属性
生物来源
mouse
质量水平
100
300
抗体形式
purified immunoglobulin
antibody product type
primary antibodies
克隆
81 (mAB O4), monoclonal
species reactivity
rat, mouse, human, chicken
manufacturer/tradename
Chemicon
technique(s)
immunocytochemistry: suitable
immunohistochemistry: suitable
同位素/亚型
IgM
适用性
not suitable for Western blot
not suitable for immunoprecipitation
运输
wet ice
说明
特异性
识别少突胶质细胞标志物O4。也可与精子中的某些半乳糖脂反应(列表请参见其他信息库)。
应用
免疫组化:在未固定速冻切片上10-20μg/ml。
免疫细胞化学:在用4%多聚甲醛固定的细胞上10-20 μg/mL。
注意:O4是一种硫化物,可被有机溶剂溶出薄膜;丙酮和甲醇不能用于固定。
最佳工作稀释度必须由最终用户进行确定。
免疫组织化学方案
1.用未固定速冻组织制备切片。切片厚度应为4-5 μm。将切片放在显微镜载玻片上。
2.室温下在PBST中洗涤载玻片3次,每次5分钟。
3.阻断非特异性结合位点,将切片置于含5% FCS的潮湿室内室温孵育30分钟。
4.按第2步所述方法洗涤载玻片。
5.用足够量的MAB345 (10-20 μg/mL,PBS)覆盖切片,并在37°C的潮湿箱中孵育1小时。
6.用PBS快速洗涤载玻片3次。仔细干燥要染色的区域。
7.用足够量的抗小鼠IgM-荧光素*溶液覆盖切片,并在37°C的潮湿箱中孵育1小时。
8.按第6步所述方法洗涤载玻片。
9.用合适的包埋介质覆盖切片,盖上盖片,用荧光显微镜检查。
*也可以使用HRP或ABC。
通过滴定一级和二级抗体可获得最佳结果。
免疫细胞化学
1.用4%多聚甲醛(PBS中)在室温下固定制剂10分钟。O4是一种硫化物,可被有机溶剂溶出薄膜;丙酮和甲醇不能用于固定。
2.室温下在PBST中洗涤载玻片3次,每次5分钟。
3.阻断非特异性结合位点,将切片置于含5% FCS的潮湿室内室温孵育30分钟。
4.按第2步所述方法洗涤载玻片。
5.用足够量的MAB345 (10-20 μg/mL,PBS)覆盖切片,并在37°C的潮湿箱中孵育1小时。
6.用PBS快速洗涤载玻片3次。仔细干燥要染色的区域。
7.用足够量的抗小鼠IgM-荧光素*溶液覆盖切片,并在37°C的潮湿箱中孵育1小时。
8.按第6步所述方法洗涤载玻片。
9.用合适的包埋介质覆盖切片,盖上盖玻片,用荧光显微镜检查。
注意:在染色过程中,请勿使制剂干燥。
抗O4抗体,克隆81是一种抗O4的抗体,可用于IC、IH,已有超过50次产品引用。
外形
Ammonium Sulfate Precipitation
形式:纯化
纯化的免疫球蛋白置于0.05M磷酸钾缓冲液中,pH 8.0,加入0.3M NaCl和0.05%叠氮化钠。
分析说明
对照
大鼠皮质干细胞或小鼠胚胎脑3天细胞培养