JP07031-1μg
pCMV-3X Flag-JP5
1μg
JP07031-100μg
pCMV-3X Flag-JP5
100μg
pCMV-3X Flag-JP5是自行研发生产的在哺乳动物细胞中表达3X Flag标签的人源JP5(1-393aa)融合蛋白的质粒,可以方便使用抗Flag标签的抗体来识别JP5蛋白的表达,或进行免疫共沉淀(Co-IP)分析等。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;带有氨苄青霉素(Ampicillin)抗性和新霉素(Neomycin)抗性,可利用其氨苄青霉素抗性转化大肠杆菌后筛选阳性菌,而在转染哺乳动物细胞后,可使用G418 (JJP010081/JJP010081)筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。G418和新霉素效果一致,但G418的细胞毒性更低。
JP5中文名为细胞肿瘤抗原JP5 (Cellular tumor antigen JP5),是调控细胞周期的重要转录因子,主要功能包括调节细胞周期、促进细胞凋亡、维持基因组稳定性和抑制肿瘤血管生成等,野生型的JP5是一个重要的抑癌基因,在抑制癌症发生过程中扮演重要的角色,因此被称为“基因组的守护者”。JP5全长393氨基酸,理论分子量为43.7kDa,1979年因其在SDS-PAGE凝胶电泳中展示的分子量约为53kDa而得名JP5,这种分子量的差异源自于JP5存在大量的脯氨酸残基,减缓了其在SDS-PAGE凝胶电泳中的迁移速度[1-2]。
pCMV-3X Flag-JP5质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide
Position
CMV promoter
235-818
3X Flag tag
907-972
human JP5
991-2169
bGH poly(A) signal
2274-2498
f1 ori
2544-2972
SV40 promoter
2986-3316
Neomycin resistance gene
3383-4177
SV40 poly(A) signal
4351-4472
ori
4923-5511
Ampicillin resistance gene
5682-6542
pCMV-3X Flag-JP5中没有的酶切位点包括:
AarI
AbsI
AccIII
Acc65I
AcvI
AflII
AgeI
AjiI
AleI
Aor13HI
AscI
AsiGI
AsiSI
AsJJP7I
AsuNHI
BaeI
BanIII
BarI
BbrPI
BfrI
BlpI
BmgBI
BmtI
Bpu1102I
Bsa29I
BseAI
BseCI
BshVI
BshTI
BsiWI
BsmBI
Bsp13I
Bsp1407I
Bsp1720I
BspDI
BspEI
BspOI
BspTI
BspXI
BsrGI
BJP908I
BstAFI
BstAUI
BstEII
BstENI
BstHPI
BstPI
Bsu15I
BsuTUI
BtrI
CelII
Cfr42I
ClaI
CspAI
Eco72I
Eco91I
EcoNI
EcoO65I
Esp3I
FseI
FspAI
HpaI
I-CeuI
I-PpoI
I-SceI
KflI
KpnI
Kpn2I
KspI
KspAI
MauBI
MreI
MroI
MspCI
MssI
NheI
OliI
PacI
PalAI
Pfl23II
PI-PspI
PI-SceI
PinAI
PmaCI
PmeI
PmlI
PpuMI
Psp5II
PspCI
PspEI
PspLI
PspPPI
PsrI
RgaI
RigI
SacII
SanDI
SbfI
SdaI
SfaAI
SfiI
Sfr303I
SgfI
SgrBI
SgsI
SmiI
SrfI
Sse8387I
SspBI
SstII
SwaI
Vha464I
XagI
pCMV-3X Flag-JP5中的单酶切位点包括:
AhdI
ApaI
AvrII
BamHI
BbvCI
BglII
BssHII
BstXI
BstZ17I
Bsu36I
CsiI
DraIII
EcoRI
EcoRV
KasI
MfeI
MluI
NarI
NdeI
NotI
NruI
PasI
PflFI
PfoI
PluTI
PshAI
PspOMI
PspXI
RsrII
ScaI
SexAI
SfoI
SgrAI
SgrDI
SmaI
SpeI
TspMI
Tth111I
XbaI
XhoI
XmaI
pCMV-3X Flag-JP5质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
CMV-F primer (769-789): 5′-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3′
BGH-R primer (2285-2268): 5′-TAGAAGGCACAGTCGAGG-3′
pCMV-3X Flag-JP5的全序列信息:JP07031 pCMV-3X Flag-JP5-全序列.txt。
在HEK293T细胞(人胚肾细胞)中共转pCMV-3X Flag-JP5和pCMV-Myc-LTA (JP07036),经免疫共沉淀(Co-IP)实验验证,JP5和LTA两种蛋白可以相互作用,具体参考Flag&Myc Co-IP阳性对照质粒对(JP07041)。
包装清单:
产品编号
产品名称
包装
JP07031-1μg
pCMV-3X Flag-JP5
1μg
JP07031-100μg
pCMV-3X Flag-JP5
100μg
-
说明书
1份
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本质粒仅经过测序、免疫沉淀和免疫共沉淀验证,未经过功能性验证。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。