Wako 011-20171 Azoxymethane 氧化偶氮甲烷–肠癌模型动物诱导剂
背景描述：
对于生命医学研究中，为了研究疾病的发病机理、环境刺激下疾病的发展过程，药物治疗追踪，或术后复发可能性示踪。或为了从庞大的化合物或单克隆抗体库中筛选到有潜力的治疗药物；或者对新疗法的疗效和风险评估。都离不开相应疾病动物模型的建立，所有研究都必须有动物模拟病症下大量可行数据的支撑，才能往下进行临床实验。
让我们开启动物造模的篇章，寻找适合你的”点“。
结肠癌造模诱导剂（Wako/Sigma）
偶氮甲烷（Azoxymethane，AOM）
基本描述：
偶氮甲烷（氧化偶氮甲烷），英文Azoxymethane，缩写AOM，可有效诱导大小鼠结肠癌，广泛用作一种基质引起实验动物发生结肠肿瘤，从而研究癌症预防物和癌症形成机制。另外，越来越多结肠癌病例的发生，使得癌症预防物的研究也越来越流行。按照每周一次皮下注射AOM（15mg/kg体重）进入大鼠体内，连续3周给药。数周后能观察到癌前期病变。
作用机制：偶氮甲烷（AOM）能诱导DNA产生O6-甲基鸟嘌加合物，导致G→A转化。
主要应用：偶氮甲烷（AOM）常联合DSS（Mw：36000-50000 Da）注射动物，建立结肠癌模型，用来研究癌症发展机制和化学预防。
基本特征：
1） CAS NO. 25843-45-2
2） 线性分子式：CH3N=N(→O)CH3【C2H6N2O】
3） 分子量：74.08
4） 纯度：≥98%
5） 结构式：
诱发性肿瘤动物模型制作方法简便，重复性好，可以在较短时间内大量复制，而且基本模拟了癌变的过程，因此在实验中应用较广。诱发性大肠癌模型有较长的历史，目前建立大肠癌诱发模型用的最多的试剂是二甲基肼(DMH)和氧化偶氮甲烷(AOM)，甲基硝基亚硝基胍(MNNG)也是得到广泛应用的一种致癌物。
氧化偶氮甲烷（Azoxymethane）是一种对大鼠和小鼠具有强力诱发大肠癌作用的物质，用于氧化偶氮甲烷诱导致畸预防性治疗的有效性评估研究。氧化偶氮甲烷也用于确认某些啮齿动物模型所使用的特殊食物，例如难消化糖，红肉和绿茶的化学预防性能。这些啮齿动物模型可以帮助鉴别可预防人类大肠癌可能的手段。
性能
氧化偶氮甲烷（Azoxymethane）
细胞生物学用 100mg
C2H6N2O=74.08
[CAS No.] 25843-45-2
含量（cGC）：98.2%
1,2-二甲基肼二盐酸盐
C2H10Cl2N2 = 133.02
[CAS No.] 306-37-6
CAS： 306-37-6
1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍
C2H5N5O3 = 147.09
[CAS No.] 70-25-7
相关产品
| 厂商货号 |
品牌 |
品名(中文) |
CAS |
纯度及级别 |
包装
|
| 011-20171 |
WAKO |
氧化偶氮甲烷 AZOXYMETHANE |
25843-45-2 |
细胞生物学用 |
100mg
|
| 0520606401 |
MP |
二甲基肼二盐酸盐 N,N’-DIMETHYLHYDRAZINE di HCl (SYM) |
306-37-6 |
|
1g
|
| D161802-10g |
Sigma |
1,2-二甲基肼二盐酸盐 N,N’-Dimethylhydrazine dihydrochloride |
306-37-6 |
98% |
10g
|
| 138-14901 |
WAKO |
1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍 1-METHYL-3-NITRO-1-NITROSUGUANIDINE |
70-25-7 |
|
5g
|
参考文献
- Escribano, M., et al., Aspirin inhibits endothelial nitric oxide synthase (eNOS) and Flk-1 (vascular endothelial growth factor receptor-2) prior to rat colon tumour development. Clin. Sci. (Lond)., 106: 83-91 (2004).
