产品编号
JJP60
Human IL-11 ELISA Kit
96次
2798
的HumanIL-11ELISA Kit (HumanIL-11Enzyme-Linked ImmunoSorbent AssayKit),即人白细胞介素-11酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-11的ELISA试剂盒。
? 本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。多次重复检测结果表明,最小检出量为28.4pg/ml,与人的Cardiotrophin-1、CNTF、G-CSF、IL-6、LIF、Leptin、OSM没有交叉反应,板内、板间变异系数均小于10%。
白细胞介素-11 (Interleukin 11, IL-11)是一种由造血微环境基质细胞和部分间叶细胞产生的多功能细胞因子,最初是由IL-1刺激骨髓基质细胞系产生的一个因子而被发现,该因子对IL-6响应的小鼠浆细胞瘤细胞系有促有丝分裂作用。人IL-11的cDNA编码199个氨基酸的前体蛋白,该蛋白包含一个22个氨基酸的疏水信号肽。成熟的IL-11有178个氨基酸构成,没有半胱氨酸残基或潜在的糖基化位点。人的IL-11和小鼠的IL-11有88%的同源性。IL-11通过一种特定的受体IL-11r发挥生物活性,该受体通过gp130发出信号,gp130是IL-6、LIF、OSM和CNTF的信号亚单位。IL-11单独与IL-11r蛋白结合,亲和力低;当IL-11r与gp130结合时,亲和力较高。
人的IL-11可与IL-3、IL -4、IL -7、IL -12、IL -13、SCF、Flt-3配基及GM-CSF协同作用,促进造血干细胞的增殖。IL-11与IL-3、SCF和促血小板生成素协同作用可促进血小板和巨核细胞的生成。IL-11可促进红细胞生成、骨骼细胞的生长、淋巴细胞的增殖,甚至还能调节造血微环境。肺泡和支气管上皮细胞在炎性细胞因子的刺激下可产生IL-11。IL-11可刺激破骨细胞的生长,刺激急性反性时相应产物的生长,同时IL-11可抑制脂肪的生成。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人IL-11的浓度,其原理见图1。人IL-11特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标准品或样品时,其中的人IL-11会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人IL-11抗体后,生物素化抗人IL-11抗体与人IL-11结合,形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin(HRP-Streptavidin),由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合,因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液,固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人IL-11浓度与A450值呈正比,通过绘制标准曲线,对照样品吸光度值,即可计算出样品中靶蛋白浓度。
图1.双抗体夹心ELISA原理图。
一个包装的本试剂盒,包括标准品检测,可以进行96次检测。
包装清单:
产品编号
产品名称
包装
JJP60-1
人IL-11抗体预包被板
8孔×12条
JJP60-2
样品分析缓冲液
5ml
JJP60-3
标准品稀释液
10ml
JJP60-4
人IL-11标准品
2-4瓶
JJP60-5
人IL-11生物素化抗体
10ml
JJP60-6
辣根过氧化物酶标记Streptavidin
10ml
JJP60-7
洗涤液(20X)
30ml
JJP60-8
TMB溶液
10ml
JJP60-9
终止液
5ml
JJP60-10
封板膜(透明)
2张
JJP60-11
封板膜(白色)
2张
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说明书
1份
保存条件:
标准品4℃保存,1-2周内有效,-20℃保存6个月内有效,试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外,试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项:
由于标准品一般是冻干粉,在制备后需要严格校准,所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶,如果发现有结晶,请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性,标准品配制使用后,如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属,否则容易失效。
加样时,请注意每个样品或标准品必须更换枪头,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试,所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分,即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时,请独立使用各个试剂盒中的试剂,请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要,在加液后请轻轻晃动整个96孔板,以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行,要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要,洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔,以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。