产品编号
JJP73
Progesterone ELISA Kit
96次
3198
的Progesterone ELISA Kit (Progesterone Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即孕酮酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测所有哺乳动物血清、血浆或细胞培养上清液中的孕酮的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为0.01ng/ml，与11-脱氧皮质酮、孕烯醇酮、17-α-羟基孕酮、肾上腺酮分别具有1.1%、0.35%、0.3%和0.2%的交叉反应性，与雌二醇、雌三醇等其他类似固醇类小分子化合物交叉反应性也小于0.1%或0.02%。
孕酮(Progesterone)，又称黄体酮、孕甾酮、黄体甾酮、黄体激素等，是一种类固醇孕激素，是维持雌性哺乳动物正常生殖功能必不可少的激素之一，主要由黄体产生分泌。孕酮能够作用于多种组织和器官，例如脑、乳房、子宫、卵巢以及宫颈。孕酮在体内具有复杂的生理作用，作用于同一组织的不同细胞也会产生不同的效应，在生理和病理条件下，孕酮的作用也截然不同。例如，在乳腺癌和子宫平滑肌瘤中，孕酮能促进肿瘤的发展和恶化。然而在子宫内膜癌中，孕酮则展现出了一定的抑癌作用。造成这种现象的具体原因目前尚不清楚，有一种可能是由于不同组织特殊环境中的某些特定因子、受体表达以及旁分泌和自分泌过程影响了孕酮的作用效果。
孕酮主要在孕酮受体(Progesterone Receptor, PR)的参与下发挥作用，与雌激素受体一样，孕酮受体也被认为是一种核转录因子，通过激活启动子区域的孕酮响应元件(Progesterone?Response?Element,?PRE)实现对靶基因转录的调控。孕酮受体还能与SP1、AP1、FOXO1和NF-κB的JP5亚基等其他转录因子相互作用，调节转录活性。孕酮受体主要存在两种亚基，PR-A和PR-B，其中PR-A不仅能够产生和PR-B相反的调控效果，还能影响孕酮及糖皮质激素受体作用。例如PR-A能够抑制雌激素升高体内维生素D的活性，从而抑制雌激素对骨密度的调节。
除了参与调节基因转录外，孕酮还能够激活一系列信号通路，例如cAMP/PKA、MAPK和PI3K/Akt，通过对这些信号通路的影响，从而发挥其神经保护功能。
本试剂盒采用竞争法ELISA (Competitive?ELISA)检测样品中孕酮的浓度，其原理见图1。高特异性识别孕酮的抗体已预包被于酶标板上，同时加入样品和辣根过氧化物酶标记孕酮，样品中的孕酮与辣根过氧化物酶标记孕酮竞争性结合酶标板中包被的抗体，随后洗去游离的孕酮与游离的辣根过氧化物酶标记孕酮。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的TMB氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。如果样本中孕酮含量越多，则与抗体结合的辣根过氧化物酶标记孕酮就越少，颜色越浅，即颜色与样品中的浓度成反比。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。孕酮浓度与A450值呈反比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中孕酮浓度。
图1. 竞争法ELISA原理图。
一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：
产品编号
产品名称
包装
JJP73-1
Progesterone抗体预包被板
8孔×12条
JJP73-2
Progesterone标准品
2管
JJP73-3
样品稀释液
16ml
JJP73-4
辣根过氧化物酶标记Progesterone
2-4瓶
JJP73-5
洗涤液(20X)
30ml
JJP73-6
TMB溶液
10ml
JJP73-7
终止液
5ml
JJP73-8
封板膜(透明)
2张
JJP73-9
封板膜(白色)
2张
–
说明书
1份
保存条件：
辣根过氧化物酶标记Progesterone 4oC保存，1-2周内有效，-20oC保存6个月内有效；试剂盒其它组分4oC保存6个月内有效。除辣根过氧化物酶标记Progesterone外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于辣根过氧化物酶标记Progesterone一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以具体瓶数请以实际收到的试剂盒为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证辣根过氧化物酶标记Progesterone的精确性，辣根过氧化物酶标记Progesterone复溶后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。