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一般描述

转染操作可将小干扰RNA（siRNA）直接递送至细胞中。X-tremeGENE siRNA转染试剂是一种脂质体转染试剂，为向动物细胞中递送siRNA提供了一种方便、可靠和高效的途径，便于用户进行基因敲除后的细胞及功能学研究。

这一创新型试剂能够与siRNA以及siRNA和质粒的混合物（共转染的情况下）形成复合物，并有效递送这些核酸进入细胞，以介导基因沉默。只需简单的几步就可完成转染：首先将转染试剂与稀释过的siRNA混合并孵育，之后将复合物直接加入细胞培养物中。由于X-tremeGENE siRNA转染试剂在有无血清的条件下均工作良好，且经论证无明显细胞毒性，因此无需更换培养基。本品不含任何动物源性成份。

组分

本试剂经0.2 μm滤膜过滤，聚丙烯小管包装。

应用

X-tremeGENE siRNA 转染试剂能够有效将短干扰RNA（siRNAs）转入许多种常用细胞，包括HeLa，NIH 3T3，HEK-293，CHO-K1，和COS-7和一些难转染细胞系，比如HT29，一种人腺癌细胞系。

特点和优势

-在多种不同类型细胞中基因敲除效率超过90%。

-高灵活应用，同一试剂可用于siRNA和质粒共转染的基因沉默实验。

-细胞毒性低，结果相关性好，确保所观察到的细胞效应是由转染的siRNA而非转染过程本身介导。

-兼容含血清或不含血清的培养基，转染前后均无需换液（如无血清培养基）。;

X-tremeGENE siRNA转染试剂是一款包含脂质体及其他组份的专利混合试剂，无动物源成分。

质量

活性分析：将X-tremeGENE siRNA转染试剂（1 – 2.5 μl）与特异性靶向HPRT看家基因的siRNA（0.1 – 0.35 μg）相互混合。在含10%胎牛血清（FBS）的条件下，将此混合物用于转染HEK-293细胞（生长密度为30-50%的单层细胞）。转染后通过LightCycler®实时荧光定量PCR来检测细胞中HPRT mRNA水平的降低情况。测得的mRNA数据显示，观察到的敲除效率通常处于70-95%。

细胞毒性分析：HEK-293细胞暴露于siRNA/X-tremeGENE siRNA试剂混合物中72小时，未对含有血清的培养基进行换液。之后通过WST-1细胞增殖试剂（Roche）分析细胞，以测试细胞毒性。

其他说明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

法律信息

X-tremeGENE is a trademark of Roche