均有规定。叶酸为鼠李糖乳杆菌,又称作干酪乳杆菌鼠李糖亚种(ATCC 7469)(3),维生素 b12 为莱士曼氏乳酸杆菌(ATCC 7830)(4),均可从 ATCC 等菌种库购买。维生素测定所用的培养基可以自己配,也可以购买商品化的培养基,其来源好是经过国际认证的微生物培养基生产厂家,如 HiMedia Laboratories 公司,这样质量较为可靠,其培养基组成也符合食品中叶酸和维生素 B12 测定的食品安全国家标准。

在测定中有两个非常重要的注意事项:一是由于灭菌条件,孵育温度等因素会影响标准曲线读数,并且每次该不会完全一样,因此每次测定时都应同时制备标准曲线。二、应小心避免培养基和玻璃器具遭受污染。杂菌生长会导致实验失败。同时应使用洁净的无去污剂的玻璃器具。因为任何少量的外源物质都可能导致测定结果的偏离。

测定前还需要进行菌株的培养和接种菌液的制备。接种菌液来自于储备菌种。但保存数周以上的储备菌种,不能立即用作接种液制备,实验前宜连续传种 2-3 代以保证细菌活力。所用培养基也都有商品化的可选。

总之,微生物法测定微生物 B12 和叶酸等维生素灵敏度高,但也需要注意避免测定中可能产生的一些问题,这样才能最终把实验做好。

注释:
(1)GB 13432—2013《食品安全国家标准 预包装特殊膳食用食品标签》
(2)GB10765—2010《食品安全国家标准 婴儿配方食品》
(3)GB 5009 211-2014《食品安全国家标准 食品中叶酸的测定》
(4)GB 5413 14-2010《食品安全国家标准_婴幼儿食品和乳品中维生素 B12 的测定》