- Marotta, F., et al., Chemopreventive effect of a probiotic preparation on the development of preneoplastic and neoplastic colonic lesions: an experimental study. Hepatogastroenterology, 50: 1914-8 (2003).
- Orii, S., et al., Chemoprevention for colorectal tumorigenesis associated with chronic colitis in mice via apoptosis. J. Exp. Clin. Cancer Res., 22: 41-6 (2003).
- Pool-Zobel, B., et al., Experimental evidences on the potential of prebiotic fructans to reduce the risk of colon cancer. Br. J. Nutr., Suppl 2: S273-81 (2002).
- Nakanishi, S., et al., Effects of high amylose maize starch and Clostridium butyricum on metabolism in colonic microbiota and formation of azoxymethane-induced aberrant crypt foci in the rat colon. Microbiol Immunol., 47: 951-8 (2003).
- Pierre, F., et al., Meat and cancer: haemoglobin and haemin in a low-calcium diet promote colorectal carcinogenesis at the aberrant crypt stage in rats. Carcinogenesis, 24: 1683-90 (2003).
- Metz, N., et al., Suppression of azoxymethane-induced preneoplastic lesions and inhibition of cyclooxygenase-2 activity in the colonic mucosa of rats drinking a crude green tea extract. Nutr Cancer., 38: 60-4 (2000).
- Corpet, D.E. and Pierre, F., Point: From animal models to prevention of colon cancer. Systematic review of chemoprevention in min mice and choice of the model system. Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev., 12: 391-400 (2003).
- Guda, K., et al., Defective processing of the transforming growth factor-beta1 in azoxymethane-induced mouse colon tumors. Mol. Carcinog., 37: 51-9 (2003).
- Guda, K., et al., Aberrant transforming growth factor-beta signaling in azoxymethane-induced mouse colon tumors. Mol Carcinog., 31: 204-13 (2001).
- Relan, N.K., Identification and evaluation of the role of endogenous tyrosine kinases in azoxymethane induction of proliferative processes in the colonic mucosa of rats. Biochim Biophys Acta., 1244(2-3): 368-76 (1995 Jun 9)
- Kishimoto, Y., et al., Effects of cyclooxygenase-2 inhibitor NS-398 on APC and c-myc expression in rat colon carcinogenesis induced by azoxymethane. J. Gastroenterol., 37: 186-93 (2002).
结肠癌（Colon cancer）模型建立案例：
1、 文献来源：Wirtz S, et al. Chemically induced mouse models of intestinal inflammation. Nat Protoc. 2007; 2(3):541-6.
1.1 DSS溶液制备（2% DSS溶液）：溶解10gDSS于500ml无菌的饮用水中，使用前溶液保存在4℃，好现配现用。
1.2 AOM溶液制备：用无菌水溶解AOM配制10 mg/ml的储存液，分装后放到-20℃保存，避免反复冻融。使用之前，融化分装母液并用无菌生理盐水1:10倍稀释。
1.3 小鼠结肠炎相关的依赖性结直肠癌造模方法【详见懋康官网：www.maokangbio.com】
2、文献来源：Neufert C, et al. An inducible mouse model of colon carcinogenesis for the analysis of sporadic and inflammation-driven tumor progression. Nat Protoc. 2007; 2(8):1998-2004.
2.1 DSS溶液制备（2.5% DSS溶液）：称取2.5g DSS溶于100ml无菌水，本溶液置于4℃可稳定保存1周。好现配现用。
2.2 AOM溶液制备：用无菌水溶解AOM配制10 mg/ml的储存液，分装后放到-20℃保存，避免反复冻融。AOM在水或生理盐水中的稳定性高于PBS缓冲液，且在玻璃管内稳定性好于塑料管。使用之前，融化分装母液并用无菌生理盐水1:10倍稀释。
2.3 小鼠结肠癌造模方法
1）第1天称重，等数分组并标记小鼠；
2）按照10mg/kg体重的浓度计算所需的AOM量，取适量的AOM储存液（10mg/ml）用无菌生理盐水1:10倍稀释。
3）腹腔注射AOM工作液（剂量10mg/kg体重，则10g体重小鼠注射100ul工作液）到实验组小鼠，同时注射等体积的无菌生理盐水到对照组小鼠。
4）自此步之后，按照两种方法继续实验。若建立自发性肿瘤进展模型，见方案A；若建立慢性炎症驱动的肿瘤进展模型，见方案B。
方案A，自发性肿瘤进展模型
A1，第8天重复步骤1）-3）；
A2，第15天重复步骤1）-3）；
A3，第22天重复步骤1）-3）；
A4，第29天重复步骤1）-3）；
A5，第36天重复步骤1）-3）；【到这步每只小鼠都腹腔注射给药6次】
A6，第一次注射后的3个月评估癌前病变，此时不需处死动物。
A7，第一次注射后的6个月评估肿瘤发展。
方案B，慢性炎症驱动的肿瘤进展（Chronic inflammation-driven tumor progression）
B1，制备2.5%（wt/v）DSS溶液。此浓度的DSS能让FVB/N小鼠和其他品系产生良好的造模效果。
B2，按3天的用量加DSS溶液灌满小鼠笼内的饮水槽，以5ml DSS溶液/小鼠/天用量，对照小鼠加等体积不含DSS的饮用水；
B3，第4天清空饮水槽内残留DSS溶液，并且重新灌满另2天所需量的新鲜DSS溶液。
B4，第6天清空饮水槽内残留DSS溶液，并且重新灌满另2天所需量的新鲜DSS溶液。
B5，第8天清空饮水槽内残留DSS溶液，并且重新灌满灭菌水。
B6，第22-29日重复步骤B1）-B5）。
B7，第40日评估癌前病变，此时不需处死动物。
B8，第53-60日重复步骤B1）-B5）。
B9，第80日评估肿瘤发展。
2.4 AOM诱导肿瘤图示（图1）
图1.内窥镜肿瘤调研。通过迷你腔镜监测AOM诱导的肿瘤形成情况。a）还能用于纵向研究；b）对于肿瘤负荷分析，每只小鼠的肿瘤大小按照预设的时间点记录并做总和。
Azoxymethane（AOM）订购信息：欢迎来电咨询
| 品牌 |
货号 |
名称 |
CAS NO. |
规格 |
| Sigma |
A5486-25MG |
Azoxymethane 偶氮甲烷 |
25843-45-2 |
25mg |
| Sigma |
A5486-100MG |
Azoxymethane 偶氮甲烷 |
25843-45-2 |
100mg |
| Wako |
011-20171 |
Azoxymethane 偶氮甲烷 |
25843-45-2 |
100mg |
DSS（Mw：36000-50000 Da）订购信息：
| 品牌 |
货号 |
名称 |
规格 |
| MPbio
|
0216011010 |
DSS（Mw：36000-50000 Da）硫酸葡聚糖钠盐 |
10g |
| MPbio |
0216011050 |
DSS（Mw：36000-50000 Da）硫酸葡聚糖钠盐 |
50g |
| MPbio |
0216011080 |
DSS（Mw：36000-50000 Da）硫酸葡聚糖钠盐 |
100g |
| MPbio |
0216011090 |
DSS（Mw：36000-50000 Da）硫酸葡聚糖钠盐 |
500g |
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
造模疾病名称 产品编号 品名 规格 包装
精神分裂症模型 136-16303 Methylazoxymethanol Acetate 20mg
大肠炎 194-14921 Sodium Dextran Sulfate 36,000 ～ 50,000 – 10g
皮肤肿瘤 147-03421 4-Nitroquinoline 1-Oxide 1g
膀胱炎 160-05191 Protamine Sulfate, from Salmon 1g
Wako 011-20171 Azoxymethane 25843-45-2 AOM大肠癌疾病造模试剂
帕金森病 136-16381 1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine Hydrochloride（MPTP）10mg
大肠肿瘤 011-20171 Azoxymethane 100mg
乳腺肿瘤 042-02801 7,12-Dimethylbenz(α)anthracene 1g
肺肿瘤 147-03421 4-Nitroquinoline 1-Oxide 1g
糖尿病 191-15151 Streptozotocin 100mg
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